安徽省高校省级自然科学研究项目(2005kj391ZD)
- 作品数：2 被引量：12H指数：2
- 相关作者：王朝霞江昌俊卞伟华房婉平余有本更多>>
- 相关机构：安徽农业大学安徽教育学院西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 桃叶片β-半乳糖苷酶基因全长cDNA克隆及原核表达被引量：8
- 2006年
- 利用RT-PCR和RACE技术,从蟠桃(Amygdaluspersicavar.compressaBean)中克隆出3285bp的β-半乳糖苷酶基因cDNA全长,GenBank登录号为AY874412。该cDNA2559bp,编码853个氨基酸。将其插入到大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,转化BL21trxB(DE3),筛选重组菌株。经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE呈现约115kDa特异表达条带。并通过体外酶促反应分析表达的融合蛋白的生物活性。
- 卞伟华江昌俊王朝霞
- 关键词：Β-半乳糖苷酶CDNA末端快速扩增CDNA克隆原核表达
- 茶树巯基蛋白酶抑制剂基因cDNA在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2006年
- 通过RT-PCR法扩增出茶树中巯基蛋白酶抑制剂基因(Tea cystatin,TC)cDNA编码区序列,定向克隆到表达载体pET 32 a(+)上,得到重组质粒pET-TC,在表达宿主菌BL21 trxB(DE3)中高效表达,产生分子量约为31.8 kD a的特异融合蛋白。实验表明:随着诱导时间的延长,表达的融合蛋白Trx-TC的产量逐渐增加,特异蛋白的表达量最高可占菌体总蛋白的35.4%;在15℃、25℃、30℃和37℃四个不同诱导温度下,均能诱导产生融合蛋白;IPTG终浓度在0.5 mm ol/L^5 mm ol/L范围内均能诱导产生融合蛋白,表达的产物主要以可溶性蛋白形式存在。另外,体外酶促反应表明表达的融合蛋白Trx-TC对木瓜蛋白酶有明显的抑制活性。
- 王朝霞江昌俊余有本房婉平
- 关键词：大肠杆菌活性测定
