湖南省自然科学基金(08JJ5004)
- 作品数：7 被引量：39H指数：3
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- 过表达外源M-CSF促进MCF7细胞增殖被引量：2
- 2009年
- 为探讨过表达外源巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对细胞增殖的影响,将重组载体pCMV/cyto/myc-M-CSF转染MCF7细胞、G418筛选,RT-PCR、Western印迹和免疫荧光鉴定M-CSF的mRNA表达、蛋白表达及定位,通过计算细胞倍增时间、MTT法及反义寡核苷酸抑制实验分析M-CSF对细胞增殖的影响.结果表明,转染M-CSF的MCF7细胞过表达M-CSF mRNA及蛋白,并且定位表达于细胞质;与转染空载体及未转染M-CSF组细胞比较,转染M-CSF的MCF7细胞倍增时间明显缩短、增殖能力显著增强,M-CSF的特异性反义寡核苷酸能抑制转染M-CSF的MCF7细胞的增殖,且抑制率随着反义寡核苷酸浓度的增高而增强;以上结果提示,胞质过表达M-CSF可促进MCF7细胞的增殖.
- 涂剑姚志红龙治峰朱炳阳唐圣松
- 关键词：巨噬细胞集落刺激因子胞质细胞增殖
- 二烯丙基三硫通过线粒体依赖性途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡被引量：3
- 2009年
- 二烯丙基三硫(diallyl trisulfide,DATS)对多种肿瘤有抗癌作用,但机制尚不完全清楚.为探讨DATS对人肝癌细胞系HepG2细胞凋亡的影响,用丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)法观察细胞凋亡情况,在显微镜下计数凋亡细胞数.JC-1荧光染色观察线粒体膜电势变化.Western blot法检测细胞色素c蛋白分布,ELISA法检测caspase-3活性.结果显示,DATS诱导HepG2细胞凋亡,用50μmol/L与100μmol/LDATS处理48h,细胞凋亡率分别达到60.33%和93.67%,并引起HepG2细胞线粒体膜电势降低.Western blot显示,DATS能诱导胞浆细胞色素c增加,与此同时,线粒体细胞色素c减少,诱导HepG2细胞caspase-3活化.提示:DATS可通过降低线粒体膜电势,促进细胞色素c由线粒体膜释放到胞浆中,激活caspase-3途径诱导人肝癌细胞系HepG2细胞凋亡.
- 肖志科张蒙夏姜浩伍尤华艾小红罗红梅汪煜华雷小勇唐圣松
- 关键词：HEPG2细胞系线粒体二烯丙基三硫细胞凋亡
- 二烯丙基三硫诱导人髓样白血病HL-60细胞活性氧产生及其细胞毒性作用被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨二烯丙基三硫(DATS)诱导人白血病HL-60细胞产生活性氧(ROS)及其细胞毒性作用。方法:用浓度为50、100、150、200μmol/L DATS处理HL-60细胞1、3、6、12、24h后,流式细胞计数法检测HL-60细胞内的ROS水平,NBT还原实验分析NADPH氧化酶的活性,分别用NADPH氧化酶特异性阻断剂apocynin与抗氧化剂NAC(N-acetyl-L-cystein)预处理30min后,观察DATS对HL-60细胞产生活性氧的影响,分光光度法检测细胞质膜氧化产物丙二醛(MDA)与细胞蛋白氧化产物羰基化蛋白(protein carbonyl)。结果:DATS能诱导人白血病HL-60细胞产生ROS,当DATS处理细胞1-3h时,HL-60细胞产生ROS随DATS浓度的升高和处理时间的延长而升高,当浓度为150μmol/L DATS处理细胞3h时,ROS的荧光强度达到最高峰,其后维持在一个较高水平。NADPH氧化酶活性与ROS的产生一致。HL-60细胞的脂质过氧化和羰基化蛋白浓度与DATS诱导ROS产生的趋势基本一致,都在3h、150μmol/L处理点达到最高值。应用NADPH氧化酶特异性阻断剂apocynin或抗氧化剂NAC后,能显著降低HL-60细胞ROS的产生和细胞损伤。结论:NADPH氧化酶是DATS诱导HL-60细胞产生ROS的主要酶系,ROS能氧化细胞质膜和蛋白质。
- 伍尤华曹校校张蒙夏田志臻雷小勇涂剑罗红梅唐圣松
- 关键词：二烯丙基三硫NADPH氧化酶活性氧丙二醛HL-60细胞
- Rho GTPase在信号转导和细胞骨架中的作用被引量：12
- 2009年
- Rho GTPases参与多种重要的细胞生命活动,如肌动蛋白细胞骨架的重构、细胞黏附、细胞运动、囊泡运输、转录激活、基因表达和细胞周期的调控等。当Rho GTPase蛋白水平改变,活性状态改变,效应蛋白丰度改变后,出现异常的Rho信号,从而影响细胞骨架重组使细胞迁移。调节这些生物信号的转导通路非常复杂,因此,Rho GTPases已成为近年来的研究热点。
- 姚志红唐圣松
- 关键词：RHOGTPASES信号转导细胞骨架
- 大蒜提取单体化合物生物学功能的研究进展被引量：1
- 2008年
- 目的介绍从大蒜中提取的单体化合物的主要生物学功能的研究进展。方法查阅国外及国内近年来的相关文献,并进行分析和综述。结果与结论从大蒜中提取的各单体化合物具有抗病原微生物、抗肿瘤、治疗心脑血管疾病、抗氧化、保护神经组织、抗肥胖、调节血糖、延缓衰老等广泛的生物学功能,值得深入研究。
- 施枝军唐圣松
- 关键词：大蒜单体化合物生物学活性
- M-CSF上调cyclinD1/D3和CDK2/6的表达促进HeLa细胞增殖被引量：1
- 2009年
- 非分泌型巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的表达在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用,为探讨胞质M-CSF对细胞增殖的影响,采用基因重组技术构建胞内稳定表达M-CSF的HeLa细胞系,以空载体(pCMV/myc/cyto)转染HeLa细胞和未转染HeLa细胞作为对照,MTT法及反义寡核苷酸抑制实验分析M-CSF对细胞增殖的影响,并计算细胞倍增时间,RT-PCR观察胞内M-CSF对G1期细胞周期相关蛋白的影响.结果显示,与对照组比较,转染M-CSF的HeLa细胞倍增时间明显缩短、增殖能力显著增强,M-CSF的特异性反义寡核苷酸能抑制转染M-CSF的HeLa细胞的增殖,且抑制率随着反义寡核苷酸浓度的增高而增强,转染M-CSF的HeLa细胞的cyclinD1/D3和CDK2/6 mRNA表达显著升高(P<0.05).提示:M-CSF可上调cyclinD1/D3和CDK2/6的mRNA表达,促进HeLa细胞的增殖.
- 涂剑吴海燕张蒙夏张晓红罗红梅龙治峰汪煜华雷小勇唐圣松
- 关键词：巨噬细胞集落刺激因子HELA细胞细胞增殖细胞周期相关蛋白
- ROS介导JNK信号通路的研究进展被引量：15
- 2010年
- c-JunN端激酶(JNK)通路是细胞感受外界环境变化的重要途径,与细胞增殖、分化、凋亡等生命过程息息相关。活性氧(ROS)具有很高的生物学活性,可作为第二信使参与到JNK信号通之中。ROS可通过ASK1、Src激酶、GSTπ、MLK3、RIP-TRAF2复合体、MKPs等信号蛋白活化JNK,也可以充当IKK/NF-κB、ERK等信号通路与JNK信号通路交叉对话的桥梁。另外JNK有时可出现在ROS上游,可通过促进ROS产生或聚集而发挥生物学作用。本文将对近年来ROS介导JNK信号通路网络调控的研究进展作一综述。
- 刘乐江唐圣松
- 关键词：ROSJNK信号通路
