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江苏省科技计划项目(SBE201170578)

作品数:1 被引量:0H指数:0
相关作者:仝艳军王武杨海麟更多>>
相关机构:江南大学更多>>
发文基金:江苏省科技计划项目江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇全合成
  • 1篇酶性质
  • 1篇酶学性质
  • 1篇密码子
  • 1篇密码子优化
  • 1篇DNA表达

机构

  • 1篇江南大学

作者

  • 1篇杨海麟
  • 1篇王武
  • 1篇仝艳军

传媒

  • 1篇工业微生物

年份

  • 1篇2014
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
全合成3α-羟类固醇脱氢酶基因密码子优化及酶性质研究
2014年
以NCBI报道的Comamonas testosteroni ATCC11996中3α-羟类固醇脱氢酶基因(3α-hydroxysteroid dehydrogenase gene,3α-hsd,AF092031.2)为模板,通过改变碱基序列但不影响酶的氨基酸序列,将该基因相对于大肠杆菌的密码子适用指数由0.78提高到0.87,GC含量由原来的63.17降低到56.46,大幅度减少了GC簇及寡聚A和T局域的存在,提高3α—hsd的可表达性。全合成基因定向克隆到pET28a载体中,并转化至大肠杆菌B121(DE3)中表达。采用乳糖诱导后,SDS—PAGE检测在约27 kD处有一高效表达的蛋白条带。采用Ni螯合柱分离纯化3α-HSD,获得了较高纯度及较高的产率。酶学性质初步分析表明,全基因合成表达的3α-HSD的性质与原始的3α-HSD基本相同。
王志臻仝艳军杨海麟王武
关键词:密码子优化酶学性质
共1页<1>
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