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肠道硫酸盐还原菌DGGE分析技术的建立被引量：2: 2013年; 目的建立分析肠道内硫酸盐还原菌(Sulfate-reducing bacteria,SRB)组成的变性梯度凝胶电泳(Denaturing gra-dient gel electrophoresis,DGGE)技术,并用于分析10例健康人粪便样品中的SRB组成。方法从GenBank中下载13株脱硫弧菌科细菌的腺苷酰硫酸还原酶α亚基基因(aprA)的序列,利用Clustal X、Simulated PCR(SPCR)软件比较、评估了2对针对aprA基因的引物(AprA-3-FW/APS-RV和AprA-1-FW/AprA-5-RV)用于扩增粪便样品中的SRB的特异性。确定PCR引物和条件,进一步摸索并建立DGGE分析体系。结果 Clustal X和SPCR软件分析的结果均表明引物AprA-3-FW/APS-RV优于AprA-1-FW/AprA-5-RV。实际PCR的结果也显示AprA-1-FW/AprA-5-RV扩增效率低并有非特异扩增。建立DGGE体系,对10例健康人肠道中SRB的分析显示,每个个体肠道中SRB的种类有1到5种不等。结论基于aprA序列的DGGE技术是分析肠道SRB组成的有效方法。; 刘辰雷殷晓晨龙文敏费娜赵立平庞小燕; 关键词：硫酸盐还原菌 DGGE 肠道菌群

健康人粪便提取液细胞毒性的动态监测被引量：2: 2015年; 本研究旨在探究自由生活、饮食和作息规律的健康人粪便提取液对肠上皮细胞的细胞毒性的范围及稳定性。共招募10名健康青年志愿者(男性:女性=1:1,年龄23~34岁),22 d内采集6次新鲜粪便样品(第1天,第2天,第3天,第8天,第15天,第22天),以人结直肠腺癌HT-29细胞作为模型,采用MTT(噻唑蓝)法检测粪便提取液的细胞毒性。志愿者采样前记录'24小时膳食回顾',用于膳食营养素分析。研究发现,自由生活的健康人粪便提取液的细胞毒性存在较大差异,细胞存活率的范围在12.3%~103.2%。每位志愿者在一段时间内的粪便提取液细胞毒性并不稳定,个体内差异的变异系数范围为10.6~43.5。细胞毒性与食物中能量和碳水化合物的摄取存在弱正相关关系,但与p H值无关。5名男性粪便提取液的细胞毒性显著高于5名女性。本研究表明自由生活的健康人粪便提取液的细胞毒性有较大个体间和个体内的差异,该结果为后续深入理解不同健康和疾病个体粪便提取液的生物活性与宿主肠道健康的关系奠定了基础。; 李学明冯舟李浩捷徐仁应付华清庞小燕; 关键词：细胞毒性 HT-29细胞膳食

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国家自然科学基金(30800155)