上海市卫生局科研基金(2007180)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
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- 氟浓度对体外培养大鼠软骨细胞糖胺多糖和Ⅱ型胶原分泌的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨氟浓度对体外培养软骨细胞糖胺多糖（GAG）和Ⅱ型胶原分泌的影响.方法 取2月龄雌性SD大鼠下肢髋关节及膝关节软骨,分离、培养出软骨细胞后,接种于细胞培养瓶,经鉴定后,分为空白对照组和NaF受试组（6.25 μmol/ml、12.50μmol/ml、25.00 tmol/ml、50.00 μmol/ml和100.00 μmol/ml）,孵育6d后,分别进行GAG含量测定、阿利新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色.结果 NaF受试6d后,大鼠软骨细胞培养液GAG含量各组无显著性差异（P＞0.05）;阿利新蓝染色显示,大鼠软骨细胞内的糖原异染颗粒亦无明显差异;Ⅱ型胶原免疫组化染色则显示,不同剂量NaF可引起对软骨细胞外Ⅱ型胶原染色积分随剂量的升高逐渐上升（P＜0.05）.结论 NaF对大鼠软骨细胞GAG分泌可能无影响,但可能影响Ⅱ型胶原的分泌.
- 范玉兰王宁施志冲郑卫东卢伟肖萍
- 关键词：氟化钠软骨细胞糖胺多糖
- 过量氟对体外培养大鼠软骨细胞的作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨过量氟对体外培养软骨细胞糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)和胶原分泌的影响。方法取2月龄大鼠下肢髋关节及膝关节软骨分离、培养出软骨细胞后,接种于细胞培养瓶,分空白对照组和NaF受试组(6.25μmol/ml、12.5μmol/ml、25μmol/ml、50μmol/ml和100μmol/ml),孵育6 d后,分别进行GAG含量测定、阿利新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果 NaF受试6 d后,大鼠软骨细胞培养液GAG含量各组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。阿利新蓝染色显示NaF处理大鼠软骨细胞后,细胞内GAG分泌颗粒无明显差异;Ⅱ型胶原免疫组化染色则显示,过量氟可引起软骨细胞外Ⅱ型胶原的分泌增多,半定量分析显示随着剂量升高,软骨细胞外Ⅱ型胶原的分泌逐渐增多。结论 NaF对大鼠软骨细胞GAG分泌无影响,但可引起Ⅱ型胶原分泌增多,有一定的剂量-反应关系。
- 王宁范玉兰董妙珠施志冲郑卫东肖萍
- 关键词：氟化钠软骨细胞糖胺多糖
- 氟化钠对大鼠软骨细胞活性的影响及DNA损伤作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨氟化钠(NaF)对体外大鼠软骨细胞活性及DNA损伤作用的影响。方法自2月龄SPF级雌性SpragueDawley大鼠制取膝关节软骨细胞悬液。取对数生长期细胞(细胞密度为2×105个/孔),用含NaF终浓度为0(阴性对照)、0.1、1.0、10.0、20.0、40.0mmol/L的培养基分别处理2、4、8、24h,同时设立空白对照(DMEM/F12)组,采用MTT法检测细胞活性。根据MTT检测的结果,取对数生长期细胞(细胞密度为2×105个/孔),用0(阴性对照)、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mmol/LNaF染毒4h,阳性对照组在紫外灯下照射10min。用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测细胞DNA的损伤情况。结果与阴性对照组比较,染毒2h后20.0、40.0mmol/LNaF染毒组和染毒4、8、24h后10.0、20.0、40.0mmol/LNaF染毒组大鼠软骨细胞的细胞活性均下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与阴性对照组相比,各浓度NaF染毒组大鼠软骨细胞DNA损伤率均较高,差异有统计学意义(P<0.01)。且随着NaF染毒浓度的升高,大鼠软骨细胞DNA损伤率呈升高趋势。与阴性对照组相比,1.0～10.0mmol/LNaF染毒组大鼠软骨细胞尾长、Olive尾矩和彗星矩较高,差异有统计学意义(P<0.01)。且随着NaF染毒浓度的升高,大鼠软骨细胞尾长、Olive尾矩和彗星矩均呈上升趋势。结论在体外培养条件下,NaF能明显抑制大鼠软骨细胞的增殖,其作用机制可能与DNA损伤有关。
- 王宁王俐张慧君孙静秋郑卫东肖萍
- 关键词：氟化钠软骨细胞彗星试验DNA损伤
