北京市自然科学基金(7082049)
- 作品数：5 被引量：6H指数：3
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- 噻唑橙光化学法对血浆中病毒灭活作用的研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨噻唑橙(TO)光化学法对血浆中伪狂犬病毒(PRV)和Sindbis病毒的灭活效果。方法配制TO-血浆溶液并测量其吸收光谱,制作照射光源;以PRV和Sindbis病毒为指示病毒,加入血浆以模拟病毒污染血浆;测量病毒灭活动力学曲线;做TO浓度(C)、光照强度(C)、光照时间(T)三因素三水平正交试验(n=4)以确定最优灭活条件;验证最优条件下裸照、血袋充氧前后的病毒灭活效果。结果 TO-血浆最大吸收峰位于476 nm处;病毒灭活动力学曲线显示:在TO 60μmol/L、光强1.06E-01 w.m-2.nm-1条件下,时间5 min,即可将血浆中绝大多数病毒灭活,此后进入平台期;正交试验显示:血浆中PRV及Sindbis病毒最优灭活条件均为:I=1.33E-01 w.m-2.nm-1,T=20 min,C=80μmol/L。在此条件下,灭活效果为裸照PRV≥6.13 LogTCID50(n=8),Sindbis病毒为(5.86±0.29)LogTCID50(n=8);血袋PRV(5.66±0.29)LogTCID50(n=4),Sindbis病毒(3.88±0.25)LogTCID50(n=4);充氧血袋PRV(6.32±0.55)LogTCID50(n=4),Sindbis病毒(6.00±0.35)LogTCID50(n=4)。结论 TO光化学法可有效灭活血浆中病毒,氧含量的增加可以提高病毒灭活的效果。
- 朱家明杨玲玲王卓妍任芙蓉
- 关键词：光化学法病毒灭活伪狂犬病毒辛德毕斯病毒
- 噻唑橙光化学法对红细胞中病毒及细菌灭活作用的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨噻唑橙(TO)光化学法对红细胞中病毒及细菌灭活效果。方法以伪狂犬病毒(PRV)和辛德毕斯(Sindbis)病毒为指示病毒,分别加入红细胞比积为20%的红细胞悬液中,TO孵育1 h后做476 nm光照射处理;研究病毒灭活动力学特征;做TO浓度(C)、光照强度(I)、光照时间(T)三因素三水平正交试验确定最优灭活条件;最优条件下检测裸照、密闭血袋中、密闭血袋充氧后的病毒灭活效果;最优条件下检测血液污染常见细菌小肠结肠炎耶尔森氏菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌灭活效果。结果病毒灭活动力学研究显示:在60μmol/LTO、1.06E-01 w·m-2·nm-1光强条件下,照射5 min可将大部分PRV和Sindbis病毒灭活,20 min灭活作用达峰值,分别为5.88和5.12 LogTCID50;正交试验显示:裸照时PRV及Sindbis病毒灭活最优条件均为I=1.33E-01 w·m-2·nm-1,T=20 min,C=80μmol/L;在此条件下,可灭活红细胞中PRV≥6.13LogTCID50(裸照,n=4)、(4.75±0.62)LogTCID50(密闭血袋,n=4)、(6.06±0.16)LogTCID50(密闭血袋充氧,n=4);可灭活红细胞中Sindbis病毒(5.41±0.12)LogTCID50(裸照,n=4)、(3.72±0.77)LogTCID50(密闭血袋,n=4)、(5.76±0.25)LogTCID50(密闭血袋充氧,n=4)。在此条件下细菌灭活效果:小肠结肠炎耶尔森氏菌(5.91±0.13)Log10、金黄色葡萄球菌>6.8Log10、表皮葡萄球菌>6.0 Log10。结论 TO光化学法可有效灭活红细胞中病毒,有氧情况下(裸照或充氧)病毒灭活效果好于密闭无氧。TO光化学法可有效灭活红细胞中细菌。
- 杨玲玲朱家明王卓妍宋美兰任芙蓉
- 关键词：光化学法红细胞病毒灭活伪狂犬病毒辛德毕斯病毒
- 噻唑橙光化学法病原体灭活对红细胞质量的影响被引量：3
- 2012年
- 目的评价噻唑橙(TO)光化学法病原体灭活处理对红细胞质量的影响。方法设实验组(n=10):悬浮红细胞经TO光化学法处理后,在4℃储存0、7、14、21、28、35 d时,分别测定pH、溶血率、钾浓度、ATP浓度、2,3-DPG浓度;对照组(n=10):悬浮红细胞未经TO光化学法处理,测定时间、项目同实验组。结果保存过程中实验组pH、2,3-DPG(μmol/gHb)及ATP(μmol/gHb)下降趋势均与对照组差异不大(P>0.05),实验组分别从0 d的7.03±0.07、9.43±1.14、4.23±0.58下降到35 d的6.57±0.06、0、2.40±0.49,对照组分别从0 d的6.95±0.09、10.67±1.17、5.18±0.64,下降到35 d的6.57±0.07、0、2.99±0.44;实验组和对照组35 d储存期末ATP浓度分别为0 d时的56.7%和57.7%。;实验组在储存期末,溶血率为(0.27±0.06)%,略高于对照组0.11±0.04%(P<0.05),仍满足溶血率≤0.8%的国标要求;钾外漏实验组较对照组增加,35 d时分别为(40.41±2.94)mmol/L和(28.33±3.34)mmol/L(P<0.01)。结论 TO光化学法处理对储存过程中的红细胞的质量影响较小。
- 朱家明杨玲玲任芙蓉王卓妍
- 关键词：红细胞病原体灭活红细胞质量光化学法
- 红细胞吸收噻唑橙动力学观察被引量：1
- 2012年
- 目的了解噻唑橙(TO)在红细胞保养液MAP液中的吸收光谱特性及其稳定性;了解红细胞(RBC)对TO吸附吸收、洗脱的动态过程。方法用MAP液配制120 mmol/L TO-MAP液,4℃避光保存,于配制后d 0、3、17,分别用可见紫外分光光度计进行350～600 nm扫描,观察其吸收光谱的变化;配制成TO-MAP-RBC悬液,于第0、2、4、12、24 h分别离心,取上清液测定其350～600 nm的扫描光谱;取储存2 d的TO-MAP-RBC液,离心弃上清,加生理盐水洗涤6次,每次间隔20 min,收集每次洗涤液,测定其350～600 nm扫描光谱。结果 MAP液中TO吸收主峰位于468 nm,在430 nm和520 nm有2处肩峰,储存0、7 d TO-MAP液扫描线几乎完全重叠,储存17 d扫描线略有降低;TO-MAP-RBC悬液0、2、4、12、24 h其上清液的扫描线有较大的降低;洗涤液的扫描光谱显示,第1～2次洗涤TO被洗脱的量较大,第3～6次洗涤TO被洗脱的量较小,并趋于平稳。结论 TO在MAP液中非常稳定,这为TO光化学病原体灭活提供了必要条件;TO可被红细胞吸附或吸收;TO洗脱的动力学过程提示,为降低TO对测定红细胞活性功能指标的影响,可增加洗涤次数及延长洗涤间隔。
- 杨玲玲朱家明王卓妍任芙蓉
- 关键词：红细胞光谱病毒灭活
- 辛德比斯病毒和伪狂犬病毒制备方法的优化被引量：3
- 2008年
- 目的优化辛德比斯病毒(Sindbis virus)和伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的培养和制备方法,建立高效价病毒制备方法。方法从选用不同宿主细胞、不同的宿主细胞培养方式、以及不同的病毒悬液收集方式3方面考察病毒效价。病毒效价测定采用细胞病变法,按Karber氏法计算病毒效价。结果用非洲绿猴肾(Vero)细胞培养的Sindbis病毒效价(8.63±0.45)明显高于用幼仓鼠肾(BHK)细胞培养的病毒效价(7.63±0.30)(P<0.05);用Vero细胞培养的PRV效价(8.13±0.59)也明显高于用BHK细胞培养的病毒效价(6.94±0.71)(P<0.05);宿主细胞长满单层后继续换液培养或再传代培养2种提高病毒效价的方式所制备的病毒效价(7.69±0.98vs 7.54±0.69)的差异无统计学意义(P>0.05),可任选其一;收获病毒时,直接收集培养悬液离心组(直收-冻组)病毒效价(8.66±0.83)较先冻融2次再离心组(冻-收-冻组)病毒效价(8.14±0.91)高(P<0.05)。结论建立了制备高效价Sindbis病毒和PRV的方法;制备Sindbis病毒和PRV宜选用Vero细胞;病毒培养悬液直接离心分装即可,既简化操作又可获高效价病毒。
- 王卓妍任芙蓉周锡鹏许金波吕秋霜龚晓燕
- 关键词：病毒培养伪狂犬病毒
