河北省自然科学基金(C2009001037)
- 作品数：4 被引量：8H指数：3
- 相关作者：安胜军刘培邵铁梅高维娟卢海刚更多>>
- 相关机构：河北化工医药职业技术学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血管紧张素Ⅱ对血管外膜成纤维细胞亚群增殖的影响被引量：5
- 2013年
- 血管损伤后发生的管壁结构重塑是血管重建术后再狭窄、动脉粥样硬化等多种心血管疾病发病的共同病理基础。已有研究表明血管外膜并非仅起支撑作用，在血管损伤和高血压中也起重要作用。特别是在某些刺激因子作用下，成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞，表达α-平滑肌肌动蛋白，迁移至内膜下区域和新生内膜中并增殖，同时胶原合成增加，导致血管重构。
- 刘培邵铁梅李雪焦展温昕仵陶安胜军
- 关键词：亚群增殖
- 血管紧张素Ⅱ及其受体阻断剂对大鼠血管外膜成纤维细胞亚群迁移和ET-1表达的影响被引量：4
- 2012年
- 本研究旨在观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)及其受体阻断剂对SD大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞亚群迁移及内皮素-1(endothelin-1,ET-1)表达的影响。采用克隆环法进行血管外膜成纤维细胞单克隆培养,并观察其细胞形态;RT-PCR方法进行细胞纯度鉴定;Transwell小室法检测AngⅡ对细胞亚群迁移的影响;荧光定量-PCR方法检测AngⅡ及其拮抗剂对preproET-1 mRNA表达的影响;ELISA法检测AngⅡ及其拮抗剂对ET-1分泌的影响。结果显示,克隆环法获得血管外膜成纤维细胞两个亚群:纺锤形细胞亚群和圆形细胞亚群。RT-PCR检测显示所获得的成纤维细胞亚群是纯细胞系。Transwell小室实验结果表明,两个细胞亚群均具备迁移能力,与自身对照相比,AngⅡ显著促进圆形细胞迁移,对纺锤形细胞迁移无明显影响;AngⅡ(1×10 8～1×10 6mol.L 1)对纺锤形细胞preproET-1 mRNA的表达及ET-1分泌无显著性影响,而呈浓度依赖性显著增加圆形细胞preproET-1mRNA的表达及ET-1的分泌(P<0.05,P<0.01);氯沙坦阻断AngⅡ诱导的圆形细胞preproET-1 mRNA的表达及ET-1的分泌,对纺锤形细胞preproET-1 mRNA的表达及ET-1的分泌无明显影响。以上结果提示,SD大鼠血管外膜成纤维细胞有两个细胞亚群:纺锤形细胞亚群和圆形细胞亚群。AngⅡ显著促进圆形细胞的迁移和ET-1的表达,提示两个细胞亚群的迁移机制可能不同,两种亚群在血管重建和修复过程中可能发挥不同作用。
- 卢海刚刘培邵铁梅柴锡庆高维娟安胜军
- 关键词：血管紧张素-II血管外膜成纤维细胞迁移
- 血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对血管外膜成纤维细胞亚群增殖和胶原合成的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其受体拮抗剂氯沙坦(Los)和PD123319对大鼠胸主动脉血管外膜成纤维细胞亚群增殖和胶原生成的影响。方法通过克隆环法获得血管外膜成纤维细胞单克隆,根据细胞表型克隆了两种细胞亚型并分别进行培养,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光染色方法鉴定细胞的纯度;流式细胞术对两细胞亚群的形状和大小进行比较;四甲基偶氮唑盐(MTT)法和Western印迹法检测AngⅡ及其受体拮抗剂Los、PD123319对细胞亚群的增殖活性和Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)合成的影响。结果克隆环法获得血管外膜成纤维细胞两个亚群,经显微镜和流式细胞仪观察根据细胞表型分别命名为:圆形细胞亚群(RC)和纺锤形细胞亚群(SC)。经RT-PCR和免疫荧光染色对第Ⅷ因子(vWF)、CD8、MHC、Desmin进行检测,结果显示无内皮细胞、平滑肌细胞细胞标志物的表达,分别为两种纯系细胞。实验发现AngⅡ对RC亚群的增殖活性及CollagenⅠ的合成能力均有显著影响,既促进RC的增殖又提高Ⅰ型胶原的合成,但经Los预处理后,AngⅡ的促增殖及胶原合成能力被显著性抑制(P<0.05),而SC亚群的增殖活性和胶原合成情况无显著性改变。经PD123319预处理后,对RC亚群和SC亚群增殖和胶原的合成均无明显影响。结论 AngⅡ在促进两细胞亚群的增殖和胶原合成的能力方面有差异,说明血管外膜成纤维细胞两种亚群在表型、功能和作用机制上具有显著性的差异,提示两种细胞亚群在病理生理机制及其血管重构和修复过程中扮演着不同的角色。
- 刘培李雪焦展邵铁梅仵陶温昕陈晓威安胜军
- 关键词：增殖胶原氯沙坦
- 大鼠血管外膜成纤维细胞亚群生长特性及功能研究被引量：5
- 2012年
- 目的:体外分离培养SD大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞亚群,并对其增殖特性和血管功能进行初步分析。方法:克隆环法进行血管外膜成纤维细胞的单克隆培养,RT-PCR鉴定细胞亚群纯度,MTT检测血管外膜成纤维细胞亚群增殖能力。荧光定量PCR检测血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及其受体拮抗剂氯沙坦(losartan)和PD-123319对前内皮素原-1(preproET-1)mRNA表达的影响。结果:克隆环法获得血管外膜成纤维细胞2个亚群:圆形细胞亚群和纺锤形细胞亚群。以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照,经RT-PCR检测,结果显示无von Wille-brand因子、CD8、结蛋白和肌球蛋白重链的表达,是纯细胞系。2个细胞亚群的增殖情况有所不同,圆形细胞在第2～4 d进入指数分裂期;纺锤形细胞于第3～5 d进入指数分裂期。Ang Ⅱ在0～1 000 nmol/L范围内对纺锤形细胞preproET-1 mRNA的表达无显著影响,而呈浓度依赖性地增加圆形细胞preproET-1 mRNA的表达(P<0.01);losartan阻断了Ang II诱导的圆形细胞preproET-1 mRNA的表达,但对纺锤形细胞preproET-1 mRNA的表达无明显影响。结论:SD大鼠血管外膜成纤维细胞有2个细胞亚群:圆形细胞和纺锤形细胞,其生长特性略有不同。AngII显著促进圆形细胞preproET-1 mRNA的表达,提示这2个细胞亚群可能在血管重建和修复过程中发挥不同作用。
- 刘培邵铁梅卢海刚柴锡庆高维娟安胜军
- 关键词：成纤维细胞亚群
