国家自然科学基金(30060074)
- 作品数：14 被引量：153H指数：5
- 相关作者：杨磊潘泽民应康王国荃顾永清更多>>
- 相关机构：石河子大学复旦大学新疆医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一条人类砷相关新cDNA基因的克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2004年
- 目的 :探讨砷化物与基因的相互作用 ,克隆砷相关基因 ,利用生物信息学技术分析克隆基因。方法:采用 SMART方法构建 c DNA文库 ,杂交筛选并克隆基因 ,利用生物信息学手段对克隆基因进行结构和功能的分析。6 μm ol/ L Na As O2 处理人正常肝 L- 0 2细胞 2 h,抽提 RNA做基因芯片杂交。结果:成功克隆一条新基因 ,生物信息学分析发现在 7到 4 5 6碱基范围内有一个完整的 ORF,在编码起始区有典型的 Kozak序列 ,编码 14 9个氨基酸的蛋白质。核酸同源性比对发现与人类 1p36 .2 - 36 .3染色体 DNA序列同源性达 98% ,编码蛋白质同 Alu亚家族 SB序列同源性达 85 %。染砷细胞基因芯片杂交发现克隆基因表达增高。结论:克隆的人类砷相关基因 ,编码蛋白质与Alu亚家族 SB序列同源性高。
- 吴顺华杨磊潘泽民黄瑾顾永清王国荃郑玉建
- 关键词：生物信息学CDNA砷化物表皮生长因子受体EGFR
- 急性砷染毒的L-02细胞的基因芯片分析被引量：4
- 2003年
- 目的 用基因芯片分析急性砷染毒时人正常肝细胞 (L 0 2细胞 )基因表达谱的变化。方法 亚砷酸钠染毒L 0 2细胞 2、15、2 4h与未染毒的L 0 2细胞作表达谱基因芯片杂交。结果 L 0 2细胞用砷剂染毒后不同时间基因表达谱不同。hCYR6 1基因在细胞染毒 2h后就表达增加 ,而在 15h和 2 4h后均不再升高 ;在细胞染毒后的不同时段 ,细胞金属硫蛋白Ⅳ及金属硫蛋白Ⅲ同源基因的表达均显著增加 ;热休克蛋白 86基因在细胞染毒 2h未增加 ,在 15h和2 4h表达均增加。结论 细胞接触砷毒后进入应激状态 ,合成最必需的与解毒功能相关的蛋白 。
- 顾永清杨磊王国荃袁秉祥潘泽民应康李遥谢毅
- 关键词：L-02细胞基因芯片肝细胞亚砷酸钠
- 生物体抗砷机制的研究进展被引量：92
- 2004年
- 仙玲玲杨磊
- 关键词：生物体磷酸酶跨膜蛋白砷中毒
- 砷对细胞和生物作用的研究进展被引量：16
- 2003年
- 砷化物对于生物是有毒物质,可以导致细胞的染色体异常和基因突变。砷化物还可以改变某些基因的功能,诱导癌症的发生。生物接触砷化物后,细胞内一些基因表达发生了改变。研究表明原核生物及真核生物对砷化物的作用都产生了分子水平的应答。通过研究砷化物与基因相互作用的关系,对于揭示细胞和生物同砷化物的分子作用机制,阐明各种细胞和生物的抗砷分子机制有重要意义。另外,目前发现三氧化二砷能通过不同细胞信号传导途径诱导细胞凋亡。
- 潘泽民刘开泰杨磊王国荃
- 经砷诱导人肝细胞L02获得砷耐受性的研究被引量：2
- 2004年
- 砷是自然界普遍存在的毒性较强的类金属元素,几乎所有生物在进化中都产生了对砷毒性的耐受性,生物体对砷的耐受机制受到广泛关注。本实验采用低剂量(4μmol/L)NaAsO2诱导人体正常肝细胞株L02,利用噻唑兰检测法(MTT)计算细胞生存率及半数致死量反映细胞对砷耐受性的改变,结果发现低剂量砷诱导6周后,在48h急性砷中毒试验中,实验组LC50为23.0μmol/L,对照组为11.9μmol/L,实验组明显高于对照组,说明细胞对急性砷中毒耐受性明显提高。
- 仙玲玲杨磊谢菁于娜应康黄瑾
- 关键词：砷诱导肝细胞耐受性砷中毒
- 重组人类抗砷相关基因在大肠埃希菌的表达
- 2004年
- 目的 构建含重组人类抗砷相关基因 (humanarsenicresistencerelatedgene ,hARRG)的表达载体 ,诱导其在转化菌表达 ,分离纯化表达蛋白 ,研究该蛋白质的理化性质、抗砷功能和免疫活性 ,深入研究人类对砷化物的抵抗作用。方法 将hARRGcDNA开放阅读框亚克隆到原核表达载体Pet11C中 ,用异丙基 - β -D -硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达蛋白质 ,利用阴离子交换柱Sepharose纯化蛋白质 ,SDS -PAGE胶电泳观察结果。 结果 将hARRGcDNA成功亚克隆到原核表达载体Pet11C中 ,并成功在大肠杆菌中表达 ,表达的hARRG蛋白占菌体蛋白的 5 %左右 ,该蛋白质被分离纯化。结论 原核表达载体Pet11C可以在大肠杆菌中表达hARRGcDNA 。
- 何玲潘泽民谭晓华袁红琳刘仁海杨磊
- 关键词：重组DNA原核表达蛋白纯化
- 一条人类砷相关新cDNA基因的克隆及功能预测被引量：2
- 2004年
- 目的探讨砷化物与基因的相互作用,克隆砷相关基因,利用生物信息学分析克隆基因。方法利用SMART方法构建cDNA文库,杂交筛选并克隆基因,生物信息学对克隆基因进行结构和功能的分析。6μmol/LNaAsO2处理人正常肝L鄄02细胞2h,抽提RNA做基因芯片杂交。结果成功克隆一条新cDNA基因,生物信息学分析发现7到456有一个完整的ORF,在编码起始区有典型的Kozak序列,编码149个氨基酸的蛋白质。核酸同源性比对发现与人类1p36.2鄄36.3染色体DNA序列同源性达98%,编码蛋白质同Alu亚家族SB序列同源性达85%。染砷细胞基因芯片杂交发现克隆基因表达增高。结论克隆了人类砷相关基因,该基因编码蛋白质与Alu亚家族SB序列同源性高。
- 潘泽民杨磊吴顺华刘开泰顾永清王国荃应康谢毅
- 关键词：克隆基因生物信息学分析白质LN序列同源性
- 长期低剂量诱导法培养人体抗砷细胞株的研究被引量：18
- 2005年
- 目的培养人体具有抗砷特性的细胞株,为人体抗砷基因研究奠定基础。方法采用人体脐静脉内皮细胞(ECV鄄304),在含有低剂量亚砷酸钠(NaAsO2)的培养基中长期培养,并设同步对照细胞组;利用噻唑兰(MTT)检测法计算细胞生存率及半数致死量(LD50)作为反映细胞对砷耐受性改变的指标。结果短期诱导,细胞未表现出砷耐受性提高,经过12周NaAsO2诱导后,48h急性砷毒性实验中,实验组细胞对急性染砷表现出明显的耐受性提高,实验组在各浓度下生存率都明显高于同步对照组。实验组LD50为14.3μmol/L,对照组LD50为3.9μmol/L。结论人体细胞与其他生物体一样,在长期低剂量砷诱导下可以具备抗砷的特性。
- 仙玲玲杨磊罗星应康何玲于娜黄瑾潘泽民
- 关键词：低剂量细胞株耐受性诱导法LD50
- 砷化物对人类金属硫蛋白-3cDNA基因表达的影响被引量：7
- 2004年
- 目的探讨砷化物对人类正常肝细胞金属硫蛋白MetallothioneinMT-3cDNA基因表达的影响。方法利用SMART方法克隆cDNA基因,生物信息学分析克隆基因的同源性、染色体定位、基因结构和对该基因编码蛋白质进行分析并对该蛋白质进行跨膜信息分析,基因芯片方法检测染砷L-02细胞MT-3基因的表达。结果成功克隆MT-3cDNA基因,经生物信息学分析可知,该基因定位在人16号染色体16q13区段,跨膜信息分析发现MT-3基因编码蛋白质可以穿出生物膜,基因芯片结果证实染砷的人正常肝L-02细胞在染砷早期MT-3基因表达增高。结论该研究发现人类MT-3基因是砷化物作用的一个相关基因,早期参与了砷代谢解毒。
- 潘泽民杨磊刘开泰顾永清王国荃应康谢毅
- 关键词：金属硫蛋白砷CDNA基因
- 人类金属硫蛋白-1F cDNA基因与砷化物相互作用的研究被引量：3
- 2006年
- 目的探讨砷化物作用于人类正常肝细胞后金属硫蛋白-1F cDNA基因表达的变化。方法利用SMART方法克隆cDNA基因,生物信息学分析克隆基因的同源性、染色体定位、基因结构和对该基因编码蛋白质进行分析并对该蛋白质进行跨膜信息分析,基因芯片方法检测染砷L-02细胞金属硫蛋白-1F基因的表达。结果成功克隆金属硫蛋白-1F cDNA基因,经生物信息学分析可知,该基因定位在人染色体16q13区段, 跨膜信息分析发现金属硫蛋白-1F基因编码蛋白质可以穿出生物膜,基因芯片结果证实染砷的人正常肝L-02 细胞在染砷早期金属硫蛋白-1F基因表达增高。结论发现人类金属硫蛋白-1F基因是砷化物作用的一个相关基因,早期参与了砷代谢解毒。
- 潘泽民杨磊刘开泰顾永清王国荃应康谢毅
- 关键词：金属硫蛋白砷化合物
