重庆市自然科学基金(CSTC2009BA5039)
- 作品数：2 被引量：11H指数：1
- 相关作者：周玮熊正爱李成祥姚陈果刘颖更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院重庆大学河南大学更多>>
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- 不可逆性电穿孔致HeLa细胞凋亡与坏死的作用研究被引量：11
- 2010年
- 目的探讨脉冲电场不可逆性电穿孔处理HeLa细胞时,发生细胞膜电穿孔、细胞凋亡、细胞坏死与脉冲电场参数的关系。方法采用固定脉宽100μs、频率1Hz、脉冲数8个,电场强度由250V/cm逐级升至2500V/cm的脉冲电场处理HeLa细胞。利用PI示踪、流式细胞术检测研究HeLa细胞膜发生穿孔的阈值电场剂量;CCK-8(cellcountingkit-8,CCK-8)法检测脉冲电场处理HeLa细胞的量效关系;Annexin Vkit染色、流式细胞术检测各组细胞的凋亡与坏死。结果 HeLa细胞膜发生可逆性穿孔的阈值场强为750V/cm,发生凋亡的阈值电压为1250～1500V/cm,坏死的阈值为1750V/cm。结论不可逆性电穿孔杀灭HeLa细胞时细胞凋亡也发挥着重要作用,而且导致凋亡与坏死的电场范围相互重叠。
- 周玮熊正爱刘颖李成祥姚陈果
- 关键词：脉冲电场HELA细胞电穿孔凋亡
- 脉冲电场联合野生型p53基因诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡
- 2011年
- 背景:在前期研究基础上,设想将基因电转染作为脉冲电场治疗恶性肿瘤的辅助方法。目的:探讨脉冲电场联合抑癌基因野生型p53基因诱导人宫颈癌hela细胞发生凋亡及相互作用。方法:采用空质粒及含有野生型p53的质粒转染Hela细胞得到Hela-vector、Hela-p53细胞,将Hela细胞、Hela-vector和Hela-p53细胞分别施加固定脉宽100μs、频率1Hz、脉冲数8个、电场强度为1500V/cm的脉冲电场处理。结果与结论:相同参数脉冲电场作用于各组细胞12h后,MTT结果显示Hela-p53组细胞吸光度明显低于Hela组(P<0.05);流式细胞仪及RT-PCR检测结果显示Hela-p53组的早期凋亡率和p53mRNA表达较Hela组明显增加;Westernbolt及激光共聚焦显微镜结果显示与Hela组比较,Hela-p53组细胞Bax蛋白表达明显上升,而Bcl-2蛋白则明显下降,Casepase-3相对荧光强度明显增强。表明野生型p53基因对宫颈癌Hela细胞生长有明显的抑制作用,野生型p53基因可以提高脉冲电场诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的作用。
- 李好山熊正爱周玮李成祥姚陈果孙才新
- 关键词：脉冲电场HELA细胞野生型P53基因凋亡
