博士科研启动基金(BSKY2012018)
- 作品数：27 被引量：106H指数：8
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- 东方蝼蛄水提物对实验动物利尿和镇静作用的研究被引量：3
- 2015年
- 目的研究东方蝼蛄水提物的利尿和镇静作用。方法通过给予生理盐水负荷大鼠不同剂量的东方蝼蛄水提物,观察6小时尿量,并测定尿液的p H值和Na+、K+、Cl-的浓度,观察东方蝼蛄水提物对SD大鼠的利尿作用。通过小鼠利尿实验观察3小时中东方蝼蛄水提物的利尿作用;通过小鼠自发活动次数的测定,观察东方蝼蛄水提物的镇静作用。结果东方蝼蛄水提物一次给药即能显著增加SD大鼠尿量,特别是在用药后3-6小时,较对照组有显著差异,能够促进Na+、Cl-的排泄,对p H值无影响,使得SD大鼠体内水液、电解质含量保持在正常水平,以维持体内水液代谢的平衡。东方蝼蛄水提物对小鼠尿量的增加作用则更加显著,从2小时后均较对照组显著增加。研究还发现,东方蝼蛄水提物能够显著抑制小鼠的自发活动。结论东方蝼蛄水提物对生理盐水负荷大鼠、小鼠均有显著的利尿作用,且对小鼠有一定的镇静作用。
- 熊伟张晓娟杨勇琴冯慕华张海洋徐优
- 关键词：水提物SD大鼠小鼠利尿
- 沱茶总黄酮的提取及含量测定
- 2015年
- 采用超声波乙醇法从云南沱茶中提取总黄酮类化合物,单因素实验分析乙醇浓度、提取时间和料液比3个因素对沱茶总黄酮得率的影响.结果表明,以乙醇浓度φ=70%、提取时间30 min,料液比(g/m L)1∶30为超声法最佳提取工艺,提取总黄酮得率为5.978 mg/g,平均回收率为99.83%,RSD=0.96%(n=3),旨在为进一步综合开发利用云南沱茶提供参考依据.
- 熊伟张晓娟杨飞杨勇琴张海洋
- 关键词：总黄酮沱茶超声提取比色法
- 基于数据挖掘分析TOP2A在胰腺癌中的表达及预后意义被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨拓扑异构酶Ⅱα(topoisomeraseⅡalpha,TOP2A)在胰腺癌中的表达及预后意义。方法:在数据库中检索关于TOP2A的信息,并结合文献对数据库中资料进行二次分析,对TOP2A在胰腺癌中的作用进行荟萃分析。结果:TOP2A在胰腺癌组织中均较正常胰腺组织显著高表达,mRNA高表达者比低表达者预后差,差异有统计学意义(P<0.05),其表达水平与胰腺癌患者病理分期无关(P>0.05)。胰腺癌中TOP2A基因启动子区甲基化水平与正常胰腺组织相比差异无统计学意义(P>0.05)。与TOP2A有相关性的基因有CDK1、HDAC1和NFE2L3等,与TOP2A相互作用的蛋白有CDK1、CDC20和TOP1等。结论:TOP2A在胰腺癌组织中呈现高表达,其表达水平与胰腺癌的预后有明显关联。TOP2A与其他基因相互作用可能共同参与了胰腺癌的发生、发展。
- 梅雯孙如丽李云熊伟赵一
- 关键词：胰腺癌
- 人核呼吸因子2基因真核表达载体的构建与鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的:构建人核呼吸因子2(NRF2-α和NRF2-β)的真核表达载体,并检测其在瞬时转染的人肝癌BEL-7402细胞株的表达水平。方法:根据NCBI数据库中NRF2-α和NRF2-β的基因序列设计引物,通过RT-PCR扩增目的基因并构建带FLAG标签的真核表达载体,瞬时转染BEL-7402细胞后,分别使用半定量RT-PCR技术和Western blot技术检测其mRNA和蛋白质表达水平。结果:通过酶切鉴定和DNA序列分析,证实已成功构建了人NRF2-α和NRF2-β的真核表达载体,并能在瞬时转染的人肝癌BEL-7402细胞中实现基因的过表达。结论:成功构建了人NRF2-α和NRF2-β的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定了基础。
- 张海洋冯慕华徐彤徐优余敏孙宝迪熊伟
- 关键词：真核表达载体
- CRISPR-Cas9基因编辑技术在构建实验动物肿瘤模型中的应用进展被引量：5
- 2017年
- CRISPR-Cas9是一种以细菌和古细菌抵御外源核酸入侵的免疫机制为基础开发出来的新型基因编辑技术。与传统的锌指核酸酶(ZFN)、胚胎干细胞(ES细胞)打靶和转录激活因子样效应因子核酸酶(TALEN)技术相比,该基因编辑技术具有操作简单、更加高效、更容易获得纯合子突变体、细胞毒性小、无物种限制等优势,但也存在脱靶效应等缺点。目前,CRISPR-Cas9技术已被广泛用于肿瘤相关研究中,尤其在构建实验动物肿瘤模型中取得许多重要成果。我们主要对CRISPR-Cas9基因编辑技术在构建实验动物肝癌模型、结直肠癌模型、肺癌模型、宫颈癌模型、白血病模型、脑瘤模型中的研究现状及应用进展做简要综述。
- 熊伟杨勇琴自加吉孙美涛梅雯左绍远张晓娟
- 关键词：肿瘤
- 人MTERF4基因cDNA的克隆及编码蛋白质的生物信息学分析被引量：5
- 2015年
- [目的]克隆人线粒体转录终止因子4（mitochondrial transcription termination factor 4,MTERF4）基因cDNA编码区,预测和分析其编码蛋白质的结构与功能。[方法]采用RT-PCR技术扩增人MTERF4基因cDNA的编码序列,采用生物信息学方法对人MTERF4蛋白进行分析。[结果]人MTERF4基因cDNA编码序列为1 146bp,编码一个由381氨基酸组成的亲水性蛋白质,分子量为45.78 k D,理论等电点为9.49。该蛋白N端1-42个氨基酸为前导肽序列,定位于细胞线粒体。其二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,包含4个MTERF基序。三级结构预测结果与二级结构相符。蛋白质多重序列比对和聚类分析显示,人MTERF4蛋白与大鼠、小鼠的MTERF4蛋白具有高度同源性,在系统发育树上聚为一类。[结论]人MTERF4基因cDNA的克隆及编码蛋白质的生物信息学分析为进一步研究其生物学功能奠定了理论依据。
- 熊伟杨勇琴张海洋徐彤张晓娟余敏
- 关键词：CDNA克隆生物信息学
- 人MTERF4基因启动子的生物信息学研究
- 2016年
- 人线粒体转录终止因子4（mitochondrial transcription termination factor 4,MTERF4）基因属于线粒体转录终止因子基因超家族,其编码的蛋白质是调控线粒体核糖体生物合成和线粒体蛋白质翻译的重要因子。目前,MTERF4基因自身的表达调控机制仍不清楚。为了探讨人MTERF4基因启动子区的序列特征和基因转录调控机制,采用进化足迹法,利用生物信息学在线软件对人MTERF4基因上游5＇端的启动子分布、转录因子及其结合位点、CpG岛进行分析。结果表明,人MTERF4基因上游5＇端3 000 bp的核苷酸序列至少存在3个启动子,其中1 799-2 368 bp之间可能包含核心启动子。启动子区序列中存在1个长为558 bp的CpG岛。人和小鼠MTERF4同源基因的启动子区有1个保守区域,存在18个共有的转录因子结合位点。通过生物信息学软件分析人MTERF4基因启动子,提高了针对该基因启动子的研究效率,为后续实验深入研究启动子的功能奠定了重要的理论基础。
- 熊伟杨勇琴余敏孙美涛左绍远张海洋
- 关键词：启动子CPG岛转录因子生物信息学
- 基于生物信息学分析人类线粒体转录终止因子1基因启动子被引量：4
- 2016年
- 目的线粒体转录终止因子1(mitchondrial transcription termination factor 1,MTERF1)编码蛋白质是调控线粒体基因表达和氧化磷酸化的重要因子。文中旨在分析人类MTERF1基因的转录调控序列、转录因子及其结合位点。方法采用进化足迹法,利用生物信息学在线软件对人类MTERF1基因5'端上游的启动子分布、Cp G岛、转录因子及其结合位点进行分析。结果人类MTERF1基因定位于7q21.2,基因全长7845 bp,含有4个外显子和3个内含子。基因上游5'端2500bp的核苷酸序列至少存在2个启动子,其中1878-2447 bp之间可能包含核心启动子。启动子区序列中存在1个长为812 bp的Cp G岛。人类和小鼠MTERF1同源基因存在26个共同的转录因子结合位点。结论生物信息学在线软件能预测人类MTERF1基因启动子和转录因子结合位点,提高了针对该基因启动子的研究效率。
- 杨勇琴孙美涛李月王昀张晓娟熊伟
- 关键词：生物信息学启动子CP转录因子
- 人线粒体转录终止因子3在胃癌组织中的表达及其意义被引量：13
- 2017年
- 目的分析hMTERF3 mRNA和蛋白质在胃癌组织及正常组织中的表达,探讨其与胃癌发生、发展的关系。方法分别采用半定量RT-PCR和免疫组化SP法,检测61例胃癌组织及正常组织中hMTERF3 mRNA和蛋白质表达水平,分析hMTERF3表达与胃癌临床分期、病理分级、肌层浸润和淋巴结转移的关系。结果 hMTERF3 mRNA和蛋白质在胃癌组织中的表达水平显著高于正常胃组织。hMTERF3蛋白在正常胃组织阳性率为24.6%(15/61),胃癌组织中的阳性率为86.9%(53/61),差异具有统计学意义。hMTERF3蛋白的表达与胃癌临床分期、病理分级、肌层浸润和淋巴结转移有关。结论 hMTERF3蛋白的表达异常可能是胃癌发生、发展的分子机制之一,可为预测胃癌的发生提供可能的生物学标志物,也可为胃癌基因诊断和基因治疗提供潜在的靶标。
- 自加吉杨勇琴孙美涛梅雯于成和张晓娟熊伟
- 关键词：胃肿瘤RT-PCR免疫组织化学
- 线粒体转录终止因子蛋白家族在线粒体基因表达中的调节作用被引量：39
- 2015年
- 线粒体转录终止因子(mitochondrial transcription termination factor,MTERF)是一类由核基因编码且高度保守的线粒体DNA结合单体蛋白质,广泛存在于后生动物和植物中.近年来,MTERF蛋白家族对线粒体基因表达调控的作用及其机制研究获得大量成果,对阐明线粒体基因组的表达调控机制及研究人类线粒体疾病等方面有重要的意义.本文综述MTERF蛋白家族4个成员的性质,及其对线粒体DNA复制、转录和翻译的影响,探讨MTERF蛋白家族各成员调控线粒体基因表达的可能机制,展望其对线粒体疾病研究的应用前景.
- 熊伟余敏左绍远
- 关键词：基因表达
