江西省研究生创新基金(YC10A018)
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 相关作者：邵江华袁荣发刘天德杨志强王庆诺更多>>
- 相关机构：南昌大学第二附属医院江西省分子医学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省研究生创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶与细胞凋亡被引量：1
- 2013年
- 细胞凋亡是生命的基本现象之一,可以发生在生理或病理条件下。形态学表现为胞膜对称性丧失、染色质凝集、细胞皱缩、DNA破碎、线粒体肿胀和凋亡小体形成。它与一系列复杂的生化反应及不同基因的表达及调控、信号转导系统的正负调节密切相关。最近的研究表明,Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（Rho—associatedcoiled—coilcontainingproteinki-nase，ROCK）在调节多种细胞表型和动物疾病模型的凋亡方面起重要作用。本文就ROCK在细胞凋亡中所起的功能及作用作一综述。
- 刘天德袁荣发邵江华
- 关键词：细胞凋亡蛋白激酶RHO形态学表现线粒体肿胀病理条件
- Rock2对肝癌细胞放疗敏感度的影响
- 2012年
- 目的探讨Rock2对肝癌细胞放疗敏感度的影响。方法降低人肝细胞癌Huh-7和HepG2细胞中Rock2的表达,利用IR照射造成DNA损伤模型,MTT法检测细胞增殖情况,Western blot检测Cdc25A的变化,并用能量共振转移法检测Cdk2/CyclinE活性的改变。结果 IR诱导DNA损伤时,干扰Rock2组细胞较Rock2正常组细胞增殖受到抑制。Western blot检测发现,降低Rock2表达可导致肝癌细胞中DNA损伤时Cdc25A表达的进一步下降,而且Cdk2/CyclinE活性也随Cdc25A的降低而降低。结论降低Rock2表达可能通过抑制Cdc25A而增强肝癌细胞的放疗敏感度,为肝癌的治疗及基因表达调控研究提供新的靶基因。
- 刘天德余新刘秀霞袁荣发蒋成行邵江华
- 关键词：ROCK2肝细胞癌CDC25A放疗
- Rock2对细胞周期检查点Cdc25A的调节作用被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨肝癌细胞中Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)对细胞周期检查点细胞分裂周期蛋白25A(Cdc25A)的调节作用。方法:Western blotting检测51对肝癌及癌旁组织中Rock2与Cdc25A的蛋白表达情况。构建并筛选shRock2干扰质粒,稳定转染到人肝细胞癌Huh-7和HepG2细胞中,Western blotting检测Cdc25A蛋白表达变化;针对Rock2干扰序列,利用PCR定点突变技术进行碱基突变,构建Rock2突变质粒从而"恢复"Rock2表达,分析Cdc25A蛋白表达变化并用MTT法检测肝癌细胞增殖的改变。Western blotting检测Rock2稳定低表达的肝癌细胞中检查点激酶1(Chk1)和检查点激酶2(Chk2)蛋白的变化,免疫共沉淀及免疫荧光分析Rock2与Cdc25A的相互作用。结果:Rock2与Cdc25A蛋白在肝癌组织中较癌旁组织呈现高表达,而且两者呈正相关。肝癌细胞中稳定低表达Rock2后,Cdc25A蛋白表达明显下降;"恢复"Rock2表达后,Cdc25A蛋白表达增加而且肝癌细胞也出现增殖加快现象。Rock2低表达对Chk1和Chk2蛋白变化无明显影响。免疫共沉淀表明Rock2与Cdc25A直接相互作用,免疫荧光检测表明Rock2与Cdc25A存在共定位。结论:Rock2对细胞周期检查点Cdc25A起直接的正向调控作用,而且不依赖于Chk1/Chk2,可能为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因。
- 刘天德余新袁荣发王庆诺杨志强邵江华
- 关键词：细胞周期肝肿瘤
- 沉默Rock2对肝癌细胞增殖及凋亡作用的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨沉默Rock2基因对人肝癌细胞Huh-7和HepG2增殖和凋亡作用的影响。方法:实验分为空白对照组、干扰无意义组、转染PBS组及干扰Rock2组。将Rock2干扰质粒shRock2转染到人肝癌细胞Huh-7和HepG2中,通过实时荧光定量PCR检测Rock2mRNA的表达水平;Westernblot检测Rock2蛋白的表达水平;MTT比色法检测沉默Rock2后对Huh-7和HepG2细胞增殖抑制的影响;流式细胞术检测沉默Rock2对Huh-7和HepG2细胞周期及早期凋亡的变化。结果:将shRock2转染肝癌细胞系Huh-7和HepG2后,Rock2mRNA以及Rock2蛋白的表达水平均明显下降。沉默Rock2表达后,MTT结果显示Huh-7和HepG2细胞较对照组细胞增殖能力明显减弱(P<0.01);Huh-7和HepG2细胞G0/G1期细胞比例明显升高,而S期和G2/M期细胞比例明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);肝癌细胞的早期凋亡较对照组明显增加(P<0.01)。结论:沉默Rock2能明显抑制肝癌细胞系Huh-7和HepG2的增殖,并诱导其早期凋亡,提示Rock2可作为肝癌基因治疗的一个新的分子靶点。
- 刘天德袁荣发王庆诺蒋成行杨志强邵江华
- 关键词：蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶转染基因沉默
