国家自然科学基金(31160309)
- 作品数：14 被引量：92H指数：6
- 相关作者：柳陈坚李晓然罗义勇龚福明宫路路更多>>
- 相关机构：昆明理工大学遵义医药高等专科学校长春生物制品研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程医药卫生更多>>
- 乳酸菌发酵液中DL-3-苯乳酸高效液相色谱快速检测方法的建立被引量：1
- 2013年
- DL-3苯乳酸是近年来发现可以由部分乳酸菌分泌产生的一种新型有机酸,它能够有效抑制多种食源性致病菌,并且具有安全、无毒副作用、低浓度添加时不影响食品风味等优点.然而现有苯乳酸检测方法存在所需检测设备投入成本高、操作步骤繁琐等缺陷,从而严重限制高产苯乳酸菌株的筛选和利用.本研究建立乳酸菌发酵液中苯乳酸高效液相色谱法快速检测方法,采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱;流动相A:0.5%磷酸水溶液(V/V),B:0.5%磷酸乙腈溶液(V/V).流速1 mL/min,检测波长210 nm.DL-3-苯乳酸浓度在60～800 mg/L之间线性回归良好(其方程为y=14.723x+0.132 5,r=0.999 9).应用本检测法对乳酸菌MRS发酵上清液进行50～150 mg/L的添加回收实验结果表明,其平均回收率均在94%以上,样品测定相对标准偏差为0.58%,由此表明本检测方法确实可行.
- 张忠华李晓然李洪梅李海舟龚福明柳陈坚
- 关键词：苯乳酸高效液相色谱法乳酸菌
- 凯里地区辣椒酸细菌群落多样性及其乳酸菌分离鉴定被引量：6
- 2021年
- 利用Illumina MiSeq高通量测序技术对凯里地区辣椒酸中细菌群落多样性进行研究,并结合传统纯培养技术对样品中乳酸菌进行分离鉴定。结果显示,样品中优势细菌门为厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria),相对含量分别为77.9%和19.59%;优势细菌属为乳酸杆菌(Lactobacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacterales)、Lelliottia、芽孢杆菌属(Bacillus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)和寡养单胞菌属(Stenotrophomonas),相对含量分别为72.02%、5.59%、3.97%、5.30%、1.64%、1.07%和1.02%。同时,采用纯培养技术从辣椒酸中分离出了43株细菌,其中34株被鉴定为乳酸杆菌,6株为芽孢杆菌,3株为葡萄球菌。由此可见,乳酸杆菌为凯里地区辣椒酸中的优势细菌,且主要为植物乳杆菌;同时分离出了葡萄球菌,提示传统发酵辣椒酸存在一定的食品安全风险,应引起重视。
- 李洁崔霖芸陈芳勇宫路路
- 关键词：高通量测序细菌多样性乳酸菌
- 植物乳杆菌素产生条件及分离方法的优化被引量：4
- 2014年
- 目前植物乳杆菌常规发酵产生的植物乳杆菌素产量一般较低,优化植物乳杆菌素的产生条件和分离纯化方法是提高其产量的有效途径。本文以3株Lb.plantarum为实验材料,研究了发酵时间、温度、培养液初始pH值和培养基成分等因素对Plantaricin产量的影响。基于优化培养条件的研究结果,再探究五种不同Plantaricin的分离纯化方法,使两者达到最佳组合。研究发现：（1）发酵时间在28~35 h内,温度30~37℃,培养液初始pH在6.5~7.0,10 g/L葡萄糖和10 g/L蔗糖为碳源,10 g/L蛋白胨、5 g/L牛肉膏和5 g/L酵母粉为氮源,2 g/L磷酸氢二钾、0.2 g/L硫酸镁、0.05 g/L硫酸锰、2 g/L柠檬酸铵和5 g/L乙酸钠为无机盐,1 mL/L吐温-80为乳化剂,优化后Plantaricin产量较优化前提高了1.5倍以上;（2）最佳分离方法为超滤法。发酵液通过超滤法分离后,回收率达到了71%。本研究为获得尽量多的Plantaricin以及Plantaricin工业化开发利用提供理论基础和技术支撑。
- 姜黎明罗义勇王良才李晓然柳陈坚
- 乳酸片球菌发酵液中主要有机酸及其抑菌性研究被引量：24
- 2014年
- 为研究乳酸片球菌发酵产生的有机酸与其抑菌活性之间的相关性,采用spot-on-lawn法及琼脂扩散法研究其抑菌活性,利用HPLC分析发酵液主要有机酸组分。结果表明:乳酸片球菌以葡萄糖作为发酵碳源时发酵能力最强,且主要抑菌物质为有机酸;乳酸、乙酸与总酸含量与抑菌活性存在正相关性(P<0.05)。乳酸片球菌发酵液有机酸组分与抑菌活性的研究为开发新型生物防腐剂的潜在菌株的筛选提供依据。
- 李洁李晓然宫路路罗义勇柳陈坚
- 关键词：乳酸片球菌有机酸抑菌活性
- 干酪乳杆菌发酵液中的主要有机酸及其抑菌性被引量：12
- 2019年
- 干酪乳杆菌在食品生物防腐方面起着重要的作用。为研究干酪乳杆菌发酵产生的有机酸的分离方法及其抑菌活性,采用乙酸乙酯萃取干酪乳杆菌的培养上清液,通过旋转蒸发仪对各萃取相进行浓缩,并采用spot-on-lawn改进法研究其抑菌活性,利用高效液相色谱(HPLC)分析萃取液中的主要有机酸成分。结果表明,乙酸乙酯相旋蒸余相对大肠杆菌O157∶H7、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特菌三种食源性致病菌均表现出很好的抑菌效果,且对大肠杆菌O157∶H7和单核细胞增生李斯特菌的抑制最为明显,抑菌圈直径分别达到(20.00±0.82)、(21.67±0.94) mm,其主要的抑菌有机酸组分为乳酸、乙酸和苯乳酸。该研究为分离乳酸菌发酵液中有效活性抑菌物质提供了一种确实可行的方法。
- 李卫娜黄文宇柳陈坚李晓然
- 关键词：干酪乳杆菌有机酸乙酸乙酯抑菌性
- 红河传统发酵豆豉中高纤溶活性菌株的分离筛选及其纤溶酶基因分析被引量：5
- 2014年
- 运用脱脂乳固体培养基及纤维蛋白固体培养基的两步分离筛选法,从云南红河传统发酵豆豉中分离筛选具有高产豆豉纤溶酶活性的菌株,同时对它们的豆豉纤溶酶基因进行克隆分析,以期为新型功能性豆豉的研发提供备选菌株及理论依据。研究结果表明,两步分离筛选法能有效地从云南红河传统发酵豆豉中筛选到高产豆豉纤溶酶的菌株Bacillus subtilis LC-2-1,对该高产菌株的豆豉纤溶酶成熟肽基因分析及预测结果表明,菌株B subtilis LC-2-1确实能分泌一种由825个碱基编码275个氨基酸残基且分子量约为27.4kDa的豆豉纤溶酶,与纳豆激酶及其他豆豉纤溶酶相比差异显著,同源性仅为85.1%。同时其豆豉纤溶酶活性分析结果则表明,菌株B subtilis LC-2-1所产纤溶酶活性较高,可达79.84 U/mL。因此,本研究结果将为新型且具有溶血栓功能发酵豆豉的研发提供备选菌株及理论依据。
- 龚福明李晓然宋园亮罗义勇张忠华柳陈坚
- 关键词：豆豉纤溶酶基因分析
- 不同植物乳杆菌发酵液抑菌活性及其主要有机酸组成比较（英文）被引量：12
- 2019年
- 对分离自云南传统发酵食品的18株植物乳杆菌代谢产物的主要有机酸成分及对病原菌抑菌活性进行分析。采用Spot-on-lawn及琼脂扩散法研究不同植物乳杆菌代谢产物抑菌活性;通过高效液相色谱法分析主要有机酸的种类和产量;选取其中3株植物乳杆菌对其进行包括生长曲线、pH值、抑菌活性在内的动态监测。结果表明,抑菌活性取决于不同的植物乳杆菌菌株、病原菌及发酵碳源。当大肠杆菌O157:H7作为病原菌、葡萄糖作为碳源时,植物乳杆菌YmL-4-5具有最高的抑菌活性;当沙门氏菌ATCC 6538作为病原菌、果糖作为碳源时,植物乳杆菌S5抑菌作用最强。数据证明植物乳杆菌发酵液的抑菌活性受上清液低pH值的影响,且主要抑菌物质为有机酸。有机酸的主要成分是乳酸(930.9～3 008.7μg/mL),其次为苹果酸和乙酸。其中乳酸和乙酸的产量与其对大肠杆菌O157:H7的抑菌活性呈正相关(r分别为0.474、0.488,P<0.05)。本研究为研发新的生物防腐剂提供了理论依据。
- 李书鸿柳陈坚任贝贝李强坤罗义勇杨恩李晓然
- 关键词：植物乳杆菌有机酸抑菌活性
- Lactobacillus plantarum subsp.plantarum YM-4-3植物乳杆菌素编码基因座遗传分析(英文)被引量：1
- 2013年
- 对从云南传统发酵豆豉分离得到的Lactobacillus plantarum subsp.plantarum YM-4-3菌株所编码的植物乳杆菌素基因座进行遗传分析研究.研究结果表明该植物乳杆菌素基因座由22 481个核苷酸组成,包括plnEFI,plnRLJK,plnABCD,plnMNOP,plnGHSTUVW 5个操纵子,分别涉及植物乳杆菌素生物合成、免疫、调控和转运功能.该菌株所编码的植物乳杆菌素基因座与先前报道的L.plantarum C11相类似,然而由于该菌株所编码的plnH基因缺失一个核苷酸,最终导致读码框移位,终止密码子提前出现,从而致使所表达的plnH蛋白丧失相应功能.由于转运操纵子plnGHSTUVW高度保守,目前尚未有该操纵子内plnH功能缺失的相关报道.plnH基因编码ABC转运蛋白的辅助蛋白,但是该蛋白在植物乳杆菌素生物合成中所担当的功能尚未明确.YM-4-3菌株可以作为plnH蛋白缺失模式菌株,进一步研究其该基因在植物乳杆菌素生物合成中的相关功能.
- 栾建军张忠华李晓然龚福明罗义勇宫路路柳陈坚
- 关键词：植物乳杆菌细菌素
- 微生物分子生态学发展历史及研究现状被引量：5
- 2012年
- 微生物群落多样性是微生物生态学和环境学研究的重点之一。分子生物学方法应用于微生物群落结构分析使得对环境样品中占大多数的不可培养微生物的研究成为了可能。由于功能上高度保守,序列上的不同位置具有不同的变异速率,核糖体RNA(rRNA)是目前在微生物分子生态学上最为有用以及应用最广泛的分子标记,通过rRNA序列比对,可以分析不同分类水平的系统发育关系。元基因组学研究方法通过对环境样品中的各种微生物群落的总的基因组进行分析,充分展示了环境微生物代谢途径,极大地扩展了对微生物的认识。快速发展的高通量测序极大地促进了各项微生物生态学技术的发展,带来了新的突破。
- 李晓然吕毅宫路路柳陈坚
- 关键词：微生物群落多样性分子生态学
- 植物乳杆菌对食源性病原菌作用的研究被引量：9
- 2016年
- 通过牛津杯法筛选得到几株高抑菌活性的植物乳杆菌,使用蛋白酶K和Na OH对这几株杆菌的发酵液上清进行处理,以大肠杆菌O157:H7和金黄色葡萄球菌为指示菌,发现有机酸为主要抑菌物质,但是调节p H值至6.5后的发酵上清液可以对大肠杆菌有较好的抑菌效果。其中植物乳杆菌QB3-3具有长达96 h的持续抑菌效果。电子显微镜观察显示,植物乳杆菌抗病原菌的主要机理为破坏细胞结构,导致病原菌菌体形态改变,内容物流出,致使细胞死亡。
- 李强坤柳陈坚张园莲常林杰罗义勇李晓然
- 关键词：植物乳杆菌有机酸抑菌
