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抗膜联蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 2006年; 目的：制备抗膜联蛋白Ⅰ单克隆抗体（mAb），对其进行特性鉴定，为在恶性肿瘤诊断和治疗中的应用打下基础。方法：构建膜联蛋白Ⅰ基因480bp的原核表达载体pQE30ANXI，异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达，并用Ni—NTA树脂亲和层析柱纯化蛋白。用纯化的膜联蛋白I作为抗原免疫BALB／c小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，经过HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化，制备抗膜联蛋白Ⅰ蛋白的单克隆抗体，用ELISA、Western blot及免疫组织化学染色法进行特性鉴定。结果：获得5株分泌抗膜联蛋白ImAb的杂交瘤细胞，分别命名为1A8、1D2、1E2、4E7和5G3，所产抗体，均为IgGl亚型，轻链均为K链，亲和力为（2．3～3．03）×10^8L／mol。经Western blot证实获得的mAbs可以特异性识别膜联蛋白Ⅰ抗原；免疫组织化学染色结果也显示这些mAbs可以特异识别肿瘤组织中的膜联蛋白Ⅰ。结论：成功地获得了5株抗膜联蛋白Ⅰ的mAbs，为进一步在肿瘤诊断和治疗中应用膜联蛋白Ⅰ抗体打下了基础。; 蔡幸胡晶莹莫忠根朱明洁赵新泰; 关键词：杂交瘤

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上海市科委重大科技攻关项目(04DZ19108)