重庆市自然科学基金(CSTC2009BA5086)
- 作品数：11 被引量：92H指数：5
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- 利莫那班对局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠的保护作用被引量：5
- 2011年
- 目的探讨大麻素1(CB1)受体拮抗剂利莫那班对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型。36只雄性大鼠随机分为假手术组、手术组、尼莫地平对照组、利莫那班低剂量组、中剂量组和高剂量组。再灌注24 h后进行神经功能评分(NFS),TTC染色测定梗死面积,HE染色检测脑组织病理变化,免疫组化染色观察P-erk1/2和caspase-3免疫阳性表达,并检测大鼠脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)变化。结果利莫那班能明显改善大鼠的神经行为,缩小梗死面积,并使脑组织病理改变减轻,SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,下调caspase-3的表达,上调P-erk1/2的表达。结论利莫那班对局灶性脑缺血/再灌注大鼠有明显的保护作用,其机制可能与拮抗大麻素受体、抑制细胞凋亡有关。
- 乐乐乐董志
- 关键词：利莫那班丙二醛
- 丙泊酚衍生物cqmu-039对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其对胶质细胞的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察丙泊酚衍生物cqmu-039对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,探讨cqmu-039对脑缺血再灌注的保护机制。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、药物低、中、高(6、12、24 mg/kg)剂量组。模型组采用大脑中动脉栓塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)线栓法制备脑缺血模型,缺血2 h后再灌注24 h取脑;假手术组与模型组采用相同手术方法,不植入栓子,药物处理组系在脑缺血模型建立后立即腹腔注射给药。结果:与模型组相比,药物处理组能显著改善大鼠神经缺损症状,其行为学评分降低,脑梗死面积明显缩小,皮层、CA1区与CA3区治疗组大鼠胶质细胞源性神经营养因子(lial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)阳性细胞数量明显增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01);CA1区、CA3区及齿状回胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达明显减少。结论:丙泊酚衍生物cqmu-039能通过提高GDNF表达同时降低GFAP的表达从而明显改善大鼠脑缺血再灌注时的损伤。
- 张越董志肖晓秋
- 关键词：脑缺血再灌注胶质原纤维酸性蛋白胶质细胞源性神经营养因子
- β-石竹烯对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障的保护作用被引量：5
- 2016年
- 目的观察β-石竹烯在局灶性脑缺血再灌注损伤模型中对大鼠血脑屏障的影响。方法采用中动脉栓塞法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,分别设假手术组、模型组、β-石竹烯组(34、102、306 mg·kg^(-1))和尼莫地平(4 mg·kg^(-1))组。2,3,7-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定大鼠的脑梗死体积,伊文思蓝法观察大鼠血脑屏障通透性的改变。免疫组化法观察缺血核心区皮质水通道蛋白-4(AQP-4)的阳性表达。Western blot法检测缺血核心区claudin-5水平变化和occluding的表达。结果再灌24 h后,β-石竹烯组较模型组可不同程度地改善神经缺损症状,降低神经行为学评分,减小脑梗死体积,减少缺血侧EB含量,减少AQP-4的表达,增加claudin-5和occluding的表达(P<0.05,P<0.01)。结论β-石竹烯可通过减少AQP-4的表达,上调claudin-5和occluding的表达来减轻脑缺血再灌注所导致的脑水肿,降低血脑屏障损伤。
- 李然然董志曹光秀刘洁
- 关键词：脑缺血再灌注血脑屏障
- 小鼠早期营养过剩诱导子代肥胖动物模型的建立被引量：1
- 2013年
- 目的：观察小鼠早期营养过剩对子代肥胖的影响，为研究儿童肥胖机制提供实验基础。方法：通过减少哺乳期间幼鼠只数建立早期营养过剩动物模型即母代模型，实验组在子代出生第3天调整为3只，窝，对照组调整为10只／窝。母乳喂养21d后给予小鼠标准饲料喂养至第8周，与同龄正常雄性ICR小鼠交配，得早期营养过剩子代和正常小鼠子代，在小鼠出生第3天，均调整为10只／窝。每周测定子代体质量，母乳喂养21d后给予小鼠标准饲料喂养，并测定第23-29天进食量。在第30天处死小鼠．HE染色观察性腺周围白色脂肪组织形态。结果：第8周合笼时，早期营养过剩母代平均体质量为（40．75±0．89）g，正常母代平均体质量为（33．01±1．71）g（t=4．021，P=-0．007）。与正常小鼠子代相比，早期营养过剩小鼠的子代体质量增加[1（F=465．387，P=-0．000），进食量增加（t＝3．709，P=0．006），脂肪细胞体积增大（t＝4．487，P=0．001）。结论：小鼠早期营养过剩增加了子代肥胖的危险。
- 纪金金董志
- 关键词：子代肥胖
- 人二型大麻受体激动剂高通量筛选模型的建立被引量：4
- 2012年
- 目的:基于二型大麻受体(CB2)的信号传递通路,建立体外高通量筛选CB2受体激动剂的药物模型。方法:将目的基因质粒pIRES2-EGFP-CB2、报告基因质粒pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro]、内参质粒PRL-TK共转染CHO细胞,通过检测双荧光素酶报告基因的表达水平变化来筛选人CB2受体的激动剂。并对加入激动剂的浓度和作用时间进行优化及考察模型的稳定性。结果:给予10μmol/L JWH-015 6 h后能取得最大相对诱导率。成功建立CB2受体激动剂的高通量筛选模型,筛选模型Z'因子为0.81,表现为良好的稳定性。结论:成功地建立了CB2受体激动剂的筛选模型,为从中药中高通量筛选有效物质奠定了良好的基础。
- 刘媛董志肖晓秋唐红王乐乐程玉洁
- 关键词：CB2受体报告基因高通量筛选模型
- 苦参碱通过激动大麻素2型受体对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用被引量：5
- 2014年
- 目的探究苦参碱通过激动大麻素2型(CB2)受体对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用。方法采用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血(1.5 h)-再灌注(24 h)模型。72只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、苦参碱20 mg·kg-1组、苦参碱50 mg·kg-1组、选择性CB2受体拮抗剂AM630组和AM630+苦参碱50 mg·kg-1组。观察神经功能症状,检测梗死面积、脑组织形态学改变、凋亡细胞数、cleaved caspase-3及Bcl-2蛋白表达。结果与模型组相比,苦参碱20 mg·kg-1和50 mg·kg-1组大鼠神经功能显著改善,脑梗死体积缩小,病理形态学改变减轻,细胞凋亡数及cleaved caspase-3阳性细胞减少,Bcl-2阳性细胞显著增加(均P<0.05)。AM630+苦参碱50 mg·kg-1组大鼠上述改变均被AM630阻断,与苦参碱50 mg·kg-1组相比均有非常显著差异(P<0.01)。结论 CB2受体可能参与苦参碱对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用。
- 唐蜜董志蔡江晖饶梦琳何锦悦
- 关键词：苦参碱
- 芍药苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注脑血流量及PGI_2/TXA_2平衡的影响被引量：41
- 2014年
- 探讨芍药苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注脑血流量变化及PGI2/TXA2平衡的影响。取72只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、I/R模型组、芍药苷(10、20及40 mg·kg-1)处理组以及尼莫地平组。线栓法制作大鼠局灶性脑缺血(90 min)/再灌注(24 h)模型。观察芍药苷对神经功能缺损评分及梗死体积的影响,采用激光多普勒血流仪监测给药前后大鼠缺血侧局部脑血流量的动态变化,免疫组化法检测缺血侧海马CA1区COX-2的表达;ELISA法测血清中血栓素A2(TXA2)和前列腺素I2(PGI2)含量并计算PGI2/TXA2比值。结果表明,芍药苷处理组较I/R模型组能显著改善神经功能缺损症状,缩小梗死体积,增加缺血侧大脑局部血流量,抑制COX-2阳性表达,降低TXA2含量,提高PGI2含量及PGI2/TXA2比值。结果提示,芍药苷对局灶性缺血大脑产生神经保护作用的机制可能与其改善缺血侧大脑血流供应,调节PGI2/TXA2平衡有关。
- 饶梦琳唐蜜何锦悦董志
- 关键词：芍药苷激光多普勒血流仪前列腺素I2血栓素A2
- 人二型大麻受体基因的pIRES2-EGFP质粒的构建及其真核表达被引量：2
- 2012年
- 目的:构建含有人二型大麻素受体(CB2)基因的真核表达载体,并实现其在HEK293细胞的表达。方法:首先采用PCR方法从含有CB2基因的质粒pcDNA3.1(+)-CB2中扩增获得人的CB2基因,再采用基因重组技术将CB2的DNA片段插入真核表达载体pIRES2-EGFP。将获得的pIRES2-EGFP-CB2重组子转染HEK293细胞,应用荧光显微镜观察EGFP的表达情况,RT-PCR和报告基因检测CB2的表达情况。结果:酶切和测序结果验证真核表达载体pIRES2-EGFP-GB2构建成功。可在荧光显微镜下观察到转染HEK293细胞表达的绿色荧光;RT-PCR和双荧光素酶报告基因法检测证明CB2蛋白在真核细胞中成功表达;CB2受体激动剂JWH-015能显著逆转腺苷酸环化酶激动剂forskolin诱发的荧光素酶活性增加。结论:成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-CB2,为进一步研究CB2基因的生理学和病理生理学功能及调控机制奠定了实验基础。
- 刘嫒董志肖晓秋唐红王乐乐程玉洁
- 关键词：CB2受体转染报告基因
- 山奈酚对脑缺血再灌注大鼠神经元超微结构及TLR4/NF-κB的影响被引量：20
- 2015年
- 目的:观察山奈酚对脑缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)大鼠海马神经元超微结构的影响,研究其对TLR4(Tolllike receptor4,TLR4)/NF-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路的作用。方法:将120只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,山奈酚低、中、高剂量组(5,10,20 mg·kg-1)和尼莫地平组。线栓法制作大鼠中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,观察山奈酚对神经功能症状、脑梗死体积和HE染色后病理形态学的影响,并通过透射电镜观察海马CA1区神经元超微结构的变化,免疫组化SP法检测TLR4和NF-κBp65蛋白的表达,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素1-β(IL-1β)含量。结果:与假手术组相比,模型组神经功能症状和脑梗死体积明显,病理形态学和海马CA1区神经元超微结构显示神经元损伤严重,TLR4,NF-κBp65,TNF-α和IL-1β表达增多(P<0.01)。与模型组相比,尼莫地平组和山奈酚给药组能显著改善神经功能症状、脑梗死体积、病理形态学和海马CA1区神经元超微结构,减少TLR4和NF-κBp65的表达,降低TNF-α和IL-1β的含量(P<0.01)。结论:山奈酚局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用可能是通过调节TLR4/NF-κB通路表达。
- 向丽董志李然然曹光秀刘洁
- 关键词：山奈酚脑缺血再灌注超微结构NF-ΚB
- 芹菜素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后TLR4/NF-κB表达的影响及神经保护作用被引量：5
- 2015年
- 目的探究芹菜素对局灶性缺血再灌注后脑组织Toll样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)的表达和神经细胞凋亡的影响及神经保护作用。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血(90 min)再灌注(24 h)模型。将70只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组和芹菜素(10、25 mg·kg-1)组。观察芹菜素对神经功能缺损评分及梗死体积的影响,HE染色检测脑组织形态学改变,采用免疫组化法检测缺血核心区皮质和海马CA1区TLR4、NF-κBp65的表达,透射电镜观察缺血核心区皮质和海马CA1区神经元超微结构改变,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6浓度,TUNEL染色检测细胞凋亡。结果与模型组比较,芹菜素组能明显改善大鼠神经缺损症状,缩小梗死体积,减轻鼠脑病理形态学改变,减少TLR4、NF-κBp65阳性细胞表达,减少血清中TNF-α、IL-6的释放及细胞凋亡数(P<0.05,P<0.01)。结论芹菜素对局灶性缺血大脑能产生神经保护作用,降低神经细胞凋亡,其机制可能与抑制脑组织内TLR4、NF-κB表达有关。
- 封莎董志肖成燕李然然曹光秀
- 关键词：芹菜素脑缺血再灌注
