国家自然科学基金(30800016)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：黄远帅张雪梅张群陈倩钟文更多>>
- 相关机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺炎链球菌SpxA蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备
- 2011年
- 目的 构建肺炎链球菌SpxA蛋白的原核表达系统,制备其多克隆抗体.方法 设计引物,利用PCR技术扩增肺炎链球菌D39菌株的spxA基因,并插入表达载体pET-28a（＋）内,测序鉴定.重组质粒转化至大肠埃希菌BL21（DE3）中,以IPTG诱导表达含6个组氨酸标签的SpxA重组蛋白,经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,以其为抗原免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体.用ELISA及Western印迹方法分别检测多克隆抗体的效价及特异性.结果 从大肠埃希菌中诱导出高表达的SpxA重组蛋白,纯化后免疫小鼠获得抗血清,ELISA测定其效价可达1：2 560 000以上,Western印迹结果显示其能特异性地作用于肺炎链球菌SpxA.结论 成功构建了pET-28a（＋）-spxA原核表达质粒,获得了高纯度的目的 蛋白和高滴度、高特异性的多克隆抗体.
- 陈倩钟文张群黄远帅张雪梅
- 关键词：肺炎链球菌多克隆抗体
- 环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测淋球菌porA基因和16SrRNA基因
- 目的:建立检测淋球菌porA基因和16S rRNA基因的环介导等温扩增技术,探讨其在淋球菌感染早期诊断中的应用。方法:利用Primer-Explorer V3软件分别针对淋球菌porA及16S rRNA基因设计六条引物(...
- 崔亚利刘鑫胥文春刘明芳龚艺贺潇王虹何於娟
- 关键词：淋球菌16SRRNA基因PCR
- 文献传递
