安徽省自然科学基金(1208085QH162)
- 作品数：13 被引量：42H指数：5
- 相关作者：胡东张荣波吴静杨小康王文洋更多>>
- 相关机构：安徽理工大学淮南东方医院杭州师范大学更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
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- LC3-LpqH自噬靶向性抗结核DNA疫苗的制备被引量：2
- 2014年
- 目的制备结核杆菌脂蛋白抗原前体LpqH基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的抗结核DNA疫苗,探究其诱导与靶向自噬的效应。方法构建pCMV-LpqH与pCMV-LC3-LpqH重组质粒并转染RAW264.7细胞,免疫印迹法检测LC-3与LC3-LpqH的表达。转染pCMV-LpqH或pCMV-LC3-LpqH至GFP-LC3-RAW264.7细胞,免疫荧光法观察LC3-LpqH蛋白的定位。结果细胞转染pCMV-LpqH后LC-3表达水平增高。pCMV-LC3-LpqH在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性,并且LC3-LpqH与GFP-LC3体外表达后共定位于自噬体上。结论 pCMV-LC3-LpqH的表达能够增强自噬,并将LpqH抗原靶向定位于自噬体,为设计新型抗结核疫苗提供了新思路。
- 胡东杨小康吴静王干勋王文洋祁真玉陈功张荣波
- 关键词：自噬结核分枝杆菌LC3疫苗
- 不同形态的烟曲霉对巨噬细胞自噬水平的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探究烟曲霉静息孢子、膨胀孢子以及菌丝对巨噬细胞自噬水平的影响。方法培养烟曲霉并收获静息孢子,在沙保弱液体培养基中振荡不同时间获得膨胀孢子及菌丝。以3种形态的烟曲霉分组处理RAW264.7细胞,免疫印迹法检测LC3BⅡ蛋白的表达量,逆转录PCR检测自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Atg12 mRNA的转录水平。观察不同形态的烟曲霉刺激GFP-LC3B-RAW264.7细胞后GFP-LC3B的表达与定位。结果膨胀的烟曲霉孢子及菌丝刺激巨噬细胞后LC3BⅡ表达水平升高;Atg5与Atg12 mRNA的转录均明显增高,Atg7转录水平无显著变化;膨胀孢子诱导LC3B呈斑点样聚集并与之共定位,烟曲霉菌丝刺激后自噬体增多。结论烟曲霉膨胀孢子与菌丝能显著提高巨噬细胞自噬水平,静息的分生孢子不能引起巨噬细胞自噬功能的应答。
- 杨小康戴京京祁真玉郝帅王干勋王立宇胡东张荣波
- 关键词：自噬烟曲霉LC3侵袭性曲霉病
- 独立表达Ag85A与ESAT6的抗结核DNA疫苗的构建被引量：4
- 2013年
- 目的以pIRES为载体建立可同时独立表达Ag85A与ESAT6两种抗原的抗结核二价疫苗,探究疫苗剂量对质粒基因体外表达水平的影响。方法 PCR扩增获得Ag85A基因和ESAT6基因,分别插入pIRES质粒的多克隆位点A和B,构建pIRES-Ag85A-ESAT6重组质粒。脂质体2000将重组质粒转入RAW264.7细胞系,Western blot法检测目的蛋白的表达水平。结果成功构建pIRES-Ag85A-ESAT6重组质粒,在转染后的RAW264.7细胞同时高表达Ag85A与ESAT6,其表达水平与转染的剂量呈正相关。结论 pIRES-Ag85A-ESAT6二价疫苗的构建将为基于多个抗原同时独立表达的新型多价疫苗设计提供了思路。
- 张雷杨小康胡东吴静王文洋杜久伟许礼发张荣波
- 关键词：多价疫苗结核分枝杆菌AG85AESAT6
- 自噬对先天性免疫的调控被引量：5
- 2012年
- 自噬又称为Ⅱ型程序性细胞死亡方式,是运输细胞质成分进入溶酶体的蛋白降解系统[1-2]。主要清除细胞内受损细胞结构、衰老的细胞器以及不再需要的生物大分子等,自噬机制失灵将导致细胞异常甚至死亡[3]。通过对酵母遗传学筛选的研究,已发现一些关键的自噬分子,
- 胡东张荣波吴静
- 关键词：先天性免疫自噬细胞死亡方式酵母遗传学蛋白降解细胞结构
- 高压氧佐治毛细支气管炎患儿43例临床观察
- 2014年
- 目的观察高压氧佐治毛细支气管炎的临床疗效。方法按照随机对照原则选取86例2011年12月至2012年12月来我院住院治疗的支气管炎患儿作为研究对象,分为传统对照组与高压氧组各43例。传统对照组采用一般治疗及一般护理,高压氧组在一般治疗的基础上配合高压氧治疗,并采取精细护理,观察2组患儿的临床疗效。结果传统对照组显效15例,有效10例,无效18例,总有效率58.14%;高压氧组显效35例,有效8例,总有效率100.00%。2组总有效率比较,差异有统计意义(P<0.05),表明高压氧组疗效显著优于传统对照组。2组治疗后感染、咳嗽、喘憋等临床症状均显著缓解,与同组治疗前比较,差异有统计意义(P<0.05),但高压氧组缓解更为显著,差异有统计意义(P<0.05)。结论高压氧佐治毛细支气管炎疗效确切,且无明显不良反应,值得临床推广应用。
- 钱素娟田欢栋
- 关键词：高压氧疗毛细支气管炎疗效观察
- 血清学检测在21,18-三体综合征筛查中的应用价值
- 2013年
- 目的探讨了孕中期孕妇外周血中甲胎蛋白（AFP）、游离β人绒毛膜促性腺激素（free—β—HCG）和游离雌三醇（uE3）联合检测在21，18-三体综合征临床诊断中的价值。方法采用时间分辨免疫荧光分析法（DELFIA）对我院10624例15～20周孕妇血清中AFP，free—β—HCG和uE3的水平进行检测，并根据孕妇的年龄、孕周、体质量、胎数等因素采用配套软件对胎儿21-三体综合征（DS）和18-三体综合征（ES）进行风险评估，并对高危产妇行羊膜腔穿刺羊水细胞培养或脐血管穿刺脐血细胞培养染色体分析。结果10624例孕妇中，DS风险率高于临界值者513例，阳性率为4．83％，阳性者行染色体核型分析确诊6例；DS风险率低于临界值者胎儿分娩后检出2例，假阳性率为14．28％。ES风险率高于临界值者89例，阳性率0．84％，染色体分析确诊2例；ES风险率低于临界值者分娩后未检出ES患儿。结论血清学指标可有效预测胎儿三体综合征，是临床预防和降低先天性染色体异常疾病的主要手段。
- 邵娟杨小康吴静张荣波胡乐林胡东
- 关键词：21-三体综合征18-三体综合征甲胎蛋白游离雌三醇
- 改良革兰染色法在显示石蜡切片真菌中的应用被引量：5
- 2014年
- 目的建立真菌的病理切片改良革兰染色法。方法选取确诊真菌感染的组织蜡块,切若干空白片,通过苏木素-伊红染色(HE)、高碘酸-无色品红染色(PAS)、六胺银染色(GMS)、改良革兰染色后,比较改良革兰染色法的染色效果。结果改良革兰染色法的染色效果好,该法具有易操作、染色效果稳定等优点。结论改良革兰染色法能够清晰地显示出组织切片中的真菌,并且染色效果稳定,在检测组织中的真菌时可发挥重要的辅助诊断价值,具有广泛的应用前景。
- 戴京京王干勋刘亚娟杨小康张荣波
- 关键词：革兰染色六胺银染色PAS染色切片真菌
- 自然戒断期成瘾药物依赖者CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞的变化特征及意义被引量：6
- 2013年
- 目的研究自然戒断期成瘾药物依赖者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg)及外周血单个核细胞(PBMC)中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达水平的变化,探讨成瘾药物对成瘾药物依赖者体内Treg的影响。方法采集自然戒断6个月和18个月半的成瘾药物依赖者各40例及30例健康人的外周血,使用流式细胞仪检测Treg,用RT-PCR检测PBMC中TGF-β1 mRNA表达水平。结果与对照组比较,戒断18个月组Treg、TGF-β1 mRNA含量显著增高,而戒毒6个月组未发现显著性变化。结论成瘾药物对依赖者Treg的影响是长期性的,其介导的Treg异常,可能是引起成瘾药物依赖者免疫功能紊乱的原因之一。
- 王文洋张荣波邢应如张世武胡东吴静何江杨小康付计锋赵辉胡乐林
- 关键词：调节性T细胞
- Rab7在自噬体和溶酶体融合过程作用的研究进展被引量：4
- 2015年
- 自噬体与溶酶体的有效融合是细胞发挥自噬功能对细胞内多余物质进行降解和再利用的关键。自噬体与溶酶体的融合受控于复杂的信号通路网络,涉及多个环节及众多分子的协同作用,并与内吞机制有部分重叠。Ras相关蛋白7(Rab7,小GTP酶家族的成员)可能是自噬体与溶酶体的融合进程中最为重要的分子之一,在指导自噬体成熟、胞内负荷运输及与溶酶体的对接与融合过程中发挥重要调节功能。自噬体与溶酶体的融合障碍可引起先天性及适应性免疫应答异常,导致炎症、肿瘤及胞内微生物感染的加重。因此控制Rab7的活性可能成为治疗这些疾病的潜在靶点。
- 胡东王婉吴静张荣波
- 关键词：自噬溶酶体
- 矽肺结核合并症大鼠模型与病理观察被引量：3
- 2015年
- 目的建立不同分期矽肺病合并结核感染的大鼠模型,比较病理特征并分析矽肺病对结核感染的影响。方法 48只大鼠随机等量分为A、B、C、D共4组,A组不作处理,B、C、D组采用非暴露式气管内注入法于第0、30或60天染尘,第50天A、B、C、D组均尾静脉注射结核标准株H37Rv悬液,结核感染40 d后剖杀大鼠取肺。石蜡包埋切片,HE染色观察组织结构,Ziehl-Neelsen法抗酸染色检测结核菌,Warthin-Starry银染法显示尘粒分布,菌落计数实验反映结核载量。结果 B、C、D组大鼠染尘30、60或90 d后可分别造成Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ期矽肺,尾静脉结核攻击可导致肺部结核感染,结核载量和肺组织病变程度均与矽肺病程有关。结论成功建立大鼠矽肺结核合并症模型,将有助于矽肺病与结核病相互推动进程中的"对话"机制研究。
- 胡东徐忠乐张庆杨小康王婉戴京京祁真玉王干勋邢应如张荣波吴静
- 关键词：肺纤维化结核病
