山东省自然科学基金(Y2003C06)
- 作品数:6 被引量:24H指数:3
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- 特发性血小板减少性紫癜患者血浆及血小板洗脱液对正常人血小板聚集功能的影响被引量:4
- 2005年
- 张怡侯明朱媛媛秦平彭军丛雅琴张茂宏
- 关键词:人血正常人血小板减少ITP血小板聚集功能巨核细胞
- 人源化抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa抗体库的构建及临床价值被引量:3
- 2005年
- 目的筛选出抑制血小板聚集的血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa自身抗体,用噬菌体表面展示技术构建人源化抗血小板GPⅡb/Ⅲa单链噬菌体抗体(ScFv)库。方法用单克隆抗体特异性俘获血小板抗原(MAIPA)技术和血小板聚集试验筛选出血浆中含有抑制血小板聚集的血小板GPⅡb/Ⅲa自身抗体的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者。从筛选出患者的外周血淋巴细胞中提取mRNA,用RT PCR扩增出人免疫球蛋白的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片断,用DNA linker将VH和VL连接成ScFv基因片断。用限制性内切酶SfiⅠ/NotⅠ酶切ScFv后克隆到噬菌体载体pHEN2,然后转化大肠杆菌TG1。用辅助噬菌体M13K07援救转化后的TG1,产生ScFv。结果95例慢性ITP患者中41例(43.2%)血浆中抗GPⅡb/Ⅲa自身抗体阳性,强阳性患者5例(5.3%)。2例(2.1%)明显抑制血小板聚集功能。扩增出380~400bp大小的VH和VL基因,用连接肽(Gly4Ser)3成功地连接成约780bp大小的ScFv片断。ScFv克隆到pHEN2并转化大肠杆菌TG1后,形成2.1×107个克隆。用辅助噬菌体M13K07援救TG1后产生的噬菌体抗体库滴度为1.62×1010cfu/ml。结论少数抗GPⅡb/Ⅲa自身抗体可抑制血小板聚集功能。用噬菌体表面展示技术构建了ScFv库,可用来筛选人源化抗血小板GPⅡb/ⅢaScFv。
- 冀学斌侯明马道新李丽珍彭军王琳
- 关键词:人源化噬菌体表面展示技术RT-PCR扩增噬菌体M13血小板聚集试验
- 抑制血小板聚集功能的抗血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体的筛选
- 2004年
- 目的:筛选出血浆中含有抑制血小板聚集的血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体的血小板减少性紫癜(ITP)患者,为人源化抗GPⅡbⅢa基因工程抗体的研制做准备。方法:用改良MAIPA法检测24例慢性ITP患者血浆有无血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体,用血小板聚集试验研究抗GPⅡbⅢa自身抗体对血小板聚集的影响。结果:24例慢性ITP患者中10例(41.7%)血浆中抗GPⅡbⅢa自身抗体阳性,2例明显抑制血小板聚集功能。结论:少数抗CPⅡbⅢa自身抗体可抑制血小板聚集功能。
- 冀学斌侯明朱嫒媛宋曰礼王琳李丽珍彭军马道新张茂宏
- 关键词:特发性血小板减少性紫癜血小板聚集
- 特发性血小板减少性紫癜患者IgG酶切片段F(ab′)_2的免疫活性及其对血小板聚集功能的影响被引量:1
- 2006年
- 目的制备特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆 IgG 及其酶切片段,探讨其与血小板 GPⅡb/Ⅲa 和(或)GP Ⅰb/Ⅸ结合的免疫活性及其对正常人血板小板聚集功能的影响。方法用改良 MAIPA 法和比浊法血小板聚集试验筛选出自身抗体阳性并且能抑制血小板聚集的患者,用蛋白 A柱纯化其血浆 IgG 抗体并用胃蛋白酶制备 F(ab′)_2片段,改良单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAIPA)检测完整抗体及其酶切片段与血小板膜糖蛋白的结合活性;比浊法血小板聚集试验对比观察 ITP 患者血浆、纯化的 IgG 抗体及其酶切片段对正常人血小板聚集功能的影响。结果①68例慢性ITP 患者中,34例(53.6%)血浆中抗 CPⅡb/Ⅲa 和(或)CPⅠb/Ⅸ自身抗体阳性,其中5例(14.7%)明显抑制了二磷酸腺甘(ADP)或瑞斯托霉素对血小板聚集的诱导作用;②用蛋白 A 柱结合蛋白酶酶切成功获得了纯化的 IgG 及 F(ab′)_2片段;③患者纯化的 IgG 及 F(ab′)_2片段均具有抗 GPⅡb/Ⅲa 或GP Ⅰb/Ⅸ活性,但去除 IgG 的血浆丧失了与 GPⅡb/Ⅲa 或 CP Ⅰb/Ⅸ的结合活性;④2例患者纯化的IgG 及其 F(ab′)_2片段抑制 ADP 诱导的血小板聚集。结论 F(ab′)_2片段是 IgG 自身抗体的功能片段,它不但保留了良好的抗原结合活性并可抑制血小板聚集功能,其抑制聚集作用呈剂量依赖性。
- 初晓霞侯明朱媛媛彭军冀学斌王琳张峰马道新
- 关键词:免疫活性血小板聚集
- 腔内治疗在主髂动脉硬化闭塞症中的应用被引量:11
- 2010年
- 目的探讨主髂动脉硬化闭塞症腔内治疗的技术要点及其疗效。方法回顾性分析主髂动脉硬化闭塞患者113例临床资料,其中男79例,女34例,年龄45岁~81(平均62.5)岁。TASCA型42例(37.17%),B型39例(34.51%),C型患者13例(11.50%),D型患者19例(16.81%)。腔内治疗经股动脉或肱动脉入路,采用通过闭塞段、球囊扩张、支架放置及股总动脉内膜剥脱等方法进行治疗。结果 107例患者主髂动脉闭塞病变获开通,开通率为94.7%。68例患者临床症状明显改善,39例中度改善,。平均随访(26±2.3)个月(6~54个月),术后6个月,1,2年的初次通畅率分别为82.76%,76.21%,67.66%,术后6个月,1,2年的二次通畅率分别为92.31%,81.67%,73.62%。结论对于主髂动脉硬化闭塞的患者,综合应用多种方法进行腔内治疗是一项安全有效的措施,可获得满意的临床疗效。
- 齐加新邹萍金星张十一袁海张精勇黄俊荣张蕾
- 关键词:主动脉髂动脉血管腔内治疗
- 胡桃夹综合症的介入治疗被引量:5
- 2011年
- 目的:提高对胡桃夹综合征的认识,探讨NCS的腔内治疗。方法:回顾性分析山东大学附属省立医院血管外科2009年5月~2011年3月收治的4例胡桃夹综合症患者的临床资料,行左肾静脉腔内治疗。结果:4例患者均手术成功,肉眼血尿于7天后减轻,10~14天完全消失,镜下血尿15~30天完全消失。2例术前精索静脉曲张患者于术后3周消失;1例术前腰部不适症状患者术后2周消失;1例术前尿蛋白患者于术后2周恢复正常。随访(13±0.3)个月。症状均无复发,尿常规检查末见异常,B超检查:4例患者肾形态、血流灌注正常,肾静脉支架脉通畅。结论:血管腔内治疗微创、简单,术中准确测量、精确放置支架及术后严格抗凝治疗是治疗成功的关键和保证。
- 孙岩刘洋张十一袁海金星
- 关键词:胡桃夹综合征血管腔内治疗