四川省科技攻关计划(0040205301259)
- 作品数：2 被引量：14H指数：2
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- 苦参碱对肺成纤维细胞TGF-β_1信号转导途径的干预作用被引量：12
- 2009年
- 目的研究苦参碱对肺成纤维细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)信号转导途径的影响。方法以人肺成纤维细胞系(HLF-02)为研究对象,用Western blot法检测TGF-β1、丝/苏氨酸激酶抑制剂星形孢菌素(Staurosporine,SP)和细胞外信号调节激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059、苦参碱(Matrine,Mat)作用对结缔组织生长因子(CTGF)、p-Smad2、p-ERK1/2蛋白表达的影响,免疫组织化学方法检测CTGF蛋白,RT-PCR技术检测CTGFmRNA的表达。结果体外培养的HLF-02表达基础水平的CTGF蛋白,1 ng/mL TGF-β1可使CTGF、CTGFmRNA、p-Smad2、p-ERK1/2表达水平增强(P<0.01);使用SP及PD98059预处理细胞可以抑制TGF-β1刺激的CTGF的表达增加(P<0.01)。使用苦参碱预处理细胞可以抑制TGF-β1刺激的CTGF、CTGFmRNA、p-Smad2、p-ERK1/2蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),且与苦参碱浓度呈负相关(r分别为0.845,0.900,0.789,0.942;P<0.01)。结论TGF-β1可使CTGF蛋白及CTGFmRNA的表达明显增强,可能是通过Smad2和ERK途径促进CTGF表达。苦参碱可能是通过Smad2和ERK通路在基因及蛋白水平抑制TGF-β1诱导的CTGF表达。
- 凌伟谢敏石俊青
- 关键词：人肺成纤维细胞转化生长因子-Β1结缔组织生长因子苦参碱
- 罗格列酮对肺成纤维细胞TGF-β1信号转导途径的干预作用被引量：2
- 2009年
- 目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对人肺成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)、CTGF mRNA、核因子-κB(NF-κB)及激活子蛋白-1(AP-1)表达的影响及其罗格列酮对肺成纤维细胞TGF-β1信号转导途径的影响及可能机制。方法以人肺成纤维细胞系(HLF-02)为研究对象,用Western blot法检测TGF-β1、姜黄素、吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)、罗格列酮作用后的CTGF、NF-κB及AP-1蛋白的表达,免疫组织化学方法检测CTGF蛋白、RT-PCR技术测CTGF mRNA的表达。结果①与对照组比较,1ng/mLTGF-β1作用15min后,CTGF表达水平即增强(P<0.01),并随着作用时间延长而逐渐增强。CTGF mRNA的表达亦随着时间的延长逐渐增加,作用24h表达最多。②1ng/mLTGF-β1作用30min后,NF-κB及AP-1的表达水平增强(P<0.01),以后表达趋于稳定,抑制剂(PDTC100μmol/L、姜黄素50μmol/L)抑制这两条通路后CTGF的表达明显下降。③低(5μmol/L)、中(10μmol/L)、高(15μmol/L)浓度罗格列酮预处理细胞30min+TGF-β1作用24h组较单纯TGF-β1处理24h组CTGF、NF-κB及AP-1蛋白表达明显降低(P<0.01),并且可以明显抑制1ng/mLTGF-β1作用24h引起的CTGF mRNA的表达(P<0.01)。结论在体外,罗格列酮可通过NF-κB及AP-1信号转导途径启动人肺成纤维细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)抑制TGF-β1诱导CTGF转录和表达。
- 石俊青谢敏王佑娟凌伟王浩凌
- 关键词：人肺成纤维细胞罗格列酮
