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转基因玉米MON863结构特异定量PCR方法的建立被引量：2: 2011年; 根据转基因玉米MON863载体构建特异结构,设计引物和Taqman探针,建立了转基因玉米MON863载体构建特异结构定量PCR检测方法,并采用该法定量检测了1%含量的MON863标准品(不确定度为10%)。结果显示,采用本文构建的方法获得标准曲线斜率,在-3.6～-3.1之间,相关系数大于0.99,扩增效率为105.436%,在90%～110%的范围内。待检样品的定量检测结果(1.08%)非常接近真实值(1%,不确定度为10%),表明本文建立的转基因玉米MON863结构特异定量PCR检测重复性好,灵敏度和准确度高,可以在日常检验中推广应用。; 宋君王东游米沙尹全刘勇雷绍荣向云

转基因产品检测中标准的使用——以MON810为例: 2011年; 转基因成分检测是转基因产品身份确定的主要手段,目前我国转基因成分检测标准体系有国标、行标以及地标3类,标准覆盖数十种检测参数和上千的动植物源性产品。本文以转基因玉米MON810品系检测为例,从目前转基因产品检测标准的适用范围、技术特点等角度讨论了在转基因产品检测过程标准的使用及其注意事项,为常规的转基因产品检测提供参考和指导。; 宋君王东游米沙尹全刘勇雷绍荣向云; 关键词：假阳性结果

转基因玉米MON863品系特异定量PCR方法的建立被引量：9: 2011年; 根据转基因玉米MON863外源基因的旁侧序列,设计引物和TaqMan探针,建立了转基因玉米MON863品系特异定量PCR检测方法,并采用该法检测了1%含量的MON863玉米粉末(不确定度为10%)。结果显示,采用构建的方法获得的标准曲线斜率为-3.6～-3.1,相关系数大于0.99,扩增效率为102.2%,在90%～110%内。样品的定量检测结果1.113%接近已知含量1%(不确定度为10%),表明建立的转基因玉米MON863品系特异定量PCR检测方法的灵敏度和准确度高,可以在日常检验中推广应用。; 宋君雷绍荣刘勇尹全王东张富丽刘文娟常丽娟; 关键词：旁侧序列

两种蛋白质变性剂在转基因成分检测中的抑制作用被引量：3: 2010年; 本文以抗除草剂(EPSPS)转基因大豆GTS-40-3-2为材料,在Lectin基因的扩增体系中设置了不同浓度的十二烷基硫代硫酸钠(SDS)和酚,探讨了SDS和酚这两种蛋白质变性剂在转基因成分检测中的抑制作用。结果表明,在反应体系中SDS的浓度大于或等于4.8×10-4g/mL时,能完全抑制PCR反应;酚的体积比大于或等于8.0×10-3时,体系中的DNA聚合酶全部变性,PCR反应彻底被抑制。; 宋君牛蓓王东游米沙尹全陶李刘勇雷绍荣; 关键词：转基因食品安全 SDS

实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度被引量：17: 2011年; [目的]对实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度进行评定。[方法]使用转基因玉米MON863结构特异实时定量PCR方法测定含量为1%的转基因玉米MON863样品(CRM)中结构特异片段的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源,评定测量的不确定度。[结果]研究得到uA=1.7×10-2,uB=9.0×10-4,uC=1.7×10-2,U95=0.036,测量结果为1.08%±0.036。[结论]转基因玉米MON863结构特异实时定量PCR方法检测结果的主要不确定度来自检验过程中的随机效应。; 宋君雷绍荣刘勇向冰王东尹全张富丽刘文娟常丽娟; 关键词：不确定度

三氯甲烷和乙醇对转基因成分检测的抑制被引量：1: 2011年; 该文以抗除草剂(CP4-EPSPS)转基因大豆GTS-40-3-2为材料,在Lectin基因的扩增体系中设置不同浓度梯度的三氯甲烷、乙醇,模拟这2种有机试剂残留,探讨三氯甲烷、乙醇在转基因成分检测中的抑制作用。结果表明:在PCR反应体系中三氯甲烷的摩尔浓度≥3.77mol/L时,能完全抑制PCR反应;乙醇的摩尔浓度>1.39 mol/L时,PCR反应彻底被抑制。; 王东宋君尹全陶李雷绍荣刘勇; 关键词：转基因食品安全三氯甲烷乙醇

转基因玉米NK603结构特异定量PCR方法的建立被引量：3: 2011年; 根据转基因玉米NK603载体构建特异序列,设计引物和Taqman探针,建立了转基因玉米NK603载体构建特异结构定量PCR检测方法,并采用该法检测了2%含量的NK603标准品(不确定度为10%)。结果显示,采用本文构建的方法获得的标准曲线斜率,在-3.6～-3.1之间,相关系数大于0.99,扩增效率为98.1%,在90%～110%的范围内。样品检测结果(1.6%)接近已知含量(2%,不确定度为10%)。表明本文建立的转基因玉米NK603结构特异定量PCR检测方法,可以在日常检验中推广应用。; 宋君雷绍荣向冰刘勇王东尹全

实时荧光定量PCR检测转基因玉米NK603结构特异基因的测量不确定度研究被引量：4: 2012年; 应用四川省农业科学院分析测试中心实验室建立的转基因玉米NK603结构特异实时定量PCR方法测定含量为2%的转基因玉米NK603样品中结构特异片段的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源,评定了测量的不确定度。结果表明,uA=0.0003,uB=0.001,uC=0.001,U95=0.002,测量结果为1.6%±0.002%。NK603结构特异实时定量PCR方法检测结果的主要不确定度来自检验过程中的随机效应。; 宋君雷绍荣刘勇王东刘文娟尹全张富丽常丽娟; 关键词：不确定度

Uncertainty in Measuring Construct-specific Fragments of Genetically Modified Maize MON863 by Real Time Quantitative PCR: 2011年; [Objective] The study aimed at evaluating the uncertainty in measuring the construct-specific fragments of genetically modified maize MON863 by real time quantitative PCR.[Method] The content of construct-specific fragments in MON863 samples was determined by real time quantitative PCR,and then the uncertainty of measurement result was evaluated according to the sources of uncertainty like the PCR system,the data processing and the micropipette.[Result] Type A evaluation of uncertainty（uA） in the measurement was 1.7×10^-2;Type B evaluation of uncertainty（uB） was 9.0×10^-4;the combined standard uncertainty（uC） was 1.7×10^-2;the expanded uncertainty（U95） was 0.036 and the finally measured result was 1.08%±0.036.[Conclusion] The main uncertainty of the result measured by real time quantitative PCR came from the randomizing effect in the experimental process.; 宋君雷绍荣刘勇王东尹全张富丽刘文娟常丽娟; 关键词：UNCERTAINTY

实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863的测量不确定度分析被引量：12: 2012年; 应用四川省农业科学院分析测试中心实验室建立的转基因玉米MON863品系特异实时定量PCR方法,测定含量为1%的转基因玉米MON863样品(CRM)中旁侧片段(品系特异片段)的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源评定测量的不确定度。结果表明,uA=1.9×10-2,uB=9.3×10-4,uC=1.9×10-2,U95=0.04,测量结果为1.108%±0.04。MON863品系特异实时定量PCR方法检测结果的主要不确定度来自检验过程中的随机效应。; 宋君雷绍荣郭灵安刘勇王东尹全向冰张富丽刘文娟常丽娟; 关键词：转基因玉米不确定度

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四川省农业科学院青年基金(2009QNJJ-037)