国家重点基础研究发展计划(2011CB200901)
- 作品数：22 被引量：103H指数：5
- 相关作者：潘克厚朱葆华杨官品胡晗华张琳更多>>
- 相关机构：中国海洋大学中国科学院华南理工大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 葡萄藻中烷烃化合物的GC-MS分析条件比较
- 2014年
- 通过单因素分析,对不同溶剂、温度和时间条件下提取葡萄藻微量藻粉中碳氢化合物的效果进行了比较,获得了最佳提取条件为:40 mg藻粉悬浮于正己烷中,超声处理(35℃,70 Hz)半小时后再于35℃下提取10 h,碳氢化合物得率最高,占藻粉干重的2.95‰。比较获得了GC-MS分析的程序升温优化条件,发现处于对数期的葡萄藻微量冻干藻粉中含量最高的碳氢化合物都是C22-C31长链烷烃,其组成与含量分别为:二十二烷(50.40μg/g)、二十四烷(209.17μg/g)、二十五烷(351.45μg/g)、9-辛基十七烷(472.38μg/g)、二十七烷(540.48μg/g)、二十八烷(542.24μg/g)、角鲨烯(473.60μg/g)、正三十一烷(306.86μg/g)。该提取和分析过程具有样品量少、时间短、得率高和操作简单的优点,可作为葡萄藻碳氢化合物分析检测的一种快速高效途径。
- 魏东熊爽
- 关键词：葡萄藻碳氢化合物
- 微藻的异养培养及应用研究被引量：12
- 2012年
- 微藻（microalgae）是一大类微观的以个体、链状或群体形式存在的单细胞藻类，大小从几微米到几百微米不等。微藻种类繁多，据估计大约有200000～800000种，其中已有记录的有35000多种。自20世纪60年代起，日本首先开始进行商业化大规模的微藻培养，至今人们已经能够在保健食品、医药原料、美容、饲料等多种领域实现微藻的商业化生产。目前，微藻的大规模商业化培养主要限于在光生物反应器中进行，具有占地面积大、生产周期长、藻类生长密度较低等缺陷，
- 张帆韩笑天李岿然冀晓青
- 关键词：异养培养单细胞藻类光生物反应器医药原料
- 培养基限氮和添加钨酸钠对微拟球藻脂肪酸组成的影响被引量：5
- 2011年
- 微藻的脂肪酸组成与环境条件密切相关。选取微拟球藻(Nannochloropsis oculata)为对象,比较研究了对培养基限氮和添加钨酸钠时,其脂肪酸组成的变化。结果表明:培养基限氮时,16:0、16:1、和18:1占总脂肪酸的比例均显著提高,其中16:0和18:1均在限制96h达到最高值,分别提高了24.77%和95.27%,而20:4和20:5则显著降低。添加钨酸钠培养时,16:0、16:1、和18:1占总脂肪酸的比例均显著提高。在钨酸钠浓度为0.1mmol/L时,与对照组相比,18:1含量提高了1.13倍。该结果与培养基限氮培养时一致。因此,添加钨酸钠可实现氮限制。本研究旨在通过改变培养条件,探索微藻生物量积累后富集油脂的可能性,为微藻生物柴油大规模生产提供理论基础。
- 沈雄焦媛媛朱葆华杨官品潘克厚
- 关键词：脂肪酸组成钨酸钠硝酸还原酶
- 微拟球藻属对盐度的耐受及其产油特性分析被引量：11
- 2013年
- 微拟球藻（Nannochloropsis）是一类属于真眼点藻纲（Eustigmatophyceae）、球形或近似球形的单细胞真核生物,其细胞小（通常2—4μm）,形态简单,仅凭形态学和超微结构的特点很难确定其分类地位。然而,与其他真核微藻显著不同的是,该属的种类除叶绿素a外,并不含有其他类型的叶绿素[1]。
- 黄伟超胡晗华
- 关键词：生物柴油
- 微拟球藻原生质体制备与再生被引量：3
- 2012年
- 综合考虑酶混合液处理时间和初始细胞密度两个因素,选取终浓度为4%半纤维素酶和2%崩溃酶的酶混合液对一株海洋经济微藻——微拟球藻(Nannochloropsis oculata)进行原生质体的制备与再生,Calcofluor White染料染色可在荧光显微镜下观察到完整的原生质体细胞。实验结果表明:同一初始密度藻细胞酶处理1～3 h制备率较高;酶处理相同时间较高初始密度(2×107～3×107cells/mL)的藻细胞制备率较高,并且原生质体在再生培养基上可再生,生长趋势与野生型细胞一致。考虑到酶处理时间过长或者密度过大会对原生质体的再生产生影响,本实验选择最适酶处理时间为1h,初始细胞密度为2×107cells/mL。
- 马晓磊张琳杨官品朱葆华潘克厚
- 关键词：原生质体CALCOFLUORWHITESTAINING
- 过表达三角褐指藻苹果酸酶基因提高E.coli脂肪酸合成能力研究被引量：2
- 2016年
- 为验证三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)苹果酸酶基因的功能,本研究将PtME1插入pET-30a中得到重组质粒pET30a-PtME1。IPTG诱导后,携带pET30a-PtME1的大肠杆菌BL21(DE3)高效表达一分子量约为72kDa的可溶性重组蛋白。重组蛋白经Ni SephroseTM6Fast Flow系统纯化,酶活力达75.18U/mg。GC-MS分析显示表达PtME1提高了大肠杆菌脂肪酸合成能力,其C14∶0、C16∶0、C18∶1及总脂肪酸含量较对照分别提高了34.8%、69.9%、54.2%和50.2%,C16∶1产量是对照的5.6倍。研究结果表明,NADP依赖型苹果酸酶能为大肠杆菌脂肪酸合成及脂肪酸去饱和提供充足的NADPH,为进一步研究该酶在藻体内的功能奠定了基础。
- 吕娜娜朱葆华鹿琳杨官品潘克厚
- 关键词：三角褐指藻苹果酸酶脂肪酸原核表达
- 不同氮源及CO_2浓度下湖泊微拟球藻的生长及产油特性分析被引量：3
- 2015年
- 工业生产排放的各种废气与污水污染人类赖以生存的环境。化石燃料燃烧除排放出大量CO2外,还释放出含有粉尘、SO[x和NOx等直接危害人类健康的有毒成分1]。其中NO]x与水结合后最终会转化成硝酸盐或亚硝酸盐等[2,导致污水中的含氮化合物氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮和有机氮的含量通常偏高。如何有效去除污水中的氮是防治水体污染最关键的步骤之一,而利用微藻培养去除水体中的氮源是目前研究的热点。
- 李凤娟万秀方仙桃胡锐高大文胡晗华
- 关键词：生物柴油氮利用
- 丛粒藻细胞的透射电镜观察和rbcL、18S rRNA序列分析被引量：1
- 2014年
- 采用透射电镜对丛粒藻(Botryococcus braunii)藻株AGB-Bb02和AGB-Bb03进行了亚显微结构观察,以rbcL和18S rRNA序列为目标基因进行克隆,结合研究从GenBank获取的黄藻纲、绿藻纲和共球藻纲13株相关微藻的rbcL、18S rRNA基因序列,运用Clustal X 1.8和MEGA4.0软件进行分析,用邻接法构建了系统发育树,并计算bootstrap值以评估其可靠性。结果显示,丛粒藻细胞由多层细胞壁包被,细胞内壁和外壁的腔隙中含有烃类物质,独特而发达的内质网膜系统与细胞质膜部分相连,叶绿体基质类囊体平行紧贴、无基粒结构,脂滴的分布与内质网和叶绿体相关;AGB-Bb02和AGB-Bb03的rbcL和18S rRNA序列存在差异,系统发育树显示丛粒藻藻株与共球藻纲的微藻聚成一个单系群,并获得bootstrap值的高度支持。研究表明,丛粒藻烃类主要储存于细胞外壁中,内质网的产物可经由膜连接直接输送至邻近的细胞质膜,再分泌到细胞壁中存储;丛粒藻的分类学地位应归属共球藻纲。
- 王朋云
- 关键词：亚显微结构RBCLRRNA
- 高产油小球藻的筛选及其油脂分析被引量：27
- 2012年
- 小球藻广泛分布于各种生境,特别是淡水环境中,适应性强。其同化产物主要是淀粉,但在环境胁迫条件下可显著积累中性脂,其脂肪酸类型主要为C16和C18,适合作为生物柴油的原料。我们从中国部分地区水体中分离纯化到若干株小球藻,通过薄层层析比较分析了21株产油小球藻的油脂含量,筛选到一株三酰基甘油含量较高的藻株Chlorella sp.NMX37N。其适宜生长温区为15—35℃,在25℃时生长速率最快,比生长速率为0.53/d,生长的最适光强为250μmol photons/(m2.s)。批量培养实验显示,藻细胞的三酰基甘油含量随培养时间延长而增加,并在培养的稳定期达到最大值,此时培养液中氮基本被耗尽。在批量培养条件下培养Chlorella sp.NMX37N约40d,藻细胞中总脂含量可达到33%左右,与此相比通过两步培养方式,将培养至对数后期(约20d)的藻细胞缺氮处理48h后,得到的总脂产率相当。通过两步培养方式可以大大缩短培养时间,使得该藻细胞快速有效积累油脂。另外,气相色谱分析显示,该藻的总脂和三酰基甘油的脂肪酸均以C16∶0和C18∶2为主,占总脂肪酸的70%以上,且不含C20以上的长链脂肪酸,可以作为优质的生物柴油原料。
- 徐进徐旭东方仙桃胡晗华
- 关键词：小球藻脂肪酸生物柴油
- 微拟球藻富油藻株筛选及柱状光生物反应器培养评价研究被引量：5
- 2017年
- 研究以亲脂性荧光染料BODIPY505/515和流式细胞仪为基础,从多株诱变海洋微拟球藻(Nannochloropsis oceanica)中筛选到4株候选富油藻株(MT-1,2,3,4),并利用柱状光生物反应器对诱变株的产油能力进行了综合评价。结果表明,藻株筛选时最佳BODIPY505/515使用浓度为0.87μg/m L,染色时间为10min;4株诱变株产油性能较野生株有较大提高,其中MT-4油脂积累达到了干重的66%,油脂产率比野生型藻株提高了45%,达到了27.32 mg/(L·d)。4株诱变株的脂肪酸组成合适,其中C16和C18之和占78%以上,且主要以饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸为主;多不饱和脂肪酸只占总脂肪酸的6%—8%,非常适合生物柴油生产。研究提供了一种针对海洋微拟球藻富油藻株快速、有效的筛选方法,并以此为基础筛选得到4株极具生物柴油生产潜力的候选藻株,有望用于规模化生产。
- 何文栋朱葆华冯磊力常雅青杨官品潘克厚
- 关键词：生物柴油诱变筛选
