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非整倍体毒剂和染色体断裂剂的FCM微核检测区分方法研究: 2006年; 目的研究流式细胞术(flow cytometry,FCM)微核检测筛选非整倍体毒剂和染色体断裂剂的方法。方法采用CD71荧光抗体和碘丙啶(PI)双染色,通过FCM检测环磷酰胺(CP)和秋水仙素(COL)诱导的NIH小鼠外周血含微核网织红细胞的PI荧光强度,比较它们与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值,以探索通过FCM微核检测筛选非整倍体毒剂和染色体断裂剂的方法。结果染色体断裂剂CP诱导的含微核网织红细胞与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值较低,非整倍体毒剂COL诱导的含微核网织红细胞与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值较高,两者间差异有统计学意义(P<0．01)。结论通过FCM检测微核PI染色强度,可初步判断诱导微核形成的因素是否具有染色体断裂剂和非整倍体毒剂毒性。; 杨明杰周建嫦李志杨杏芬黄俊明谭小华曹佳曾瑞萍; 关键词：微核流式细胞术

镉染毒小鼠网织红细胞微核流式细胞术研究被引量：2: 2005年; 目的　通过流式细胞术 (FCM )检测外周血微核方法 ,研究氯化镉 (CdCl2 )染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率 ,评价流式细胞术在微核检测中的应用价值及探讨氯化镉的致突变作用。方法　采用转铁蛋白受体CD71荧光抗体和碘化丙啶 (PI)染色 ,并以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核模式生物调校流式细胞仪 ,检测 10～ 6 0mg/kg环磷酰胺染毒和 5 0～ 4 0 0 μg/kg氯化镉染毒对小鼠的外周血含微核网织红细胞率的变化。结果　不同剂量环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率和骨髓含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠 ,且二者之间相关性良好 (r =0 95 5 ) ;不同剂量氯化镉染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率未见明显升高。结论　FCM测定外周血含微核网织红细胞率可替代传统显微镜检查骨髓含微核网织红细胞率用于遗传毒性评价 ;在本研究条件下未观察到氯化镉有明显的诱导小鼠外周血含微核网织红细胞形成的作用。; 杨杏芬杨明杰李志周建嫦黄俊明谭小华曹佳曾瑞萍; 关键词：微核流式细胞术

适体及其在流式细胞术检测中的应用被引量：2: 2003年; 适体是一种本质为RNA或DNA的小分子 ,它们能以配基形式像抗体一样与靶蛋白呈高亲合力特异性结合 ,可在一定程度上取代抗体用于检测和治疗。就适体筛选的指数富集配基系统进化技术原理。; 杨明杰周建嫦; 关键词：适体流式细胞术检测靶蛋白核酸

氯化镍染毒对小鼠外周血网织红细胞微核形成的影响被引量：4: 2006年; 目的研究氯化镍(NiCl2)诱导小鼠外周血网织红细胞微核形成的作用。方法将30只健康的成年雄性NIH小鼠随机分为6组,设生理盐水对照组、秋水仙素阳性对照组(剂量为0.75mg/kg)、环磷酰胺阳性对照组(剂量为40.0mg/kg)和NiCl2染毒组(剂量分别为5.0、10.0、20.0mg/kg),分2次腹腔注射染毒,间隔24h,每次按0.1ml/10g体重腹腔注射。采用转铁蛋白受体荧光抗体和碘化丙碇染色,以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核生物模型,调校流式细胞仪,检测秋水仙素、环磷酰胺和0、5.0、10.0、20.0mg/kgNiCl2染毒后小鼠外周血含微核网织红细胞率的变化。结果秋水仙素和环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠(P<0.01),但不同剂量NiCl2染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率均未见明显升高(P>0.05)。结论该研究条件下未观察到氯化镍有明显的诱导小鼠外周血网织红细胞微核形成的作用。; 李志杨明杰黄俊明杨杏芬周建嫦谭小华曹佳曾瑞萍; 关键词：镍流式细胞术微核网织红细胞

CD71荧光抗体和PI染色的微核流式细胞术检测研究被引量：7: 2005年; 目的探索CD71荧光抗体和PI染色的微核流式细胞术自动化检测方法。方法采用-85℃甲醇固定细胞,CD71荧光抗体和PI染色,以伯氏疟原虫感染小鼠血细胞为微核模式生物调校流式细胞仪,建立微核流式细胞术检测方法,并对秋水仙素(COL)诱导的小鼠外周血含微核网织红细胞进行了检测。结果所建立的方法能明确分辨外周血含与不含微核的网织红细胞和成熟红细胞,COL处理小鼠的外周血含微核网织红细胞率呈明显的剂量依赖性升高,流式细胞术与显微镜检测的外周血含微核网织红细胞率有良好相关性(r=098)。结论微核流式细胞术检测方法能准确地检测小鼠外周血含微核网织红细胞。; 杨明杰周建嫦李志杨杏芬黄俊明谭小华曹佳曾瑞萍; 关键词：微核流式细胞术秋水仙素

不同采样时间小鼠网织红细胞微核率变化的流式细胞术研究被引量：3: 2005年; 目的:应用流式细胞术研究两次给药后不同采样时间小鼠外周血网织红细胞微核率的变化,探讨流式细胞术检测微核方法的应用性。方法:NIH小鼠两次腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide ,CP) 4 0mg/kgBW (两次给药间隔2 4h) ,于第二次给药后6、12、18、2 4、30、36、4 8h和72h采外周血- 85℃甲醇固定、PI和CD71染色进行流式细胞术检测,每个样本分析10 0 0 0个网织细胞,同时进行外周血涂片,Giemsa染色显微镜检测,每个样本分析10 0 0个网织红细胞。结果:两次CP给药后6h即可观察到网织红细胞微核率增高,分别在两次给药后2 4h达到高峰,此后逐渐下降。应用流式细胞术检测外周血网织红细胞微核与外周血涂片显微镜检测敏感性相同,两者并具有良好的相关性。流式细胞术检测方法具有高通量、省时、省力等优势。结论:在检测化合物遗传毒性方面,流式细胞术检测方法值得推广应用。; 李志黄俊明杨明杰杨杏芬周建嫦胡永成杨美玲; 关键词：流式细胞术微核外周血

流式细胞术在毒理学检测中的应用被引量：4: 2004年; 流式细胞术是一种高通量、多参数细胞分子生物学检测技术 ,随着流式细胞仪性能改进和测定方法的发展 ,已成为实验研究和临床检测的重要手段 ,并渗入毒理学检测的多个方面 ,带动了毒理学检测技术的发展。; 李志杨明杰周建嫦; 关键词：流式细胞术毒理学

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中国博士后科学基金(2002031289)