国家自然科学基金(30470256)
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
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- Xenorhabdus nematophila BP杀虫毒素基因的序列分析及其杀虫活性
- 2008年
- XnBP83是从Xenorhabdus nematophila BP基因组粘粒文库中筛选出的一个对棉铃虫有较强口服杀虫活性的克隆.采用亚克隆结合primer-walkingDNA测序技术对粘粒XnBP83的插入片段进行序列测定.该插入片段全长38939bp,其中包括5个与杀虫活性相关的tc类基因xptA1、xptB1、xptC1、xptA2、xptD1.序列分析显示:a.插入片段中的xptD1不完整,与X.nematophila PMFI296 XptD1相应氨基酸序列有99%的相似性.b.BPxptA1读码框全长7569bp,编码2520个氨基酸,与PMF1296的XptA1氨基酸序列有98%的相似性,两者在第2200~2223氨基酸区域连续有23个氨基酸不同.c.BPxptB1读码框全长3051bp,编码1016个氨基酸,与PMF1296XptB1氨基酸序列有98%的相似性,在第620~650氨基酸之间有28个氨基酸差异.d.BPxptC1读码框全长4225bp,编码1408个氨基酸,与PMF1296的XptC1氨基酸序列有96%的相似性.在BP的第232氨基酸后插入了一个TAQRYLAK的氨基酸序列,在第627~646氨基酸区域内,有18个氨基酸不同.e.BPxptA2读码框全长7574bp,编码2524个氨基酸,与PMF1296的XptA2氨基酸序列有90%的相似性,在BP品系XptA2的第788~855氨基酸和第1630~1784氨基酸有两个明显变异区.将XnBP83培养物上清和沉淀饲喂棉铃虫、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾和粉纹夜蛾,结果表明XnBP83对所测昆虫有广谱杀虫活性.
- 李梅邱礼鸿吴国锋刘常坤沈志华庞义
- 关键词:XENORHABDUS杀虫活性
- Xenorhabdus nematophila BP品系xpt B1基因的克隆和序列分析
- 2007年
- 采用PCR方法,从该室构建的Xenorhabdus nematophila BP品系粘粒文库的一个对棉铃虫有强口服杀虫活性的粘粒cos83中扩增出全长的xptB1基因,将扩增片段回收纯化后,连接到pMD-18T载体,转化大肠杆菌TG1后进行序列测定和分析。结果显示,该基因全长为3051bp,编码1016个氨基酸,其编码的毒素BP XptB1与X.nematophila PMF1296品系的XptB1的氨基酸序列同源性平均为95.8%,两侧高度一致,中间第607—738位差异明显。结构分析显示,两者在跨膜区,α螺旋等方面也有差异。BP XptB1与Photorhabdus luminescens的TccC毒素,Serratia entomophila的SepC,以及Yersinia pseudotubercusis和Y.pestis等的杀虫毒素均有58%以上的同源性。分析结果预示了XptB1可能是一个杀虫毒素。
- 李梅邱礼鸿庞义
- 关键词:XENORHABDUSBP克隆杀虫毒素