国家自然科学基金(39870242)
- 作品数：9 被引量：57H指数：6
- 相关作者：崔秀云陈俊霞傅攀峰田余祥潘东宁更多>>
- 相关机构：大连医科大学上海市肿瘤研究所大连市第三人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高表达人核糖核酸酶抑制因子的乳腺癌细胞株的建立及其鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的建立稳定高表达人核糖核酸酶抑制因子(hRI)的真核细胞系:乳腺癌细胞系,为进一步研究hRI抗肿瘤、抗氧化的作用机制奠定实验基础。方法将hRI通过逆转录病毒载体(pLNCX-hRI)经过病毒包装细胞(PA317)包装后的高滴度病毒上清,感染乳腺癌(MCF-7)细胞系,经G418筛选后,运用RT-PCR、Western blot等方法进行鉴定hRI在MCF-7中的高表达。结果hRI克隆到乳腺癌细胞(MCF-7)基因组,并随着基因组稳定高表达hRI。结论利用逆转录病毒载体感染真核细胞后获得高表达hRI的肿瘤细胞株,从而为进一步研究真核细胞内hRI的抗肿瘤作用机制提供条件。
- 樊建慧刘鹏崔秀云田余祥
- 关键词：人核糖核酸酶抑制因子逆转录病毒乳腺癌细胞
- 转染人核糖核酸酶抑制因子基因对B16黑色瘤细胞及肿瘤转移的影响(英文)被引量：12
- 2004年
- 人核糖核酸酶抑制因子 (humanribonucleaseinhibitor ,RI)是一种细胞质中分子质量为 5 0ku的酸性糖蛋白 .RI能抑制核糖核酸酶A (RNaseA)的活性 ,RNaseA与血管生成因子 (angiogenin ,Ang)的氨基酸有着高度保守的同源序列 .Ang是RNaseA超家族的一员 ,RI通过与RNaseA和Ang的紧密结合而抑制其活性 .血管生成及新血管的形成 ,是肿瘤发生和转移的必要条件 .所以抗血管生成将是一种很有希望的对抑制肿瘤生长和转移的有效方法 .实验显示RI能有效地抑制肿瘤诱导血管的生成 .RI由含有许多亮氨酸重复序列的多肽组成 .含有这样重复序列的 10 0多种蛋白质显示了广泛的功能 ,包括细胞周期调节 ,DNA修复 ,对细胞外基质相互作用以及抑制酶活性等 .RI被认为是胚胎发育 ,创伤愈合及肿瘤发生中新血管形成的一种调节因子 .RI定位于染色体的 11p15 5 ,与ras基因邻近 ,在肿瘤病人中经常存在染色体 11p15 5部位的变异和异常 .RI可能与细胞的生长和分化有关 ,因此 ,RI可能还具有尚未知的生物学作用 .为了进一步了解RI的潜在功能以及探讨RI与肿瘤侵润、转移的关系 ,将人的核糖核酸酶抑制因子基因的cDNA通过逆转录包装细胞PA317,并转染到B16小鼠黑色瘤细胞中 ,用转染空载体和未转染的B16细胞作为对照 .通过PCR ,RT PCR 。
- 陈俊霞田余祥傅攀峰夏俊阎平崔秀云
- 关键词：B16细胞核糖核酸酶抑制因子血管生成肿瘤转移
- 间接酶联免疫吸附试验测定恶性肿瘤血清中核糖核酸酶抑制因子表达的研究被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测核糖核酸酶抑制因子(RI)在恶性肿瘤患者血清中的表达。方法:建立检测血清RI含量的间接ELISA法,检测和比较正常人、恶性肿瘤患者(乳腺癌、胃癌、肺癌、肝癌)、乳腺良性肿瘤患者血清中RI的表达水平。结果:所建立的间接ELISA法特异性高;恶性肿瘤患者血清中RI表达均明显低于正常人(P<0.05),乳腺癌亦明显低于乳腺良性肿瘤(P<0.05)。结论:RI表达的降低可以作为肿瘤良、恶性鉴别的指标之一。
- 刘宇刘基巍崔秀云
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子间接酶联免疫吸附试验
- 抑癌基因、抑癌基因失活与杂合性丢失及甲基化研究进展被引量：6
- 2004年
- 癌症是由于原癌基因的激活及／或抑癌基因的缺失或灭活所致,根据Knudson的"二次突变"假说,抑癌基因的两个等位基因都失活才导致肿瘤的发生。最近一系列研究表明,启动子区5'端CpG岛的过度甲基化及等位位点的丢失是抑癌基因失活的主要机制,对抑癌基因的发现及其作用机制的深入研究,不但可揭示肿瘤发生、发展的机制,同时也为肿瘤诊断、治疗提供了最新策略和途径。
- 陈俊霞崔秀云
- 关键词：抑癌基因甲基化杂合性丢失CPG岛失活位点
- 核糖核酸酶抑制因子对四氯化碳诱发小鼠肝脏损伤的保护作用被引量：6
- 2003年
- 核糖核酸酶抑制因子(RI),是RNA酶的体内抑制剂,广泛存在于哺乳动物细胞内[1],RI分子中半胱氨酸的氧化还原状态,直接影响到其结合与抑制RNA酶的活性[2].根据以往的研究[3],试图证明核糖核酸酶抑制因子是否在体内具有抵抗过氧化损伤的作用,并试图阐明其抗氧化损伤的机制.
- 傅攀峰潘东宁王红崔秀云
- 关键词：核糖核酸酶类四氯化碳肝损伤
- 核糖核酸酶抑制因子对H_2O_2损伤的大鼠神经胶质瘤细胞系C6的影响被引量：16
- 2002年
- 核糖核酸酶抑制因子 (ribonucleaseinhibitor,RI)是广泛存在于哺乳动物细胞浆中的一种酸性糖蛋白 .为了进一步了解RI的功能 ,根据RI分子结构富含巯基的特点 ,研究了RI对过氧化氢(H2 O2 )损伤的大鼠神经胶质瘤细胞 (C6 )的影响 .用不同浓度的H2 O2 分别作用于转染有RIcDNA并且RI过表达的C6细胞和正常C6细胞 ,对比损伤前后 2者的细胞存活率、LDH漏出量、细胞内GSH和MDA含量差别 ,以及细胞内抗氧化酶类GPX、CAT和GST活性的差别 .结果表明 ,与正常C6细胞相比 ,RI过表达的C6细胞在H2 O2 作用下存活率高 ,LDH漏出量、MDA含量明显减少 ,而细胞内GSH较多 ;RI过表达的C6细胞在损伤前后均表现出更强的CAT和GST活性 .提示RI具有抗氧化功能 ,能够减轻H2 O2 所致的细胞过氧化损伤 .
- 潘东宁傅攀峰王红崔秀云
- 关键词：过氧化氢抗氧化活性核糖核酸酶抑制因子H2O2损伤
- DNA甲基化抑制剂对肿瘤细胞中核糖核酸酶抑制因子表达下调的影响(英文)被引量：10
- 2004年
- 背景与目的:人核糖核酸酶抑制因子(ribonucleaseinhibitor,RI)RI能有效抑制血管生成因子诱导的血管形成及某些可移植性实体瘤在动物体内的生长。然而,RI抗肿瘤的分子机制还未完全阐明。许多抑癌基因通过启动子区域异常的甲基化而使表达缺失,去甲基化抑制能使其表达恢复。为了进一步了解RI的功能以及探讨RI与肿瘤发生的关系,本实验拟研究甲基化抑制剂5-aza-2'-deoxycytidine(5-Aza-CdR)对肿瘤细胞中RI表达的影响。方法:用5-Aza-CdR作用人乳腺癌细胞系MCF-7、人胃癌细胞系BGC-823、人的前列腺癌细胞系DU-145和人结肠癌细胞系HT-29。通过RT-PCR,蛋白免疫印迹法(Westernblot),免疫荧光(immunofluorescence)和免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术分析RI基因的表达。结果:与对照组比较,5-Aza-CdR能显著提高RI基因在MCF-7、BGC-823和DU-145细胞中的表达,RT-PCR检测结果分别为37.2%、46.0%和32.4%,Westernblot检测结果分别为26.4%、20.9%和24.4%(P<0.01);但对HT-29细胞没有明显的影响。结论:RI基因可能与胃癌、前列腺癌和乳腺癌的发生有关。
- 陈俊霞傅攀峰王艇崔秀云
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子肿瘤基因表达
- 抗核糖核酸酶抑制因子抗体的制备与纯化被引量：9
- 2004年
- 目的 :制备并纯化抗核糖核酸酶抑制因子 (RI)的抗体。方法 :从人胎盘中提取RI,经亲和层析纯化后免疫家兔制备RI抗体。用rProteinASepharoseFastFlow层析对抗RI抗体进行纯化 ,并用SDS PAGE、ELISA及Westernblot等进行鉴定。结果 :制备并纯化了抗RI抗体 ,经SDS PAGE分析达到了电泳纯。结论 :获得了效价高、特异性强、稳定性好的抗RI抗体 。
- 舒晓宏李传刚张海涛陈俊霞田余祥于丽华崔秀云
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子抗体纯化
- 核糖核酸酶抑制因子对H_2O_2所致的细胞过氧化损伤的保护作用被引量：4
- 2005年
- 背景与目的:核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)是广泛存在于哺乳动物细胞质中的一种酸性糖蛋白,根据RI分子组成富含巯基的特点,研究其对过氧化氢(H2O2)损伤的小鼠黑色素瘤B16细胞的影响。 材料与方法:用不同浓度的H2O2分别作用于B16细胞及转染有RI cDNA并且RI过表达的B16细胞,对比损伤前后两者的细胞存活率、LDH漏出量和细胞内MDA含量差别、以及细胞内抗氧化酶类GSHPx、SOD、cAT、XOD活性的差别。结果:与B16细胞相比,RI过表达的B16细胞在H2O2作用下存活率高,LDH漏出量、MDA含量明显减少,细胞内GSHPx、SOD、CAT活性下降幅度减小。结论:RI具有抗氧化功能,能够减轻H2O2所致的细胞过氧化损伤。
- 夏俊阎平陈俊霞赵鹏崔秀云
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子过氧化氢抗氧化活性
