云南省科技攻关计划(2006NG-24)
- 作品数：15 被引量：49H指数：5
- 相关作者：张文东张富强范泉水张应国邱薇更多>>
- 相关机构：成都军区疾病预防控制中心云南省动物疫病预防控制中心云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室更多>>
- 发文基金：云南省科技攻关计划云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 禽流感病毒型及亚型特异性免疫荧光技术的研究被引量：1
- 2007年
- 在获得禽流感病毒型及亚型特异性单克隆抗体的基础上,建立型及亚型特异性免疫荧光技术,用于检测或鉴定禽流感病毒.优化反应条件,确定单克隆抗体及异硫氰酸荧光黄标记二抗的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与病毒分离鉴定比较.结果表明:该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床组织样品、鸡胚及细胞培养物中的禽流感病毒.
- 宋建领张文东王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强
- 关键词：禽流感病毒免疫荧光
- 禽流感病毒H9亚型特异性抗原捕捉ELISA检测方法的研究被引量：8
- 2008年
- 采用禽流感病毒多克隆抗体及H9亚型特异性单克隆抗体,研究建立H9亚型特异性抗原捕捉ELISA检测方法,用于检测H9亚型禽流感病毒.优化了反应条件,确定了包被抗体、检测抗体及酶结合物的最佳工作浓度,对该方法的敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与RT-PCR方法比较.通过使用该方法对野外样品进行检测.结果表明该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床样品、鸡胚培养物及细胞培养物中的H9亚型禽流感病毒.
- 宋建领张文东王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强
- 关键词：禽流感病毒
- 禽流感H5亚型病毒抗原性差异及ELISA检测方法的研究
- 禽流感(Avian influenza,AI or bird flu)是由 A 型流感病毒(Influenza virus type A)引起的一种禽类的感染性疾病综合征。禽流感病毒感染后引起的临床症状和病理变化,因感染...
- 宋建领张文东张富强王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇
- 关键词：单克隆抗体禽流感病毒病毒抗原ELISA
- 文献传递
- 禽流感病毒型及亚型特异性免疫酶染色技术的研究
- 2008年
- 在获得禽流感病毒型及亚型特异性单克隆抗体的基础上,研究建立型及亚型特异性免疫酶染色技术,用于检测或鉴定禽流感病毒.优化反应条件,确定单克隆抗体及辣根过氧化物酶标记二抗的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与病毒分离鉴定比较.结果表明该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床组织样品、鸡胚及细胞培养物中的禽流感病毒.
- 金卫华宋建领张文东赵毅王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强
- 关键词：禽流感病毒免疫酶染色
- 云南2008～2009年H9N2亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶基因序列分析被引量：4
- 2011年
- 禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)是病毒粒子表面抗原,是亚型划分的重要依据。从云南分离的H9N2亚型禽流感病毒感染鸡胚尿囊液中提取总RNA,采用特异性引物经RT-PCR分别扩增云南毒株10个HA和9个NA基因,纯化后克隆至pMD18-T载体,并对其进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明:云南H9N2毒株HA基因核苷酸序列同源性为95.0%～99.7%;NA基因核苷酸序列同源性为86.2%～99.6%。在进化分枝中HA基因均属于欧亚分枝的类CBJ194亚分枝,与CBJ194的核苷酸序列同源性为92.0%～99.1%,NA基因属于CK/BJ/1/94和QaHKG1/97两个分枝。云南毒株HA裂解位点结构具有低致病性病毒分子特征;HA受体结合位点143、145、198和234位氨基酸存在变异,尤其234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性。NA糖基化位点61～63、86～88部分毒株存在缺失,部分毒株在143～145位出现新的糖基化位点。
- 宋建领叶丛华田建国张文东赵焕云吕粤岳亮邱薇刘加茂冯子良张思东范泉水张应国张富强
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型血凝素神经氨酸酶
- 云南边境禽流感H5N1亚型病毒血凝素基因进化特征分析被引量：4
- 2009年
- 目的：认识2003年～2008年期间云南边境禽流感H5N1亚型病毒血凝素（HA）基因的进化特征。方法：2003年～2008年期间在云南边境采集境外禽类样品380份,经H5/N1亚型特异性多重RT-PCR检测,对阳性样品中H5N1病毒HA基因进行RT-PCR扩增,克隆至pMD18-T载体测序,并与国内外已知参考毒株序列进行比对及系统发育分析。结果：多重RT-PCR检出18份阳性样品,阳性率4.74%;14份代表性病毒样品HA基因核苷酸和氨基酸序列同源性介于93.1%～99.3%、90.5%～99.1%;HA裂解位点序列存在4种不同排列方式,均具有高致病性禽流感病毒分子结构特征;系统发育分析表明阳性样品可划分为5个不同进化分枝（1、2.4、2.3.2、2.3.4、7）。结论：2003年～2008年期间云南边境境外H5N1亚型病毒间具有遗传差异,进化分枝2.3.4毒株已成为当地流行的优势毒株。
- 叶丛华张文东宋建领李静田建国吕粤岳亮邱薇李刚山冯子良郑颖张思东范泉水张应国王双印张富强
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型血凝素进化特征
- 云南地区马流感病毒检测及其HA基因序列分析被引量：7
- 2009年
- 马流感能引起马属动物的高度接触性呼吸道传染病。该病毒已知仅存在H7N7（马流感病毒1型）、H3N8（马流感病毒2型）两个亚型，目前仅H3N8亚型毒株在全球范围内引起马流感流行和暴发。采用A型及H3亚型特异性RT-PCR技术，检测云南疑似马流感病例鼻腔棉拭子样品；HA基因PCR扩增产物经纯化后，克隆至pMD18-T载体进行测序，并与已知代表性毒株对应序列进行比对及系统发育分析。研究发现云南马流感病毒与已知代表毒株血凝素基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别介于91．2％-99．2％和89．5％-98．4％，属于美洲谱系（American lineage）佛罗里达亚谱系（Florida sub-lineage）毒株。
- 田建国叶丛华张文东宋建领吕粤岳亮邱薇冯子良张思东范泉水张应国张富强
- 关键词：马流感病毒血凝素基因测序
- 云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶基因进化及分子结构特征分析
- 2010年
- 目的：禽流感病毒神经氨酸酶（NA）是病毒粒子重要表面抗原之一,其抗原性差异决定病毒神经氨酸酶亚型（N1-N9）的划分。NA介导病毒对敏感细胞的侵染及协助子代病毒粒子的成熟和释放,与病毒的宿主嗜性及毒力有关。方法：对2003~2009年期间采集自云南境外家禽的H5N1亚型阳性样品中病毒NA基因进行测序,并与国内外已知代表毒株进行序列比对及系统发育分析。认识云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶（NA）基因分子结构特征。结果：21份代表性病毒样品NA基因核苷酸和氨基酸序列同源性介于94.3%~99.3%、93.1%~99.3%。系统发育分析表明可划分为6个不同进化（亚）分支（1、7、9、2.4、2.3.2、2.3.4）,其中进化亚分支2.3.4毒株已成为当前云南境外流行的优势毒株;所有云南境外毒株NA蛋白的49-68位氨基酸均存在缺失。结论：糖基化位点存在特有变异;云南境外毒株对Oseltam ivir（达菲）类抗病毒药物可能无耐药性。
- 董波张文东宋建领赵焕云叶丛华田建国吕粤岳亮邱薇冯子良张思东苑述友范泉水张应国张富强
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型神经氨酸酶系统发育分子特征
- 禽流感病毒M1蛋白表(拟)位分析
- 禽流感病毒属于正粘病毒科流感病毒属 A 型流感病毒成员。禽流感病毒基因组由8个分节段的单股负链 RNA 组成,编码10种病毒功能蛋白。病毒第7节段 RNA 转录过程中,经剪接、编辑合成两条不同
- 宋建领张富强王金萍郭松辉
- 关键词：禽流感病毒单克隆抗体特异性结合噬菌体
- 文献传递
- 云南边境禽流感H5N1亚型病毒血凝素基因分子结构特征分析被引量：8
- 2010年
- 目的分析2003-2008年云南边境禽流感H5N1亚型病毒血凝素(HA)基因分子结构特征。方法对2003-2008年在云南边境采集境外禽类样品420份,做H5/N1亚型特异性RT-PCR及多重RT-PCR检测,对阳性样品中H5N1病毒HA基因进行RT-PCR扩增,克隆至pMD18-T载体测序,并与国内外已知参考毒株序列进行比对及系统发育分析。结果21份代表性病毒样品HA裂解位点序列存在4种不同排列方式,均具有高致病性禽流感病毒分子结构特征;HA受体结合位点、糖基化位点及表位关键性氨基酸位点存在变异;系统发育分析表明可划分为5个不同进化分枝(1、2.4、2.3.2、2.3.4、7)。结论2003-2008年云南边境外H5N1病毒间具有遗传差异,进化分枝2.3.4毒株为当地流行的优势毒株,不同进化分枝或同一进化分枝不同毒株HA基因存在变异。
- 叶丛华张文东宋建领范泉水张应国张富强
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型血凝素分子特征
