上海市浦江人才计划项目(10PJ1407600)
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 相关作者：陈源文徐雷鸣范建高李郑红李定国更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属新华医院新疆医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：上海市浦江人才计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠BMP-7基因慢病毒载体构建及其在肝星状细胞中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的构建携带大鼠BMP-7基因的慢病毒载体并实现该基因在肝星状细胞株HSC-T6中的稳定高表达,为进一步研究BMP-7的抗肝纤维化功能奠定基础。方法从大鼠细胞基因中提取并用PCR方法扩增BMP-7目的基因,构建BMP-7重组表达载体Lenti-copGFP/puro-BMP7,脂质体法将重组慢病毒载体和包装质粒混合物共转染293TN工具细胞,包装产生慢病毒颗粒。慢病毒感染H1299细胞,根据细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达水平测定病毒滴度。将HSC-T6细胞分为空白组、空病毒对照组及BMP-7慢病毒感染组,分别用Real-Time PCR和Western blotting方法检测BMP-7 mRNA和蛋白的表达。结果 PCR扩增检测阳性菌落和测序证实,成功构建大鼠BMP-7基因重组慢病毒载体。倒置荧光显微镜下观察可见,H1299细胞呈绿色荧光,并测得病毒滴度为1×104ifμ/μL。重组慢病毒感染HSC-T6后,Real-time PCR和Western blotting方法分别检测到BMP-7 mRNA和蛋白均稳定高表达。BMP-7慢病毒感染组与空病毒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);空病毒对照组与空白组比较,差异无统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了带有大鼠BMP-7基因的慢病毒载体,并实现其在HSC-T6的稳定高表达。
- 陈丽丽虢灿杰陈源文李定国
- 关键词：BMP-7慢病毒载体
- 甘丙肽在高脂饮食诱导脂肪性肝病大鼠循环中动态变化被引量：6
- 2012年
- 目的探讨甘丙肽在高脂饮食诱导脂肪性肝病大鼠循环中的变化,及其水平与脂肪因子相关性。方法高脂饲料喂养建立大鼠NAFLD模型,于第5、9和14周分别腹主动脉采血处死动物,留取血清与肝组织标本。HE染色观察肝组织病理学变化;ELISA法检测血清甘丙肽、瘦素、胰岛素、肿瘤坏死因子(TNF)-α、巨噬细胞趋化因子(MCP)-1和白细胞介素(IL)-1β水平变化;RT-PCR法检测肝脏组织甘丙肽及其受体在发病过程中变化;Spearman相关分析检测各节点甘丙肽与其他脂肪因子相关关系。结果病理显示,高脂饮食5周大鼠肝细胞脂肪变性明显,9周形成单纯性脂肪肝,14周出现明显脂肪性肝炎。与正常对照相比,血清甘丙肽在第5周和第14周均明显升高(P<0.05),而第9周时无差异。相关分析显示,第5周时,模型组甘丙肽与瘦素(r=-0.78)、胰岛素(r=-0.65)、IL-1β(r=-0.82)和TNF-α(r=-0.74)均呈显著负相关(P均<0.05),而与MCP-1呈正相关(r=0.70,P<0.05)。第14周,甘丙肽与瘦素(r=0.90)呈正相关,与胰岛素(r=-0.81)、TNF-α(r=-0.89)、MCP-1(r=-0.84)、IL-1β(r=-0.79)呈负相关。RT-PCR结果显示,GalR2 mRNA仅在14周大鼠肝组织中表达。结论大鼠血清甘丙肽在高脂饮食诱导肝脂肪变早期显著增高,在单纯脂肪肝形成时降至正常,而至脂肪性肝炎阶段再次升高并伴随GalR2重新表达。升高的甘丙肽水平与瘦素、MCP-1等炎性脂肪因子呈密切相关关系。甘丙肽可能通过调节脂肪因子水平与相关炎症反应等参与NAFLD发病。
- 李郑红段晓燕陈源文徐雷鸣丁永年范建高
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病甘丙肽脂肪因子
- 胸腺素β_4-脯氨酸寡肽酶-AcSDKP轴在肝内生物学功能的研究被引量：1
- 2011年
- N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro AcSDKP)由脯氨酸寡肽酶水解其前体胸腺素β4生成,三者均存在于肝内并发挥重要生物学功能。本文就胸腺素β4-脯氨酸寡肽酶-AcSDKP轴在肝内病理生理功能,特别是其与肝损伤修复和肝脏细胞外基质沉积关系的研究做一概述。
- 张蕾陈源文徐雷鸣
- 关键词：胸腺素Β4肝脏
- 脯氨酰寡肽酶的肝内生物学功能研究进展被引量：5
- 2015年
- 脯氨酰寡肽酶(prolyl oligopeptidase,POP)体内分布广泛,肝内活性较高。POP通过直接或间接作用,影响Kupffer细胞等炎性细胞、肝细胞和肝星状细胞功能,调控肝内炎症、肝细胞增殖和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积,在肝脏损伤修复中发挥重要作用,可能成为慢性肝损伤修复机制研究及治疗的新切入点。本文就POP的肝内生物学功能作一概述。
- 周达陈源文范建高
- 关键词：肝脏肝细胞炎症纤维化
- 库普弗细胞与非酒精性脂肪性肝病关系的研究进展被引量：1
- 2013年
- 库普弗细胞(KCs)即肝固有巨噬细胞,是门脉系统的第一道屏障,它也是肝内主要的炎症递质细胞,参与多种肝脏疾病的发生、发展。随着生活习惯及饮食结构的改变,非酒精性脂肪肝(NAFLD)的发病率逐年升高,但其发病机制尚未完全明确,治疗上也缺乏有效措施。近年来众多研究显示库普弗细胞与该病的发病过程密切相关。本文就近年来库普弗细胞功能研究与NAFLD发病机制的关系进展作一概述。
- 黄超陈源文徐雷鸣
- 关键词：库普弗细胞非酒精性脂肪性肝病TOLL样受体
- BMP-7过表达抑制大鼠肝星状细胞上皮-间叶转化
- 2011年
- 目的观察慢病毒介导的BMP-7高表达是否能抑制大鼠HSC-T6细胞发生上皮-间叶转化(epithelial to mesenchymal tran-sition,EMT),并能拮抗TGF-β1的促EMT作用。方法构建大鼠BMP-7慢病毒表达载体,体外感染HSC-T6细胞株,将成功感染BMP-7重组慢病毒的细胞给予TGF-β1(5 ng/mL)或溶酶体处理。Real-time PCR检测α-SMA、S100A4、E-cadherin mRNA转录水平。Western blotting检测α-SMA、S100A4、E-cadherin、Ⅰ型胶原蛋白表达水平。结果 BMP-7慢病毒感染HSC-T6后,无论TGF-β1存在与否,real-time PCR检测到α-SMA、S100A4 mRNA转录下调,E-cadherin转录上调。Western blotting显示α-SMA、S100A4及Ⅰ型胶原蛋白表达下调,E-cadherin蛋白表达上调。实验组与空病毒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),空病毒对照组与空白组比较,差异无统计学意义。结论 BMP-7能有效拮抗TGF-β1对HSC-T6的促EMT作用,可能成为肝纤维化治疗的新途径。
- 陈丽丽虢灿杰陈源文沈峰李定国
- 关键词：骨形态发生蛋白-7肝星状细胞上皮-间叶转化
- 甘丙肽与非酒精性脂肪性肝病重要危险因素及病理生理机制关系研究进展被引量：1
- 2011年
- 胰岛素抵抗和炎症反应是非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)主要发病机制,以肥胖、Ⅱ型糖尿病和高脂血症为代表的代谢综合征是其主要危险因素。甘丙肽作为神经肽和脂肪因子,通过与其3种受体(GalR1、GalR2、GalR3)结合后,可能通过影响胰岛素抵抗和减轻炎症反应等对NAFLD发病起重要作用。本文就近年来甘丙肽生理功能及其与NAFLD发病相关机制关系研究作一综述。
- 李郑红陈源文徐雷鸣
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病甘丙肽胰岛素抵抗炎症脂肪因子
