国家质检总局科技计划项目(2008IK145)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：张常印唐泰山蒋原祝长青欧瑜更多>>
- 相关机构：江苏出入境检验检疫局中国药科大学河南科技大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 空肠弯曲菌免疫磁珠富集方法的建立被引量：3
- 2014年
- 为建立空肠弯曲菌富集方法,研究利用空肠弯曲菌特异性多表位人工多肽的特异性抗体包被磁珠,制成免疫磁珠富集空肠弯曲菌。在不同稀释梯度的菌液中加入免疫磁珠,富集目标菌,铺于CFA显色平板培养,统计菌落个数,确定免疫磁珠的敏感性;在非空肠弯曲菌和弯曲菌中分别添加空肠弯曲菌,用免疫磁珠富集,确定免疫磁珠的特异性。结果表明2 mg免疫磁珠可以在1 mL空肠弯曲菌菌液（浓度为2.5×103/mL）中稳定富集到空肠弯曲菌,统计菌落数为100~300 CFU,具有较好的敏感性;在干扰菌中富集空肠弯曲菌,铺板培养后,荧光PCR鉴定为阳性,富集不受干扰菌影响。用建立的免疫磁珠富集方法富集采集样品中的空肠弯曲菌,结果显示该方法有较好的特异性,具有较好的应用前景。
- 王壮欧瑜唐泰山祝长青栾军蒋原张常印
- 关键词：空肠弯曲菌特异性抗体免疫磁珠
- 空肠弯曲菌表面蛋白特异性多表位抗原的设计、表达与鉴定被引量：1
- 2012年
- 构建空肠弯曲菌表面蛋白特异性多表位抗原原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达,免疫动物后检测其抗血清与空肠弯曲菌菌体的反应性。从空肠弯曲菌的6个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段,将其插入原核表达载体,获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,经IPTG诱导后表达出25k的目标蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,Western blot和间接ELISA检测重组蛋白抗原性和抗血清反应性。结果表明目标蛋白具有良好的反应原和免疫原性,抗血清能与菌体发生反应。其抗体可用于C.jejuni免疫磁珠和免疫胶体金等检测方法的建立。
- 欧瑜鄢方兵唐泰山祝长青蒋原张常印
- 关键词：空肠弯曲菌多表位抗原原核表达
- 空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫原性分析被引量：1
- 2011年
- 根据空肠弯曲菌基因序列设计引物,以菌株ATCC 29428为模板扩增出peb1A基因片段,定向克隆至pMD18-T载体中,并对克隆片段测序,比较所测序列与不同来源弯曲菌的同源性;用软件改造并合成peb1A基因78 bp^780 bp区间片段,PCR扩增后,构建出表达载体pET-28a(+)-peb1Ag,转化至E.coliBL21(DE3)后诱导表达,纯化后获得重组蛋白PEB1;将其进行Western blot分析、小鼠免疫试验。结果表明,克隆的peb1A基因序列与报道的NCTC 11168核苷酸同源性为98.1%,改造表达后的重组蛋白PEB1具有良好的抗原性和免疫原性,免疫小鼠后血清效价达1∶12 800,为空肠弯曲菌保护性抗原的研究和单克隆抗体的筛选奠定了基础。
- 祝长青唐泰山王婷蒋原姚火春张常印薛峰栾军
- 关键词：空肠弯曲菌原核表达免疫原性
- 空肠弯曲菌flaA基因的原核表达及抗原性鉴定被引量：2
- 2010年
- 王婷蒋原唐泰山张常印祝常青
- 关键词：空肠弯曲菌抗原性原核表达基因人畜共患病
