广东省自然科学基金(04300906)
- 作品数：2 被引量：37H指数：1
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- 利用IVIAT技术鉴定鸭疫里默氏杆菌体内表达基因
- 为寻找新型疫苗靶标,采用体内诱导抗原技术筛选鸭疫里默氏杆菌的体内诱导基因。首先构建了鸭疫里默氏杆菌基因组质粒表达文库,库容量为10000CFU。再用经过鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清。通过原位免疫...
- 袁建丰覃宗华蔡建平谢明权吕敏娜余劲术吴彩燕
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌
- 文献传递
- 鸭疫里默氏菌病和大肠杆菌病鉴别诊断双重PCR方法的建立和应用被引量：37
- 2008年
- 本研究从鸭疫里默氏菌提取基因组DNA,采用细菌16S rRNA基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出鸭疫里默氏菌的部分16S rRNA基因,克隆及测序结果表明其全长1 512 bp,G+C含量为51%,该序列已登入GenBank,登录号为DQ078779。同时利用生物软件对GenBank收录的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的16S rRNA基因序列进行分析后,设计了鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的种特异性引物,分别能从各自的16S rRNA基因中扩增出长度为342和718 bp的DNA片段。并据此建立了一种能快速准确鉴别诊断鸭疫里默氏菌和大肠杆菌病的双重PCR方法,该方法能从肝脏组织悬液煮沸后的上清、细菌培养物或提取的细菌基因组DNA中快速扩增出相应的片段,进行鉴别诊断。
- 覃宗华蔡建平吕敏娜余劲术吴彩艳温列娜谢明权
- 关键词：鸭疫里默氏菌大肠杆菌RRNA
- 1型鸭疫里默氏杆菌p25蛋白基因(p25)的克隆表达及免疫学活性
- 2011年
- 为探讨1型鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)p25蛋白的免疫原性,从RA1型基因组DNA中扩增出p25基因全长ORF,生物信息学分析显示其为含有完整保守结构域PRK00110的一未知功能保守蛋白。p25基因经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32a(+)-p25。测序正确后,将重组表达质粒pET-32a(+)-p25转入E.coli Rosetta,并成功进行了诱导表达。SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白与预期大小一致,表达产物主要以可溶性形式存在;Western blotting检测显示,该蛋白具有良好的免疫原性。
- 齐冬梅袁建丰覃宗华吴彩燕谢明权
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌原核表达免疫原性
