天津市科技计划(09ZCKFNC00200)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- 相关机构:鼎正动物药业(天津)有限公司天津农学院天津市禽病诊断培训中心更多>>
- 发文基金:天津市科技计划天津市科技攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 鸡IFN-γ基因重组蛋白复性条件的优化及生物活性鉴定被引量:1
- 2012年
- 为提高鸡IFN-γ基因重组蛋白的复性效率,用18种不同的复性缓冲液对在大肠埃希菌中表达的cIFN-γ进行复性处理,通过SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝定量、对鸡胚成纤维细胞以及对鸡胚的保护试验检测复性产物的得率和生物学活性。结果表明,去污剂和疏水剂能保证蛋白的复性得率和复性效率,重组表达产物得率可高达94.7%;氧化还原电势是cIFN-γ成功复性的关键,有生物学活性的复性产物的复性液中均存在氧化还原对GSSG/GSH;经去污剂处理后再复性的产物对细胞保护的有效浓度显著低于直接复性的蛋白。
- 刘鼎阔王立红徐大为杨爱华王建春秦操张勇
- 关键词:生物学活性
- 鸡干扰素γ(c-IFNγ)重组蛋白的稳定性研究
- 2011年
- 以保护鸡胚成纤维细胞(CEF)抵御新城疫病毒(NDV)侵袭的能力为主要检测指标,考察鸡干扰素γ(c-IFNγ)的热稳定性、酸碱稳定性及冻融耐受性。在37℃及以上的热处理中,c-IFNγ样品迅速失活,其中60℃处理1 h活性即降低约70﹪;酸性环境中的样品极不稳定,在pH=2的液体制剂中1 h,蛋白质全部失活,但在碱性制剂中,96 h内其生物活性未发生明显变化;c-IFNγ液体制剂对冻融极为敏感,其生物学活性随冻融次数的增加呈线性下降。鸡干扰素γ重组蛋白对热及酸性环境不稳定,且不易冻存冻融。
- 王立红刘鼎阔徐大为郭立力王建春杨爱华张勇
- 关键词:热稳定性生物活性