江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目([2011]582)
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
- 相关作者：武晓泓王晓兢朱嘉瑜张勤凤徐一力更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院江阴市人民医院昆山市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新生期小鼠胰岛细胞自噬及其机制研究
- 2016年
- 目的观察新生期小鼠胰岛细胞自噬的变化，分析白噬相关基因的表达差异并初步探讨相关调控机制。方法采用胶原酶消化法分离纯化第1、3和8周小鼠胰岛细胞，透射电镜观察白噬体显微结构。采用免疫荧光双染法检测胰岛中微管相关蛋白1轻链3（LC3）与胰岛素双阳性细胞比例的变化。采用实时定量PCR技术检测自噬相关基因（Atg）mRNA水平的表达。采用Western blotting法检测目的蛋白的表达。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果（1）透射电镜结果显示，3周小鼠胰岛细胞出现内含胞浆或细胞器成分的具有双层膜结构的自噬体。免疫荧光结果显示，LC3在3周小鼠胰岛B细胞胞浆中着色较深，表达高于1周和8周（57．6±2．3比24．4±1．3、28．1±2．3，t=-21．44、-15．66，均P〈0．01）。（2）3周时，p53mRNA表达明显高于1周和8周，而哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）mRNA表达显著低于1周和8周（均P〈0．01）。新生期小鼠胰岛细胞Atg的表达呈动态变化。与1周和8周相比，3周时Atgl激酶同源蛋白（ULK—1）、Beclinl和Mapllc3b表达明显增高（P〈0．05）。与1周相比，3周时P13Kc3、Atg5、Mapllc3a和Atgl611表达显著增高（P〈0．05）；3周和8周时Atg4d的表达显著增高（P〈0．05）。Atg4c表达在3周时明显高于8周（P〈0．05）。（3）Western blotting显示，与1、8周相比，3周时p53、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（pAMPK）、Beclinl和LC3-Ⅱ蛋白表达均显著增高（F=29．14～56．05，均P〈0．01），而mTOR蛋白表达明显低于1周和8周（0．61±0．06比1．00±0．02、0．89±0．09，F=29．41，P〈0．01）。结论p53／pAMPK／mTOR／Beclinl介导的自噬信号通路可能参与新生期小鼠胰岛细胞自噬的调控。
- 高莉章辉石厚霞赵静赵馨徐宽枫武晓泓
- 关键词：胰岛自噬基因
- 住院糖尿病患者空腹高血糖及其相关因素的分析——一项多中心的临床调查研究被引量：5
- 2015年
- 目的:观察住院糖尿病患者中空腹高血糖的状况并分析其相关因素。方法:选取2013年1月—2014年12月在5家医院行动态血糖监测、资料完整的住院糖尿病患者1 055例。收集性别、年龄、糖尿病分型、病程、体重指数(BMI)、血压、糖化血红蛋白(Hb A1c)、血脂、尿白蛋白、大血管病变等临床资料,分析相关因素。结果:在住院糖尿病患者中,83.9%存在空腹高血糖,其中全天血糖控制不佳占75.2%,黎明现象占15.4%,Somogyi效应占9.4%。1型糖尿病患者Somogyi效应发生率显著高于2型,2型糖尿病患者全天不佳发生率显著高于1型。单因素分析结果显示在3个亚组中年龄、分型、病程、血压、血脂具有差异性(P<0.05)。二分类Logistic分析结果显示年龄越大、病程越长、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)越高,全天血糖控制不佳发生的风险越大(P<0.05),年龄越小、病程越短、收缩压越高、总胆固醇(TC)越高,黎明现象发生的风险越大(P<0.05),TC、TG越低,Somogyi效应发生的风险越大(P<0.05)。结论:住院糖尿病患者中普遍存在空腹高血糖现象,原因依次为全天血糖控制不佳、黎明现象、Somogyi效应。1型糖尿病更容易发生Somogyi效应。年龄、病程、TG、LDL-C为全天血糖控制不佳的危险因素,年龄、病程、收缩压、TC为黎明现象的危险因素,TC、TG为Somogyi效应的危险因素。
- 许琳钟绍潘颖方玲娜卢冰唐伟高远许岚姚丽君武晓泓
- 关键词：空腹高血糖黎明现象
- 新生小鼠胰岛增殖及口袋蛋白家族、E2F转录因子表达变化被引量：4
- 2013年
- 目的 观察新生小鼠胰岛细胞、细胞周期和视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）、视网膜母细胞瘤样蛋白1（p107）、视网膜母细胞瘤样蛋白2（p130）及E2F转录因子的变化特点,探讨其与胰岛细胞增殖的关系.方法 采用免疫组化法检测出生第1、3和8周小鼠胰岛β/α细胞量、单个细胞面积和细胞数量的变化.采用胶原酶消化法分离纯化小鼠胰岛,以流式细胞术检测细胞周期,实时定量PCR及蛋白印迹技术检测Rb、p107、p130和E2F转录因子mRNA和蛋白表达.结果 （1）小鼠3周和8周胰岛β/α细胞量显著高于1周（P＜0.05）;单个β/α细胞面积在3周时无明显差异,8周时扩大1.7倍（P＜0.01）;而β/α细胞数量在3周增加约3.5/3.7倍（P＜0.01）,8周与3周无明显差异.（2）1周和3周时G0/G1期细胞比8周明显减少（81.3±1.2、82.8±3.3比92.6±1.3,F=6.5,P＜0.05）,而G2/M期显著增多（13.4±1.4、12.2±1.8比5.5±0.5,F=6.3,P＜0.05）,细胞增殖指数明显增加（P＜0.05）.（3）8周时Rb mRNA表达明显低于1周和3周（P＜0.01）;3周和8周时p107 mRNA显著低于1周（P＜0.05）,而p130 mRNA显著高于1周（P＜0.05）,E2F-1、E2F-2 mRNA均显著低于1周（均P＜0.01）;8周时E2F-3 mRNA显著低于1周（P＜0.05）;而E2F-4、E2F-5 mRNA在3周和8周时表达增加.（4）8周时Rb和p107蛋白表达均比1周明显降低,p130表达显著增高,3周和8周时E2F1表达显著降低（均P＜0.05）.结论 新生小鼠胰岛细胞量扩增明显,以细胞数量增加为主,细胞增殖显著.Rb、p107、p130及其相关E2F转录因子的表达存在动态变化,可能参与细胞增殖的调控.
- 朱嘉瑜王晓兢张勤凤徐一力吕颖钺张洁吴雨洁武晓泓
- 关键词：胰岛增殖
- 新生期小鼠胰岛分离纯化方法的研究被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨新生期小鼠胰岛分离纯化方案。方法:采用胰腺局部充盈、胶原酶Ⅴ消化,对比不同消化时间及单纯显微镜下手挑胰岛或Histopaque-1077纯化对胰岛得率的影响,并通过胰岛素/胰高血糖素双染后流式细胞术检测胰岛β和α细胞构成比例。结果:在1 mg/ml酶浓度下,1周和3周小鼠胰岛的最适消化时间分别为23 min(胰岛/胰腺38.11±2.78)和25 min(胰岛/胰腺66.06±2.61)。1周以直径<50μm胰岛居多(P<0.01),而3周以50～99μm者居多(P<0.01)。单纯手挑组胰岛得率显著高于Histopaque-1077纯化组(P<0.05)。所得胰岛存活率和纯度均>90%,且存在β和α细胞构成比例的动态变化(P<0.05)。结论:胰腺局部充盈、胶原酶Ⅴ消化后镜下手挑胰岛是一种较好的新生期小鼠胰岛分离纯化方法,消化时间和纯化方法是其重要影响因素。
- 朱嘉瑜王晓兢张勤凤徐一力武晓泓
- 关键词：小鼠胰岛分离纯化
