国家自然科学基金(31071299)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 微流控电融合芯片的研制及其在体细胞重编程中的应用
- 2013年
- 目的开发高通量的细胞电融合平台,并通过此平台将小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)与体细胞融合,探讨融合细胞的多能性。方法本实验室自主研发微流控芯片,将转染了绿色荧光的mESCs与转染了红色荧光的NIH3T3细胞进行电融合,并计算其排队率与融合率。通过流式细胞仪筛选出表达两种荧光的融合细胞,观察融合细胞的表型。RT-PCR检测NIH3T3、mESC以及融合细胞的多能性基因(Nanog、OCT4、SOX2和LIN28)mRNA的表达水平。结果自主研发了微流控芯片,构建了高通量的细胞电融合平台,通过此平台将mESCs与NIH3T3进行电融合,其排队率为(44.35±10.99)%,融合率为(59.88±20.03)%,融合细胞可形成类似于ESC样的克隆。RT-PCR法结果显示mESC和融合细胞均表达多能性基因Nanog、OCT4、SOX2和LIN28 mRNA,而NIH3T3不表达。结论通过自主研发的微流控芯片,可实现mESCs与NIH3T3的高效融合,使体细胞重编程为多能性干细胞。
- 吴畏徐海伟屈娅张小玲胡宁阴正勤
- 关键词：电融合体细胞重编程微流控芯片胚胎干细胞
- 细胞融合致体细胞重编程机制研究进展被引量：3
- 2012年
- 已分化的体细胞能够通过重编程转化回多能干细胞,在细胞移植、疾病细胞模型的制备以及药物筛选等领域具有重要意义。通过干细胞和体细胞的细胞融合,可使体细胞重编程。细胞融合致体细胞重编程速度快、效率高,是一种研究重编程机制的重要手段。对细胞融合致体细胞重编程的机制作一综述。
- 吴畏徐海伟屈娅阴正勤
- 关键词：细胞融合体细胞重编程去甲基化表观遗传学
- LXR激动剂TO901317对成年小鼠海马齿回星形胶质细胞的作用
- 2011年
- 目的观察肝脏X受体(liver X receptor,LXR)激动剂TO901317对成年小鼠海马齿回(dentate gyrus,DG)星形胶质细胞数量以及海马齿回颗粒下区(dentate gyrus subgranular zone,DG-SGZ)星形胶质细胞放射状突起的作用。方法 3个月龄健康雄性C57B/L6小鼠采用TO901317激动剂灌胃1周,采用免疫组化检测小鼠海马星形胶质细胞的数量和形态学变化,采用RT-PCR检测海马LXRα、LXRβ、Klf-9、ABCA1、ABCG1和apoE的表达。测量肝脏大小和质量。结果 TO901317激动剂灌胃1周后,海马齿回胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性的星形胶质细胞数量显著减少(P<0.05),而海马DG-SGZ区GFAP阳性的放射状纤维显著增多(P<0.01);小鼠海马LXRα表达无显著变化(P>0.05),而LXRβ表达显著下降(P<0.05),Klf-9、ABCA1、ABCG1和apoE表达显著升高(P<0.05)。灌注TO901317后小鼠肝脏显著肿大,质量较DMSO对照组显著增加(P<0.01)。结论 TO901317通过LXRβ受体调节Klf-9、ABCA1、ABCG1、apoE的表达,从而显著增加海马神经发生区GFAP长纤维的延伸。
- 黄伟郭亮徐培范晓棠徐海伟
- 关键词：肝脏X受体星形胶质细胞海马肝脏神经发生
- 肝脏X受体β对围生期小鼠海马细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察肝脏X受体β(liver X receptorβ,LXRβ)对围生期小鼠海马细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成的影响。方法在胚胎发育18.5 d(E18.5)和生后第2天(P2)行海马免疫组织化学方法检测,分别采用细胞增殖标记增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),放射状胶质细胞或前体细胞标记Nestin以及放射状胶质细胞标记脑脂质结合蛋白(brain lipid binding protein,BLBP),比较野生小鼠和LXRβ敲除小鼠的表达差异。结果在小鼠E18.5和P2,LXRβ在海马有丰富表达;在小鼠E18.5,LXRβ敲除小鼠中海马齿状回PCNA细胞数量明显减少(P<0.01),BLBP标记的放射状胶质细胞纤维数量减少(P<0.05),胞体无明显改变(P>0.05)。P2与E18.5相比,PCNA阳性细胞数轻微增加,敲除小鼠与野生小鼠相比,PCNA阳性细胞数明显减少(P<0.05);BLBP标记的放射状胶质细胞胞体数量轻微增加,但敲除小鼠与野生小鼠相比,胞体数量无明显改变(P>0.05),纤维数量明显减少(P<0.05),在E18.5和P2,Nestin阳性细胞的分布与BLBP一致,但敲除小鼠中纤维出现断裂。结论 LXRβ参与围生期小鼠海马的细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成。
- 郭亮黄伟徐培范晓棠徐海伟
- 关键词：海马
