中国中医科学院自主选题项目(Z02151) 作品数:7 被引量:60 H指数:5 相关作者: 雷燕 王铭 陶丽丽 陈可冀 杨静 更多>> 相关机构: 中国中医科学院 中国中医科学院西苑医院 清华大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 中国中医科学院自主选题项目 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人参、三七、川芎提取物对血管平滑肌细胞衰老相关β半乳糖苷酶及p16-cyclinD/CDK-Rb通路的影响 被引量:17 2012年 目的:观察人参、三七、川芎提取物延缓自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)衰老的作用及其可能的细胞周期调控机制。方法:取大鼠胸主动脉用于分离VMSC,采用原代细胞培养的方法建立SHR大鼠VMSC模型,实验分为Wistar-Kyoto(WKY)大鼠对照组、SHR模型组、缬沙坦组、中药低剂量组和中药高剂量组。采用衰老相关β半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色法观察细胞衰老情况,流式细胞仪分析细胞周期分布,逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹法检测各组细胞p16、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase4,CDK4)和成视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,Rb)的表达。结果:SA-β-gal染色显示,与WKY组比较,SHR组SA-β-gal阳性细胞数明显增多(P<0.01),人参、三七、川芎提取物可使SHR VSMC SA-β-gal阳性细胞数明显减少(P<0.01);流式细胞仪检测显示,与WKY组比较,SHR组VSMC在G1期明显减少,S期细胞明显增加,中药干预后SHR的VSMC G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P<0.05);实时荧光定量聚合酶链式反应检测显示,与WKY组比较,SHR组VSMC的p16和Rb mRNA表达量明显减少,cyclin D1和CDK4mRNA表达增加;人参、三七、川芎提取物干预后SHR VSMC p16和Rb mRNA表达量增加,cyclin D1和CDK4mRNA减少。蛋白质印迹法显示,与WKY组比较,SHR组VSMC的p16蛋白表达量明显减少,cyclin D1、CDK4和磷酸化Rb蛋白表达量明显增加(P<0.05);中药干预后SHR VSMC p16蛋白表达增加,cyclin D1、CDK4和磷酸化Rb蛋白表达量减少(P<0.05)。结论:人参、三七、川芎提取物通过改变p16-cyclin D/CDK-Rb通路因子的表达而发挥延缓SHR VSMC衰老的作用。 陶丽丽 雷燕关键词:血管老化 P16基因 细胞周期蛋白D1 人参三七川芎提取物抑制p53基因表达促进衰老内皮细胞增殖的研究 被引量:3 2015年 目的:探讨益气活血中药对血管内皮细胞衰老和p53基因表达的干预作用。方法:分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC),传代培养至第4代,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,10-6mol/L,48h)诱导其衰老;分为空白对照组、AngⅡ组、中药提取物组和替米沙坦组;观察各组不同时间点β-半乳糖苷酶染色、CCK-8细胞计数、细胞周期分析、p53 m RNA及蛋白表达。结果:AngⅡ组较空白对照组β-半乳糖苷酶阳性染色细胞数增加(P<0.05);CCK-8检测活细胞数减少(P<0.05);细胞大量停滞于G0/G1期,而S期和G2/M期逐渐消失(P<0.05)。中药提取物组和替米沙坦组β-半乳糖苷酶阳性染色细胞数下降(P<0.05),CCK-8活细胞数增加(P<0.05),细胞周期阻滞改善(P<0.05)。中药早期作用更加明显(P<0.05)。AngⅡ呈时间依赖性上调p53 m RNA和蛋白表达;中药提取物和替米沙坦两组p53表达均明显下调(P<0.05);中药早期作用更加明显(P<0.05)。结论:益气活血中药能够有效地延缓血管内皮细胞衰老,其机制可能与抑制p53基因表达有关。 王铭 雷燕 陈连凤 苗立夫关键词:P53 细胞增殖 人参三七川芎提取物激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ延缓血管内皮细胞衰老的研究 被引量:5 2015年 目的:探讨血管内皮细胞衰老过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达变化和益气活血中药人参三七川芎提取物的干预作用。方法:分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC),传代培养至第4代,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,10-6mol/L,48h)诱导其衰老;分为空白对照组、AngⅡ组、中药提取物组和替米沙坦(telmisartan)组;观察不同时间点β-半乳糖苷酶染色、NO含量、PPARγm RNA及蛋白表达。结果:AngⅡ组较空白对照组β-半乳糖苷酶阳性染色细胞数增加(P<0.05),NO含量明显下降(P<0.05)。与AngⅡ组比较,中药提取物组和替米沙坦组β-半乳糖苷酶阳性染色细胞数下降(P<0.05),NO含量增加(P<0.05)。AngⅡ呈时间依赖性上调PPARγm RNA表达,但蛋白表达呈现早升后降趋势;中药提取物和替米沙坦两组PPARγ表达均明显上调(P<0.05),中药早期作用更为显著(P<0.05)。结论:益气活血中药能够延缓血管内皮细胞衰老,其机制可能与诱导PPARγ表达有关。 王铭 雷燕 陈连凤 苗立夫 李瑛关键词:过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 浅谈中医防治冠心病的新思路 被引量:2 2012年 文章系统阐述了中医防治冠心病的特色和优势,指出充分运用活血化瘀理论是一套科学的、行之有效的方法。在此基础上,从"双心"疾病和冠心病冬季预防两个角度,介绍了关于中医防治冠心病和发展活血化瘀理论的一些看法和建议,特别认为中医防治冠心病应该坚持以活血化瘀理论为基础,选择符合中医特点并体现中医优势的靶点进行有针对性的干预。使其做到疗效确切,机制清楚,另辟蹊径,扬长避短,得到广泛的认可。 王铭 雷燕关键词:中医 冠心病 人参三七川芎提取物延缓衰老小鼠血管老化的实验研究 被引量:23 2010年 目的探讨衰老小鼠血管老化所导致的血管壁结构和功能的改变以及人参、三七、川芎提取物的干预作用。方法建立自然衰老小鼠模型,小鼠随机分为衰老模型组、人参三七川芎提取物高、中、低剂量组、维生素E组,另设青年对照组,观察各组主动脉形态学改变,检测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管组织抗超氧阴离子、晚期糖基化终末产物(AGEs)、基质金属蛋白酶(MMP-2)与其抑制剂(TIMP-2)含量以及MMP-2/TIMP-2比值。结果人参三七川芎提取物能够改善衰老小鼠主动脉形态学衰老变化,HE染色见内皮细胞脱落减少,平滑肌细胞(SMC)增生减少,Masson染色显示中药各组胶原纤维相对含量降低(P<0.05),中药高剂量组SMC相对含量降低(P<0.05)。中药高、中、低剂量组血管组织抗超氧阴离子含量显著增高,AGEs含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。中药各剂量组小鼠血管组织MMP-2水平降低,TIMP-2水平显著升高,MMP-2/TIMP-2比值明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论人参三七川芎提取物能够改善衰老小鼠主动脉形态学衰老变化,降低血管组织中活性氧的生成,减少AGEs生成,抑制MMP-2的活性,调节MMP-2/TIMP-2的平衡,从而最终降低衰老小鼠血管的僵硬度,减少血管重构,延缓小鼠血管老化的发生。 雷燕 杨静 赵浩 杜雪君 刘建刚 陈可冀关键词:血管老化 自然衰老小鼠 活性氧 晚期糖基化终末产物 紫暗舌与心肌梗死患者预后关系的研究 被引量:5 2012年 目的探讨紫暗舌与心肌梗死患者预后的相关性。方法运用"中医舌诊图像专家智能分析系统(TY-SX3)"进行紫暗舌的鉴定,心梗后稳定期连续7 d出现紫暗舌的患者被纳入紫暗舌组(63例),连续7 d均为非紫暗舌的纳入非紫暗舌组(65例),并检测入选病例的心血管预后指标脑钠肽(BNP)和心率震荡(HRT),进行相关性分析。结果紫暗舌患者的BNP水平明显高于非紫暗舌患者(P<0.05);而紫暗舌患者的HRT明显减弱,与非紫暗舌患者有显著差异(P<0.05)。结论紫暗舌对心肌梗死患者的心血管预后可能具有一定的预测价值。 王铭 苗立夫 张瑞麟 刘云宝 陈连凤 雷燕关键词:紫暗舌 脑钠肽 心率震荡 心肌梗死 人参三七川芎提取物对增龄和高血压大鼠血管平滑肌细胞的影响 被引量:12 2012年 目的观察和比较增龄与高血压对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的影响及人参、三七、川芎提取物的干预作用。方法采用原代细胞培养的方法建立大鼠主动脉VSMCs模型,其中增龄实验分5组:青年对照组(Yon组)、老龄组(Old组)、老龄+普罗布考组(Old+Pro组)、老龄+中药低剂量组(Old+Low组)和老龄+中药高剂量组(Old+High组);高血压实验分5组:Wist-ar-Kyoto对照组(WKY组)、自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensiverat,SHR)组、SHR+缬沙坦组(SHR+Val组)、SHR+中药低剂量组(SHR+Low组)和SHR+中药高剂量组(SHR+High组)。采用MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达,RT-PCR和Western blot分别检测过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor-γ,PPAR-γ)mRNA和蛋白表达。结果与Yon组比较,Old组VSMCs增殖水平和MMP-9表达升高,PPAR-γmRNA和蛋白表达减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Old组比较,Old+Pro组、Old+High组和Old+Low组VSMCs增殖水平和MMP-9表达明显降低,PPAR-γmRNA表达明显增加(均P<0.05),Old+Pro组和Old+Low组PPAR-γ蛋白表达明显增加(均P<0.05)。与WKY组比较,SHR组VSMCs增殖水平和MMP-9表达明显升高,PPAR-γmRNA和蛋白表达明显减少(均P<0.05);与SHR组比较,SHR+Val组、SHR+High组和SHR+Low组VSMCs增殖水平和MMP-9表达明显降低,PPAR-γmRNA和蛋白表达增加(均P<0.05)。结论增龄和高血压均可造成大鼠主动脉VSMCs过度增殖及相关细胞活性因子的表达改变,中药人参、三七、川芎提取物能够降低其增殖水平,减少负性细胞因子的表达以降低增龄和高血压对VSMCs的损害,延缓血管细胞的老化。 雷燕 陶丽丽 王国利 王洋关键词:增龄 高血压 血管平滑肌细胞 过氧化物酶增殖物激活受体Γ