国家自然科学基金(39870358) 作品数:20 被引量:58 H指数:6 相关作者: 陈少华 李扬秋 杨力建 郁志 李荣福 更多>> 相关机构: 暨南大学 暨南大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
急性早幼粒细胞白血病患者中TCR Vβ T细胞体内外克隆性增殖的比较 被引量:6 2003年 急性早幼粒细胞白血病 ;T细胞受体Vβ基因 ;T细胞培养 ;克隆性增殖为了解急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 ,利用T淋巴细胞液体培养法 ,在rhIL 2和抗CD3单抗条件下诱导扩增APL患者单个核细胞 ,并应用RT PCR分别扩增培养前后患者T细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的互补决定区 3 (CDR3 )片段 ,了解各Vβ亚家族的表达情况 ;对阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果发现 ,APL患者T细胞仅表达部分Vβ亚家族 ,但经体外培养后可检测到部分新增TCRVβ亚家族T细胞。全部患者存在某些TCRVβ亚家族的克隆性增殖T细胞。 2例患者均出现相似的Vβ1,Vβ3 ,Vβ7,Vβ16和Vβ2 0T细胞的克隆性增殖情况。结论 :T细胞的体外培养可诱导某些Vβ亚家族的表达。在T细胞培养不同时间中 。 杨力建 李扬秋 陈少华 韩素芳 陈盛亭 张学利 张涛关键词:急性早幼粒细胞白血病 T细胞受体VΒ基因 克隆性增殖 T-ALL及T细胞株相关TCR Vβ基因谱系和克隆性分析 被引量:7 2004年 目的 了解T细胞 急性淋巴细胞白血病 (T ALL)患者外周血中的T细胞及T细胞株的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法 利用RT PCR方法扩增 6个不同的T细胞株和 6例初发未治T ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性 ,部分T细胞株的单克隆PCR产物进一步进行序列分析。结果 与正常人外周血表达全部 2 4个Vβ亚家族不同 ,6例T ALL病人分别表达 5~ 12个Vβ亚家族。 6例病人均存在 1个或多个Vβ亚家族的寡克隆或双克隆增殖T细胞 ,另外 ,还有一些Vβ亚家族多克隆模式发生改变 ,呈现寡克隆性增殖的趋势。T细胞株多显示为表达一个Vβ亚家族的单克隆T细胞 ,不同T细胞株的CDR3长度和序列不尽相同。结论 T ALL患者外周血T细胞的TCRVβ谱系出现限制性改变 ,均可检测到克隆性增殖T细胞 ,尚需进一步鉴定其性质 (肿瘤性或抗原特异性增殖 ) 。 黄梅娟 李扬秋 陈少华 周羽竝 杨力建 韩素芳关键词:T细胞受体VΒ基因 T细胞克隆性 Distribution and clonality of peripheral blood TCR Vα subfamily T cells in patients with acute promyelocytic leukemia 2007年 Objective: To investigate the distribution and clonality of TCR Va subfamily T cells in patients with acute promyelocytic leukemia (APL). Methods: The complementary determining region 3 (CDR3) of TCR Va 29 subfamily genes in peripheral blood mononuclear cells from 9 APL patients were amplified using RT-PCR. The positive products were further analyzed to identity the clonality of T cells by GeneScan technique. Results: One to seven of TCR Va subfamilies could be detected in peripheral blood T cells from 9 cases with APL, the frequent expression of Va subfamilies predominated in Vα3 and Va19. Clonal expanded T cells could be detected in 8 APL patients, which predominant used Va3, Va26 or Va27 (3 out of 8 cases). However, almost all Va subfamilies with polyclonal expansion could be detected in peripheral blood T cells from 10 cases of normal individuals. Conclusion: Remarkable skew distribution and clonal expansion of TCR Va subfamilies T cells is the common feature in patients with APL. Clonal expansion of T cells might reflect a response in host to APL cell associated antigen, whether these expanded T cells have the ability for specific cytotoxicity against APL cells, remains an open question. Dongzhi Cen Yangqiu Li Shaohua Chen Lijian Yang Zhi Yu关键词:CLONALITY B-ALL病人TCR Vβ基因谱系和克隆性分析 被引量:7 2004年 目的 了解B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。 方法 利用RT PCR方法扩增 13例初发未治B ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果 13例B ALL病人分别表达 2~ 18个Vβ亚家族。 13例病人均存在 1个或多个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞 ,增殖形式包括寡克隆及寡克隆增殖趋势、双克隆和单克隆。Vβ2 1和Vβ2 3亚家族出现克隆增殖性T细胞的频率较高。结论 B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ谱系呈现优势利用的特点 ,并存在克隆性增殖的T细胞 ,这可能是机体对白血病相关抗原产生的特异性免疫反应 ;Vβ2 1和Vβ2 3亚家族T细胞发生克隆增殖改变的趋向性比较明显 ,可能与B 黄梅娟 李扬秋 陈少华 杨力建 周羽竝 张涛关键词:T细胞受体VΒ基因 T细胞克隆性 AML-M2a型细胞诱导自体及异体优势增殖TCR Vβ亚家族T细胞的研究 被引量:2 2001年 目的 :研究急性髓细胞性白血病 M2 a亚型 (AML M2 a)患者外周血白血病细胞反应性 T细胞受体V区 β链 (TCR Vβ)亚家族 T细胞体内外优势表达情况及其体外细胞毒性分析。方法 :采用混合淋巴细胞 /肿瘤细胞培养法 (ML TC)将 AML M2 a细胞与自体或正常人外周血 T细胞体外混合培养和扩增 ,用反转录多聚酶链反应 (RT PCR)分析 ML TC前后患者和正常人 T细胞 TCR2 4个 Vβ亚家族的表达情况 ,同时用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法对其进行细胞毒性分析。结果 :AML M2 a患者和正常人 T细胞在 ML TC培养后均出现了 TCR Vβ亚家族优势表达情况 ,与淋巴因子激活杀伤细胞 (L AK细胞 )相比具较高特异性的细胞毒性 (P<0 .0 1)。结论 :AML M2 a细胞可以诱导自体与异体特异性细胞毒性 T细胞 (CTL ) ,且其主要为一些优势的TCR Vβ亚家族 李荣福 李扬秋 杨力建 陈少华 卢育洪 罗更新关键词:急性髓细胞性 混合淋巴细胞 肿瘤细胞培养 AML-M_1型患者TCR V_βT细胞家族表达抑制情况 被引量:2 2000年 目的 了解急性髓细胞白血病M1亚型 (AML -M1)患者TCRVβ亚家族T细胞的分布特点。 方法 采用RT-PCR扩增 8例M1患者外周血的单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因 ,分析了其TCRVβ亚家族的利用情况。 结果 不同标本中可检测到 2~ 8Vβ亚家族的T细胞 ,不同患者中Vβ亚家族T细胞分布不尽相同。 结论 M1患者外周血TCRVβT细胞家族表达部分受抑制 ,提示患者细胞免疫功能的部分缺陷。 杨力建 李扬秋 陈少华 李荣福 黄力强 张宁关键词:T细胞 急性髓细胞白血病 AML-M_(2a)细胞诱导自体及异体克隆性增殖T细胞及其特异性细胞毒性作用的研究 被引量:1 2002年 目的 :了解急性粒细胞白血病 (AML)M2a细胞诱导自体及异体T细胞受体 (TCR)Vβ亚家族T细胞克隆性增殖情况及其细胞毒性。方法 :采用混合淋巴细胞 /肿瘤细胞培养 (MLTC)方法 ,用M2a细胞体外诱导正常人和M2a患者自体的外周血T细胞 ,用RT -PCR扩增经MLTC获得的自体和异体T细胞的 2 4个TCRVβ亚家族基因的互补决定区 (CDR3) ,阳性产物进一步经基因扫描分析确定M2a细胞诱导的T细胞克隆性特点。同时用MTT法对淋巴细胞因子激活的杀伤细胞 (LAK细胞 )和MLTC获得的T细胞进行细胞毒性分析。结果 :M2a细胞诱导的自体及异体T细胞均出现了 4 - 17个TCRVβ亚家族的优势表达 ,部分表达的Vβ亚家族T细胞具有克隆性增殖的特点。MLTC的不同时期和不同个体来源对TCRVβ亚家族T细胞表达及克隆性增殖有所影响。与LAK细胞相比 ,MLTC获得的T细胞以CD8+ T细胞为主 ,对M2a细胞具有较高的特异性细胞毒性作用。结论 :MLTC获得的TCRVβ亚家族克隆性T细胞是自体和异体T细胞对M2a细胞刺激所产生的一种特异性细胞免疫反应。M2a细胞诱导后的T细胞对M2a细胞具有特异性细胞毒性作用。 李荣福 李扬秋 陈少华 杨力建 张涛 钟隽 张玉平APL患者外周血TCR Vα亚家族T细胞分布和增殖特点 被引量:7 2007年 目的:了解急性早幼粒细胞白血病(APL)患者外周血TCRVα亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法:利用RT-PCR扩增9例APL患者和10例正常人外周血单个核细胞中29个TCRVα亚家族基因的互补决定区3(CDR3),了解TCRV理亚家族T细胞的分布;阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度,从而了解其克隆性。结果:9例患者外周血T细胞所能检测到的Vα亚家族T细胞分别为1~9个亚家族,以Vet3和Vα19出现频率较高;克隆性增殖T细胞可在8例患者中检测到,以Vα3、Vα26和Vα27出现克隆性T细胞频率较高(3/8)。正常人外周血T细胞中表达绝大多数Vα亚家族,呈多克隆性增殖特点。结论:APL患者外周血Vα亚家族T细胞存在明显的倾斜性分布和克隆性增殖特点,后者可能是对APL细胞抗原的反应性增殖,是否具有特异性杀伤作用,有待进一步检测。 岑东芝 李扬秋 陈少华 杨力建 郁志关键词:急性早幼粒细胞白血病 T细胞受体基因 克隆性 淋巴瘤白血病患者TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性 被引量:1 2002年 目的 :了解B细胞淋巴瘤白血病 (LL)患者TCRVβ亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法 :利用RT -PCR分别扩增 3例LL患者外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,以了解患者各Vβ亚家族的利用情况 ,然后将阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果 :患者中仅存在 2~ 6个Vβ亚家族T细胞。基因扫描分析显示 ,2例患者外周血中的Vβ1、Vβ3或Vβ4亚家族出现克隆性增殖T细胞。结论 :LL患者外周血存在倾斜性分布和克隆性增殖的Vβ亚家族T细胞 ,这可能是机体T细胞受白血病细胞相关抗原的刺激作用而引起机体产生相应的特异性抗白血病的免疫反应。 杨力建 李扬秋 陈少华 卢育洪 罗更新关键词:淋巴瘤白血病 T细胞受体VΒ基因 T细胞克隆性 基因扫描 急性单核细胞白血病患者外周血和骨髓TCR Vβ亚家族T细胞的倾斜性分布特点 被引量:2 2000年 采用RT PCR扩增急性单核细胞白血病 (AML M5)患者外周血和骨髓单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因 ,分析其TCRVβ亚家族的利用情况。结果发现 ,不同标本中可检测到 1- 19Vβ亚家族的T细胞 ,不同患者外周血和骨髓中TCRVβ亚家族T细胞分布不尽相同。研究结果提供了AML 杨力建 李扬秋 陈少华 祁明芳 卢育洪 罗更新关键词:白血病 T细胞 VΒ基因 聚合酶链反应