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上海市宝山区科技发展基金(11-E-6)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
马晓文
陈凤玲
王晶
胡其娴
胡小磊
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相关机构:
上海交通大学医学院附属第三人民医院
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发文基金:
上海市宝山区科技发展基金
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马晓文
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2013
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小鼠OC-STAMP蛋白表达、纯化、抗体制备及鉴定
被引量:4
2013年
目的 OC-STAMP蛋白是一种功能尚不明确的六次跨膜蛋白,通过制备多克隆抗体来为进一步研究其功能奠定基础。方法采用PCR技术扩增出目的基因,将其克隆到pGEX-4T-1原核表达载体中。经IPTG诱导后,重组质粒pGEX-4T-1/OC-STAMP表达含重组谷胱甘肽转移酶(GST)的融合蛋白GST-OC-STAMP。GST-OC-STAMP融合蛋白经纯化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。此后应用ELISA及Westernblot方法鉴定该抗体。结果 pGEX-4T-1/OC-STAMP重组质粒构建成功,并通过原核表达获得达到免疫要求的融合蛋白。免疫所得抗体血清经间接ELISA法、Westernblot检测,确定获得了高效价的小鼠OC-STAMP多克隆抗体。结论成功制备了小鼠OC-STAMP抗体,为进一步研究基因功能奠定了基础。
胡其娴
马晓文
胡小磊
沈琼娜
王晶
陈凤玲
关键词:
GST融合蛋白
多克隆抗体
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