江西省自然科学基金(2007GZY1132)
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
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- 氯化镧对子宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移能力的影响被引量：8
- 2010年
- 目的探讨氯化镧对宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移能力的影响，为寻找新的有效治疗宫颈癌的药物提供实验依据。方法宫颈癌细胞株HeLa细胞经培养、传代后分为两组，即实验组（加入5、50、100μmol／L的氯化镧）和对照组（未加入氯化镧）。倒置显微镜下观察两组细胞的生长情况，激光共聚焦显微镜观察两组细胞核的形态变化。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测两组细胞的增殖情况，双染色流式细胞仪检测两组细胞的凋亡率，体外迁移实验检测两组细胞迁移能力的变化，逆转录（RT）-PCR技术检测两组细胞中增殖、抗凋亡和迁移相关基因细胞周期蛋白（cyclinD1）、锌指蛋白（A20）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA的表达。结果倒置显微镜下观察：实验组细胞随着氯化镧浓度的升高，细胞密度逐渐降低，细胞质内颗粒逐渐增多，颜色加深，细胞间隙增大，少量细胞变圆漂浮，脱落细胞也逐渐增多；而对照组细胞贴壁生长密集，形态清晰，胞质饱满，相邻细胞生长融合成片。激光共聚焦显微镜观察：实验组细胞核染色质浓聚边集，核体积变小，随着氯化镧浓度的升高，核染色质崩解，核膜破裂、核碎裂，直至细胞核完全碎裂；而对照组细胞核饱满，核膜完整。实验组细胞经不同浓度（5、50、100μmol／L）的氯化镧作用后，细胞生长抑制率分别为24％、51％、78％，高于对照组（0），差异有统计学意义（P〈0．05）；细胞凋亡率分别为（4．91±0．39）％、（7．30±0．71）％、（13．48±0．92）％，高于对照组的（0．89±0．11）％，差异有统计学意义（P〈0．01）；穿膜细胞数分别为（22．2±4．3）、（12．0±3．2）、（7．8±2．6）个，低于对照组的（41．2±5．4）个，差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组细胞中cyclinDl、A20及MMP-9mRNA的表达强度随氯化镧浓
- 刘丝荪陆丹缪丽芳熊秋迎陈新萍汪泱郭菲
- 关键词：宫颈肿瘤HELA细胞细胞增殖细胞运动
- TNF-α诱导宫颈癌细胞增殖、转移和耐药相关基因表达的时效分析被引量：1
- 2010年
- 目的探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)对宫颈癌Hela细胞增殖、转移和化疗耐药相关基因表达的影响。方法以外源性TNF-α作用于宫颈癌Hela细胞,作用不同时间点(0-24h)取样分析细胞周期蛋白cyclinD1,锌指蛋白A20,钙调神经磷酸酶CaN,基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-9),金属硫蛋白(MT-1,MT-2)等表达的时间-效应。结果TNF-α作用宫颈癌Hela细胞不同时间段(20min,1h,6h,24h),cyclinD1、A20、CaN、MMP-1、MMP-9、MT-1、MT-2 mRNA的表达都有不同程度改变。RT-PCR检测宫颈癌Hela细胞经TNF-α作用后cyclinD1、MMP-1、MT-2 mRNA的表达6小时达高峰24小时回落,A20、CaN、MMP-9、MT-1 mRNA表达1小时达高峰24小时回落。结论TNF-α诱导宫颈癌Hela细胞cyclinD1、A20、CaN、MMP-1、MMP-9、MT-1、MT-2 mRNA的表达具有时效性。TNF-α可能促进宫颈癌Hela细胞增殖、转移及耐药。
- 缪丽芳陆丹汪泱刘丝荪郭菲
- 关键词：宫颈癌肿瘤坏死因子-Α耐药基因
- 氯化镧抑制宫颈癌细胞转移的作用及机制
- 目的观察氯化镧对体外培养的人宫颈癌细胞（HeLa）侵袭、转移能力的影响,并探索其抑制宫颈癌细胞侵袭转移的相关分子机制,为寻找新的有效拮抗宫颈癌的药物及稀土运用于宫颈癌的治疗提供实验依据。方法 （1）以Transwell小...
- 郭菲汪泱缪丽芳俞玲芳刘丝荪程细高
- 关键词：氯化镧宫颈癌迁移NF-ΚB
- 文献传递
- 氯化镧经Caspase-3途径诱导子宫颈癌细胞凋亡被引量：1
- 2011年
- 目的探讨氯化镧体外诱导人子宫颈癌细胞凋亡的作用和分子机制,为探索稀土化合物的药用价值提供理论依据。方法采用形态学观察、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定氯化镧对HeLa细胞的抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率,蛋白质印迹技术分析Caspase-3蛋白表达的改变,并以分光光度法测定其活性。结果形态学分析和MTT法显示氯化镧能够抑制HeLa细胞生长并诱导其凋亡(P<0.05),其作用呈明显的量效关系。细胞周期实验结果说明,氯化镧可令细胞大多阻滞于G1期,并呈一定的浓度依赖性;氯化镧诱导细胞凋亡亦有剂量依赖性,在5μmol/L剂量下,细胞开始凋亡,随着药物浓度的增加,凋亡率不断增高,各浓度与对照组相比差异都具有统计学意义(P<0.01)。蛋白质印迹实验显示氯化镧亦可上调活化的Caspase-3蛋白表达水平及活性且呈浓度依赖性。结论一定浓度的氯化镧可抑制人子宫颈癌HeLa细胞的增殖并通过激活Caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。
- 郭菲赵萍缪丽芳陆丹俞玲芳汪泱
- 关键词：镧HELA细胞细胞凋亡CASPASE-3
- LPS刺激后小鼠巨噬细胞Toll样受体(TLR)4及肿瘤坏死因子α表达的变化(英文)被引量：4
- 2008年
- 革兰阴性菌败血症休克的发生主要是因为免疫系统对细菌LPS应答,产生过量细胞因子和炎性介质从而引起组织和器官损害。研究发现与果蝇Toll蛋白类似的哺乳动物Toll样受体家族在宿主防御中起重要作用,其中TLR4介导针对LPS的免疫应答。它们对病原体的保守结构产生应答并且激活单核细胞和中性粒细胞产生细胞因子和炎性介质。本研究观察LPS刺激后体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR4表达及最重要的炎性细胞因子之一的肿瘤坏死因子α分泌水平的变化。方法常规方法从BALB/C小鼠腹腔中分离出巨噬细胞(Mφ),细胞分为6组,分别加入LPS使其终浓度为0、0.001、0.01、0.1、1、10μg/ml,5%CO2,37℃孵育2h。流式细胞术测定Mφ表面TLR4的表达。同时取培养液上清采用ELISA方法检测TNFα。实验重复三次。结果①经0.01μg/mlLPS刺激的MφTLR4-PE阳性率与0μg/mlLPS组相比,P<0.05。其它浓度刺激组TLR4阳性率则与对照组无差异,P>0.05。Mφ细胞TLR4MFI随着LPS浓度的升高而增强,除了10μg/mlLPS组,其余各组MFI与对照组相比,P<0.05。②随着LPS浓度增加,TNFα分泌量逐渐升高,呈剂量依赖关系。但当LPS浓度达10μg/ml时,TNFα分泌量下降。结论LPS能够诱导Mφ胞膜表面TLR4表达和TNFα分泌升高,并且在一定浓度范围内呈量-效关系.
- 郭菲汪泱王共先李国辉胡靓
- 关键词：TOLL样受体4肿瘤坏死因子Α
- 氯化镧通过上调子宫颈癌细胞capase-3的表达诱导细胞凋亡
- 目的探讨氯化镧体外诱导人子宫颈癌细胞凋亡的作用和分子机制,为探索稀土化合物的药用价值提供理论依据。方法采用形态学观察、噻唑蓝（MTT）比色法测定氯化镧对Hela细胞的抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率,免疫印迹技...
- 郭菲汪泱陆丹俞玲芳程细高
- 关键词：氯化镧宫颈癌细胞细胞凋亡CASPASE-3
- 文献传递
- 氯化镧抑制宫颈癌细胞转移的作用及机制
- 目的观察氯化镧对体外培养的人宫颈癌细胞（He La）侵袭、转移能力的影响,并探索其抑制宫颈癌细胞侵袭转移的相关分子机制,为寻找新的有效拮抗宫颈癌的药物及稀土运用于宫颈癌的治疗提供实验依据。方法（1）以Transwell小...
- 郭菲汪泱缪丽芳俞玲芳刘丝荪程细高
- 关键词：氯化镧宫颈癌迁移NF-ΚB
- 文献传递
- 氯化镧阻断LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及TNF-α释放被引量：1
- 2010年
- 目的探讨氯化镧(LaCl3)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞钙信号通路激活及肿瘤坏死因子α(TNF-α)释放的影响。方法将巨噬细胞RAW 264.7随机分成四组:LPS组(培养液中含1μg/ml LPS),LaCl3+LPS组(以含2.5μmol/ml LaCl3的培养基孵育细胞一定时间后,再予以1μg/ml LPS刺激),LaCl3组(培养液中含2.5μmol/ml LaCl3)及对照组(培养液中不含LaCl3和LPS)。于不同时间点分别收集各组细胞及其培养上清待测。以Fluo-3/Am加载细胞,经上述不同分组处理一定时间后,流式细胞术观察细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中TNF-α水平。结果流式细胞术测定结果显示:LPS组细胞内[Ca2+]i为(336.67±26.16nmol/L),与对照组比较差异显著(P<0.01);LaCl3+LPS组(162.67±26.41nmol/L)显著低于LPS组(P<0.01);LaCl3组(29.84±6.42nmol/L)与对照组相比略低但无统计学意义(P>0.05)。LPS组细胞培养上清TNF-α含量(152.19±15.68pg/ml)与对照组相比,显著升高(P<0.01);而LaCl3+LPS组细胞培养上清中TNF-α含量为43.95±6.55 pg/ml,与LPS组相比显著下降(P<0.01)且与对照组相比无差异;LaCl3组细胞培养上清中TNF-α含量(27.84±3.73pg/ml)与LPS组相比显著下调(P<0.01),并且与对照组相比亦显著下调(P<0.05)。结论一定浓度的LaCl3可阻断LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及抑制TNF-α的释放。
- 胡意郭菲娄远蕾缪丽芳陆丹汪泱
- 关键词：氯化镧脂多糖钙离子肿瘤坏死因子Α
- 镧对不同炎性介质介导的NF-κB信号通路活化的调控作用
- 目的观察不同激活机制下(激活物分别为TNF-α及LPS,靶细胞分别为Hela及RAW264.7细胞及NF-κB组成性活化细胞株U266),氯化镧对各细胞中NF-κB信号通路关键分子的蛋白表达和磷酸化及MF-κB/p65亚...
- 郭菲李国辉娄远蕾冯年花汪泱
- 关键词：镧炎性介质核因子ΚB
- 文献传递
- 氯化镧通过上调子宫颈癌细胞capase-3的表达诱导细胞凋亡
- 目的探讨氯化镧体外诱导人子宫颈癌细胞凋亡的作用和分子机制,为探索稀土化合物的药用价值提供理论依据。方法采用形态学观察、噻唑蓝（MTT）比色法测定氯化镧对Hela细胞的抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率,免疫印迹技...
- 郭菲汪泱陆丹俞玲芳程细高
- 关键词：氯化镧宫颈癌细胞细胞凋亡CASPASE-3
- 文献传递
