国家自然科学基金(81273591)
- 作品数：19 被引量：76H指数：5
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- 人红细胞内核苷二磷酸激酶的酶学特性及动力学研究
- 2018年
- 目的:探讨人红细胞(RBC)内核苷二磷酸激酶(NDPK)的酶学动力学特性。方法:利用NDPK催化反应底物二磷酸脱氧腺苷、三磷酸脱氧鸟苷生成三磷酸脱氧腺苷及二磷酸脱氧鸟苷(dADP+dGTP?dATP+dGDP)的酶促反应,通过改变反应温度、热处理温度、pH条件、底物浓度及抑制剂浓度进行NDPK酶学动力学研究。结果:底物动力学研究中,Linewever-Burk双倒数图为两组平行直线。产物抑制动力学研究中,固定反应底物dGTP浓度并改变dADP浓度时,dATP表现为非竞争性抑制作用,固定反应底物dADP浓度并改变dGTP浓度时,dATP表现为竞争性抑制作用。反应遵循乒乓机制。文中实验条件下,NDPK酶促反应最大速度V_(max)约为110μmol·min^(-1)·g^(-1),K_m^(dADP)=1.26 mmol·L^(-1),K_m^(dGTP)=1.94 mmol·L^(-1)。dATP抑制常数K_i约为0.34~0.67 mmol·L^(-1)。结论:NDPK为酶促反应dADP+dGT dAPT+dGDP的一种高亲和性催化酶。
- 杨春晓师少军沈如飞周嘉黎罗小梅张玉刘亚妮
- 关键词：人红细胞核苷二磷酸激酶药物不良反应
- RAC1基因遗传多态性研究进展被引量：2
- 2014年
- Ras相关的C3肉毒素底物1(ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)是Rho GTP酶超家族里Rac亚家族中的一员,是细胞内重要的信号转导分子,参与众多的生理活动并其重要的调控作用。机体内RAC1基因被激活的水平具有个体差异性,因而研究体内RAC1基因的表达水平及其对某种疾病的易感性或者对某类药物的反应具有重要意义。研究RAC1基因的多态性有助于从序列信息预测蛋白质结构,进而理解蛋白质功能,从而能在基因水平上预测疾病发展和实施个体化医疗。本文将就RAC1基因突变及其上单核苷酸多态性与疾病的联系方面介绍相关研究进展。
- 周嘉黎张玉师少军
- 关键词：RAC1RHOGTP酶遗传多态性单核苷酸多态性肿瘤
- 湖北汉族健康人群肿瘤转移抑制基因Nm23基因多态性的测定及分布被引量：2
- 2015年
- 目的:建立Nm23基因上10个单核苷酸多态性位点基因型的检测方法,并探讨这些位点在湖北武汉地区健康汉族人群中基因型分布特点,为研究Nm23基因多态性与相关疾病或药物不良反应关联性提供依据。方法:随机选取武汉地区健康体检人群200例,其中男性115例,女性85例。采用实时荧光Taq Man-MGB探针等位基因分型技术进行Nm23基因启动子及内含子区域共10个单核苷酸位点多态性检测。并采用分片段扩增直接测序方法对上述位点进行抽样验证。结果:建立的方法能够准确、快速地对Nm23基因单核苷酸多态性位点进行分型检测。所选Nm23基因上10个位点在湖北汉族人群中分布同国内其他地区研究及Hap Map数据库中北京地区汉族人群相近。且均符合Hardy-weinberg平衡,其中rs16949649与rs7207370、rs34214448,rs2159359与rs2302254、rs8075231、rs2041296、rs8071647位点间高度连锁不平衡,并运用Heploview软件筛选出4个Tag SNPs:rs34214448、rs2302254、rs11868380、rs2318785。结论:试验中建立的基因型测定方法可满足Nm23基因遗传多态性研究的需要,在Nm23基因多态性与相关疾病及药物不良反应关联性研究中可能具有重要应用价值。
- 杨春晓刘亚妮沈如飞周嘉黎罗小梅张玉师少军
- 关键词：NM23基因多态性
- 湖北地区器官移植人群Nm23基因多态性被引量：1
- 2014年
- 目的:研究Nm23基因10个单核苷酸多态性(SNP)位点在服用免疫抑制剂的器官移植患者中的分布特点。方法:以器官移植患者200例(男150例,女50例)为研究对象,并以同期体检的200例健康人(男150例,女50例)为正常对照。采用实时荧光TaqMan-MGB探针等位基因分型技术进行Nm23基因启动子及内含子区域共10个SNP位点多态性检测,并采用分片段扩增直接测序方法对上述位点进行抽样验证。结果:所选Nm23基因的10个SNP位点分布均符合Hardy-Weinberg平衡,通过连锁不平衡分析选择rs2302254、rs34214448、rs11868380、rs2318785作为标签SNP位点。rs2302254、rs34214448、rs11868380、rs2318785的基因型频率和等位基因频率在器官移植组和正常对照组的分布无明显差异(P>0.05)。分析不同性别、不同年龄层器官移植患者的Nm23基因多态性,其分布亦无显著性差异(P>0.05)。结论:器官移植人群的Nm23基因多态性与健康人群比较无显著差异,器官移植人群不同性别、年龄层间的基因多态性分布亦无显著差异,需进一步分析蛋白表达水平及活性差异,为研究Nm23基因多态性与硫唑嘌呤等免疫抑制剂的疗效、不良反应关联性提供依据。
- 沈如飞段铱杨春晓周嘉黎罗小梅刘亚妮张玉师少军
- 关键词：NM23单核苷酸多态性器官移植
- 中国湖北地区健康人群RAC1基因多态性的测定与分析被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨人RAC1基因上8个单核苷酸多态性位点的基因型在中国湖北地区汉族健康人群中的分布情况,为进一步研究RAC1基因多态性与相关疾病及药物反应性之间的关系做铺垫。方法:采用实时荧光TaqMan-MGB探针等位基因分型技术测定150例湖北地区健康志愿者的RAC1基因上8个单核苷酸多态性位点的基因型,并采用分片段扩增直接测序方法对上述位点进行抽样验证。结果:所选8个位点均符合Hardy-weinberg平衡,其中rs10951982与rs9374,rs702482与rs836488位点间高度连锁不平衡,并运用Heploview软件筛选出6个Tag-SNPs:rs10951982、rs6954996、rs6951997、rs12977、rs702482、rs702483。本研究建立的方法能够准确地测定人RAC1基因上的SNP位点的基因分型,所选的人RAC1基因上8个SNP位点在中国湖北地区人群中的最小等位基因频率与Hap Map数据库中北京地区汉族人群、亚洲人群相近,但亦观察到了人种之间的分布差异。结论:所测RAC1基因上8个位点的频率分布在本研究中的湖北人群中未观察到统计学差异,但是与已有数据库中其他人种的MAF比较有较大差异性。
- 周嘉黎刘亚妮沈如飞杨春晓罗小梅张玉师少军
- 关键词：RAC1单核苷酸多态性基因测序
- 基因生物学功能分析与应用研究进展被引量：6
- 2014年
- 随着分子生物学的飞速发展,人们对基因有了更加深刻的认识。在大量测序工作完成后,如何研究这些基因的生物学功能成为一个重要问题。现今的研究方法包括生物信息学分析及基因转导、反义技术、基因组编辑等实验方法,这些研究在疾病预防和治疗中发挥重要作用。
- 罗小梅张玉师少军
- 关键词：基因生物学功能
- 健康汉族人群Nm23基因多态性对其mRNA表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨中国湖北地区汉族健康人群Nm23基因单核苷酸多态性(SNPs)(rs2302254、rs2318785、rs11868380及rs34214448)与mRNA表达量的关系。方法:收集200例中国湖北地区汉族健康体检人群的血液样本,采用实时荧光TaqMan-MGB探针等位基因分型技术进行多态性检测和实时荧光定量PCR技术进行mRNA相对表达量测定。应用非参检验方法评估基因型与mRNA相对表达量的关系。结果:rs2302254位点CC基因型者Nm23 mRNA表达量显著低于TT及CT基因型者(P=0.000);rs2318785位点AA基因型者Nm23 mRNA表达量显著低于GG及GA基因型(P=0.000);rs34214448位点GG基因型者Nm23 mRNA表达量显著低于TT及GT基因型者(P=0.000)。本研究并未发现rs11868380位点多态性与基因表达量间的联系(P=0.140)。结论:Nm23基因rs2302254、rs2318785及rs34214448单核苷酸多态性会影响mRNA相对表达量。
- 罗小梅周嘉黎杨春晓刘亚妮沈如飞杨婷玉张玉师少军
- 关键词：NM23单核苷酸多态性基因多态性MRNA
- LC-MS/MS法测定人血浆中左舒必利含量的不确定度评定被引量：9
- 2016年
- 目的:评定LC-MS/MS法测定人血浆中左舒必利含量的不确定度。方法:对测定过程中不确定度的来源进行分析评定,包括称量、纯度、仪器误差、标准溶液的配制、含药血浆样本的配制、标准曲线拟合、重复性、血浆样本的处理等,分析各分量的不确定度与合成不确定度,最终计算扩展不确定度。结果:人血浆中低(9.0 ng·ml^(-1))、中(150.0 ng·ml^(-1))、高(3 200.0 ng·ml^(-1))3个浓度的扩展不确定度分别为2.46,10.42,173.77 ng·ml^(-1)(k=2,P=95%)。结论:LC-MS/MS法测定人血浆中左舒必利含量的不确定度主要由血浆样本的处理,仪器误差、标准溶液的配制及标准曲线拟合(低浓度)引入。
- 黄怡菲马林黎维勇师少军刘亚妮
- 关键词：不确定度血药浓度液质联用法
- SNP基因分型检测技术及应用进展被引量：11
- 2013年
- 单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）是人类最普遍的遗传变异形式之一,指在基因组水平上由单个核苷酸变异所引起的DNA序列多态性。SNP即指在种群中发生在给定的遗传区域内且频率最小为1%的核苷酸变异。SNP广泛存在于人类基因组中,平均每500到1000个碱基对中就有1个,目前发现其总数已达3700万。随着人类后基因组时代的开始,
- 杨春晓张玉师少军
- 关键词：单核苷酸多态性基因分型
- RAC1基因多态性对其mRNA转录和表达的影响
- 2015年
- 目的:探讨RAC1基因上4个单核苷酸多态性(SNPs)对其mRNA转录和表达的影响,为进一步研究RAC1基因多态性与相关疾病及药物反应性之间的关系做铺垫。方法:实时荧光TaqMan-MGB探针等位基因分型技术被用来测定242例湖北地区健康志愿者的RAC1基因上4个SNPs位点的基因型,同时采用Trizol法提取总mRNA并用RTQ-PCR进行定量分析。结果:本研究所选4个SNPs位点均符合Hardy-Weinberg平衡,且各SNP位点相互独立。4个SNPs的等位基因、基因型分布频率在不同性别间没有差异(P>0.05)。RAC1基因转录的mRNA的表达量与性别和年龄不相关(P>0.05)。携带rs702482-TT基因型者的RAC1 mRNA比携带其他两种基因型的人RAC1 mRNA表达量低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RAC1基因转录的mRNA的表达量与性别和年龄无关(P>0.05),但受rs702482-TT基因型的影响而表达下调。
- 周嘉黎罗小梅杨春晓刘亚妮张玉师少军
- 关键词：RHOGTPRAC1单核苷酸多态性
