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大鼠肝再生增强因子的基因克隆及序列分析被引量：1: 2009年; 背景:肝再生增强因子是一种重要的次级肝再生因子,能够特异性地促进肝脏再生。目的:将乳鼠肝脏提取的RNA,利用特异引物克隆到肝再生增强因子基因,对其进行了生物信息学分析。设计、时间及地点:基因分子学体外实验,于2008-03/05在河南大学生命科学学院神经生物学实验室完成。材料:SPF级3日龄Wistar大鼠肝组织。方法:取3日龄Wistar大鼠肝组织,按异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法抽提肝组织总RNA,按分子生物学实验指南的步骤进行反转录-聚合酶链反应方法扩增目的片段,用凝胶回收试剂盒回收纯化目的基因,连接T载体,转入大肠杆菌,提取质粒送上海生工生物工程技术服务有限公司测序。应用分子生物学软件对测序结果进行分析。主要观察指标:聚合酶链反应扩增条带观察;测序结果分析;丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸化位点的预测;系统进化树分析。结果:聚合酶链反应扩增结果与目的片段位置一致,测序结果表明为肝再生增强因子mRNA,基因全长378bp,在人、牛、小鼠、斑马鱼等物种中高度保守。结论:实验成功克隆了大鼠肝再生增强因子基因。; 宋敏柴连琴邓锦波; 关键词：肝再生增强因子基因克隆生物信息学

菟丝子黄酮对慢性肝损伤保护作用的研究被引量：8: 2010年; 采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)制备慢性肝损伤小鼠试验动物模型,造模同时药剂组小鼠每天用菟丝子黄酮灌胃,检测全血中还原型谷胱甘肽(GSH),血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)5种酶的活性变化,并进行肝脏病理学检测,研究菟丝子黄酮对慢性肝损伤小鼠的保护作用。结果表明:模型组小鼠血清中ALT、AST、MDA、SOD、GSH水平分别为1 649.66±104.85、751.88±89.50、20.41±1.41、67.69±5.72、316.9±54.84;灌胃菟丝子黄酮(5.5 mg/mL)后,各项指标分别为656.46±79.68、150.40±108.69、16.97±1.23、136.83±4.96、401.8±33.07,经t检验分析,各指标差异极显著(p<0.01)。这说明菟丝子黄酮能降低血清ALT、AST、MDA水平,提高血清SOD、全血中GSH水平,减少纤维化。证实菟丝子黄酮对小鼠慢性肝损伤有保护作用,其作用机制主要与抗氧化作用有关。; 宋敏于季军杨丹彤孟景会; 关键词：四氯化碳慢性肝损伤菟丝子黄酮 GSH AST ALT

大鼠动粒蛋白rMis12基因的克隆和表达: 2009年; 利用抑制性消减杂交所获得的rMis12表达序列标签(EST),采用快速扩增cDNA末端(RACE)技术,从大鼠肝脏中克隆到rMis12基因。通过原核重组表达后制备多克隆抗体,并用基因芯片和Western blot方法分别检测rMis12RNA和蛋白质水平上的表达变化。成功克隆到rMis12基因,其cDNA全长2604 bp,编码206个氨基酸,生物信息学分析结果显示该基因存在2个保守的磷酸化位点,与小鼠rMis12基因进化关系最近。基因芯片和Western blot检测结果表明,rMis12在正常大鼠肝脏中表达水平持续较低,在2/3肝切除24 h过程中rMis12出现上调表达。; 柴连琴文祯中宋敏; 关键词：动粒蛋白肝再生

菟丝子黄酮及其水煎剂的保肝作用研究被引量：10: 2010年; 为了研究菟丝子黄酮及水煎剂对慢性肝损伤小鼠的保护作用,为菟丝子作为保肝药物的开发提供依据,利用小剂量CCl4结合乙醇制备慢性肝损伤小鼠模型,造模同时对小鼠灌服不同剂量的菟丝子黄酮及菟丝子水煎剂,试验的第4周末采血,检测血清ALT、AST、SOD活性,并进行肝脏病理学检查。结果表明:菟丝子黄酮和水煎剂均能降低血清ALT、AST水平,提高血清SOD水平,降低肝纤维化。得出结论:菟丝子黄酮和水煎剂对小鼠慢性肝损伤有保护作用,保护效果为大剂量菟丝子黄酮>小剂量菟丝子黄酮>水煎剂。; 宋敏李世朋柴连琴; 关键词：慢性肝损伤菟丝子 AST ALT 黄酮水煎剂

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河南省教育厅自然科学基金(2009A360001)