国家自然科学基金(30970853)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：张永学兰晓莉覃春霞夏晓天袁辉更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 股骨头缺血性坏死基因治疗及早期影像学监测的研究进展
- 2012年
- 基因治疗是指将外源性基因导人靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷或异常而引起的疾病，以达到治疗目的。基因治疗作为一种新技术，已用于肿瘤、心血管和神经系统等疾病的治疗，为诸多难治性疾病的治疗带来了曙光。股骨头缺血性坏死是临床难治性疾病，也是骨科常见病，传统的手术疗法和保守疗法都有众多弊端，疗效难以令人满意，而基因治疗作为一种新型疗法，在骨科缺血性疾病的治疗中也展现了光明前景，大量动物实验已经证实了其可行性。该文着重介绍股骨头缺血性坏死基因治疗及早期监测方面的一些研究进展。
- 王朋兰晓莉张永学齐红艳
- 关键词：股骨头坏死基因疗法
- 新型核素报告基因系统hERL／核素标记雌二醇的实验研究被引量：5
- 2012年
- 目的在体外细胞摄取实验及在体显像基础上，评价新型核素报告基因系统人ER配体结合域（hERL）／核素标记雌二醇（E2）应用的可行性，为其用于基因治疗的监测提供依据。方法以内部核糖体进入位点序列（IRES）方式构建携带hERL和治疗VEGF165的重组质粒pDC316-hERL-IRES．VEGF165（简写为EIV），将其用腺病毒包装构建重组腺病毒复合体（Ad-EIV）。采用悬浮贴壁法从sD大鼠股骨和胫骨原代提取骨髓MSCs并培养。将Ad-EIV和脂质体2000包裹重组质粒（Lipo-EIV）分别转染MSCs，利用RT-PCR和Westernblot，对hERL和VEGF165mRNA和蛋白质水平的表达分别进行检测。测定Ad．EIV组、Lipo．EIV组和未转染组MSCs对125I-E在不同时间（1、3,6、9、12和24h）的摄取率。将转染Ad-EIV的MSCs注射至大鼠左前肢、未转染MSCs注射至右前肢后1d，注射16a-^18TMF-17a-E2（^18F-FES）进行micro PET／CT活体显像。2组间均数比较采用t检验，相关性研究采用Pearson相关分析。结果Ad—EIV转染MSCs后RT—PCR检测示hERL和VEGFl65mRNA的表达随着感染滴度的增加而增加，且呈正相关（r2分别为0．953和0．966，P均〈0．05）；感染复数（MOI）=25、50、75和100时，其mRNA表达高于Lipo-EIV组。Westernblot检测蛋白质水平的表达也得到同样的结果。Ad-EIV组和Lipo-EIV组MSCs对^125I-E2的摄取率均随时间延长逐渐增高，24h最高，分别达到（10．94±0．30）％和（8．934-0．18）％；各个时间点2种载体转染组均明显高于未转染对照组（3．54％-5．52％；t值分别为15．489-26．560、10．523-24．204，P均〈0．05），而Ad-EIV组摄取率高于Lipo-EIV组（t=g．132—16．168，P均〈0．05）。MicroPET／CT大鼠活体显像显示注射Ad-EIV转染的MSCs之左前肢放射性浓聚明显高于对侧。结论报告基因hERL可以通过腺病毒转染、脂质体包裹等多种形式转染细胞并成功表达，应用核素标记E2可以对其�
- 兰晓莉覃春霞田月丽夏晓天何勇袁辉张永学
- 关键词：放射性核素显像雌二醇同位素标记
- 雌激素受体显像剂^99Tc^m-GAP-EDL的制备及荷乳腺癌裸鼠显像研究被引量：1
- 2016年
- 目的 制备1种^99Tc^m标记雌激素受体（ER）显像剂,通过体外细胞实验和在体荷瘤动物显像评价其与ER的结合特性.方法 以雌酮为原材料合成EDL,与GAP反应生成GAP-EDL,标记得到^99Tc^m-GAP-EDL,测定其标记率及稳定性.培养ER高表达及低表达乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231,比较2种细胞摄取^99Tc^m-GAP-EDL的差异.在注射显像剂后30、60、120、180及240 min,分别测定正常BALB/c小鼠血液及主要组织器官中的放射性摄取值.建立MCF-7及MDA-MB-231荷瘤鼠模型,分别于注射^99Tc^m-GAP-EDL后1、2及4h行γ显像.对MCF-7荷瘤裸鼠行阻断后γ显像.数据比较采用两样本t检验.结果 ^99Tc^m-GAP-EDL的标记率为（98.8±0.5）％,24 h放化纯大于90％.240 min时MCF-7及MDA-MB-231细胞摄取率分别为（4.84±0.21）％与（2.11±0.21）％,差异有统计学意义（t=15.96,P＜0.05）,GAP-EDL及雌二醇阻断后MCF-7细胞的摄取率[（2.31±0.28）％和（2.05±0.35）％）]较未阻断时明显下降（t=11.52和11.16,均P＜0.05）.正常小鼠体内生物分布显示,^99Tc^m-GAP-EDL主要经肝、肾代谢,血液清除快.MCF-7荷瘤裸鼠在注射99 Tcm-GAP-EDL后1h,即可见肿瘤显影,4h时显像最清晰,而阻断后的MCF-7荷瘤裸鼠及MDA-MB-231荷瘤裸鼠的肿瘤部位均未见明显显影.结论 ^99Tc^m-GAP-EDL制备过程简单,标记条件温和,产物标记率高、稳定性好,与ER有较好的结合特性,是1种有潜力的ER靶向性显像剂.
- 夏晓天兰晓莉覃春霞冯洪燕胡帆李崇佼张永学
- 关键词：受体雌激素同位素标记锝
- 新型报告基因/报告探针系统hERL/18F-FES的评估
- 目的评估新型报告基因/报告探针系统:人雌激素配体受体结合域(hERL)/~(18)F-FES(~(18)F-雌二醇)监测基因和细胞治疗的可行性。方法以人雌激素受体配体结合域(hERL)为报告基因,以VEGF为治疗基因,利...
- 覃春霞兰晓莉夏晓天张永学
- 纳米抗体用于分子影像的研究进展被引量：2
- 2014年
- 纳米抗体作为一种新型抗体片段，保留了完整的抗原结合部位，具有相对分子质量小、特异性高、亲和力强等特性，非常适于构建分子探针用于分子影像。体外实验显示，以纳米抗体为基础的分子影像探针与抗原的亲和力可达到nmol水平。在肿瘤、动脉粥样硬化、神经系统疾病等的动物模型中，纳米抗体分子探针可高特异性地结合到靶器官，未结合的部分由肾脏迅速排泄，具有较高的靶／血液（T／B）比值，可清晰显示病变组织。经结构改造或化学修饰后，纳米抗体与靶器官的亲和力和滞留量进一步提高，更有利于其在分子影像中的应用。随着相关研究的不断深入，以纳米抗体为基础的分子影像在疾病早期诊断及疗效评估中的良好应用前景日渐突显。
- 丁志凌兰晓莉张永学
- 关键词：抗体分子显像
- 不同载体携带报告基因hERL转染骨髓间充质干细胞对报告探针125I-E2摄取动力学的比较
- 目的报告基因核素显像是无创性监测细胞和基因治疗的有效方法,但需要合适的载体将报告基因携带进入体内。以人雌激素受体配体结合域(hERL)和~(125)I-雌二醇(E2)作为报告基因和探针,以骨髓间充质干细胞(MSC)和血管...
- 覃春霞兰晓莉张永学
- 报告基因显像监测干细胞治疗的研究进展
- 2010年
- 干细胞移植治疗各种组织损伤或退行性疾病是目前国内外研究热点,而对干细胞移植后的活体归巢、分化及功能表达等动态变化却所知甚少,影响了干细胞治疗的进一步发展.报告基因显像是分子影像技术的重要组成部分,通过间接监测转染报告基因的表达,可以动态监测移植干细胞活体内变化过程.该文简述报告基因显像活体监测移植干细胞治疗的最新研究进展和未来发展趋势.
- 裴之俊张永学
- 关键词：分子诊断技术干细胞移植
