国家高技术研究发展计划(2007AA10Z409) 作品数:18 被引量:212 H指数:10 相关作者: 陆开宏 梁晶晶 胡智勇 郑忠明 张德民 更多>> 相关机构: 宁波大学 浙江大学 国家海洋局第二海洋研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 浙江省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 环境科学与工程 生物学 农业科学 更多>>
一株反硝化光合细菌的生物学特性及系统发育分析 养殖水体中亚硝酸盐的过量积累会对养殖生物产生毒害作用,应用脱氮细菌去除亚硝酸盐是养殖水质调控的重要手段之一。从淡水养殖塘中分离筛选到一株可高效还原亚硝氮的光合细菌,命名为wps。该菌株为革兰氏阴性菌,细胞杆状,菌体大小为... 陈慧 张德民 王龙刚 潘志崇关键词:光合细菌 红假单胞菌 亚硝酸盐 反硝化 文献传递 固定化微生物在凡纳滨对虾养成池中的应用 被引量:10 2010年 通过监测池塘水体藻类群落组成、多项水质指标、底泥总有机碳(TOC)和底泥异养细菌数等指标值,研究了固定化微生物对凡纳滨对虾生产性养殖池塘水质调控和污染底泥的修复能力,微生物固定所用载体为改良沸石和生物活性炭(相应的固定化微生物分别记为ZE-M组和BE-M组)。试验结果显示,处理组(ZE-M组和BE-M组)池塘水体中藻类组成呈多元化,隐藻、蓝藻和绿藻数量比较接近,而对照组则是蓝藻占绝对优势。试验过程中,对照池的氨氮浓度和COD呈直线上升,而处理组氨氮浓度和COD的增长幅度缓慢,ZE-M、BC-M载体微生物的使用是产生差异的直接原因。对照组和处理组的其它水质指标变化规律及差异性不明显,可能是由于池塘水体由诸多不确定因素影响所致。固定化微生物对池塘底泥TOC含量和异养细菌数的影响显著(P<0.05),试验过程中,试验组和对照组池塘底泥TOC含量随着养殖时间均有增加的趋势,但对照组这一趋势更加明显;试验初期,各组表层底泥中的异养细菌数量在3.367×105~8.60×105CFU/g范围内,试验结束时增长到85×105~393.7×105CFU/g。处理组和对照组的异养细菌差异显著(P<0.05),其中ZE-M处理组最低,仅为对照组的21.59%。试验结果表明,凡纳滨对虾生产性养殖池塘中应用固定化微生物技术能显著改善池塘水质、稳定水体藻相结构和提高微生物对污染底质的生物修复能力。 金春华 陆开宏 郑忠明 蔡惠凤 王扬才关键词:凡纳滨对虾 固定化微生物 池塘养殖 藻类群落结构 污染底质 斑马鱼干扰素基因工程菌发酵条件及稳定性研究 被引量:1 2009年 采用液体传代的方法,研究表达斑马鱼干扰素(IFN)工程菌株pRSET-B-zIFN的遗传稳定性,并对其发酵工艺进行了优化。结果表明,构建的工程菌株遗传稳定性良好,在没有选择压力的情况下,传代100次质粒稳定性仍然保持100%,菌落形态及生长情况与原代菌无明显区别,SDS-PAGE结果显示zIFN表达量无明显差异。发酵条件研究表明,工程菌在LB培养基中,接种量为1%,诱导剂终浓度为0.1mmol/L,zIFN的表达量最高。 梁晶晶 陆开宏 凌红丽 王宏华关键词:发酵工艺 SDS-PAGE 膜过滤细胞直接计数新方法 2010年 介绍了两种膜过滤细胞直接计数新方法,即不透明滤膜的金相显微镜细胞直接计数法和透明滤膜的生物显微镜细胞直接计数法的基本原理、仪器设备、分析和计算方法,并且将此方法与荧光显微镜细菌计数、血球计数板等方法进行了比较。实际计数结果表明,两种膜过滤细胞直接计数法配合了独特的酸碱处理法以分散聚团细胞,用于非环境样品细胞浓度的测定具有快速准确简便的特点。此外,该方法基本不受细胞大小的影响,除了适用于体型较大的藻类、酵母菌的快速计数以外,还可以清晰地分辨诸如光合细菌这样体积较小的细菌。 章文军 张德民 陆一平关键词:膜过滤 生物显微镜 金相显微镜 一株反硝化光合细菌的生物学特性及系统发育分析 被引量:20 2011年 【目的】养殖水体中亚硝酸盐的过量积累会对养殖生物产生毒害作用,应用脱氮细菌去除亚硝酸盐是养殖水质调控的重要手段之一,本文意在得到一株高效去除亚硝酸盐的光合细菌。【方法】采用软琼脂稀释法分离纯化光合细菌菌株,通过电镜观察、生理生化试验研究其生物学特性、依据16S rDNA和光合反应中心M亚基基因(Gene coding for photosynthetic reaction center subunit M,pufM)序列对其做系统发育分析。【结果】从淡水养殖塘中分离筛选到一株高效还原亚硝氮的光合细菌菌株wps。该菌株为革兰氏阴性菌,细胞杆状,大小为0.4-0.6μm×1.5-4.0μm,极生丛生鞭毛,片层状光合内膜,兼性厌氧光照条件生长,单菌落及液体培养物呈红色,含细菌叶绿素a和类胡萝卜素。最适生长pH范围为5.5-8.5,最适生长盐度范围为0-2%,最适生长温度范围为25℃-38℃。菌株wps与Rhodopseudomonas palustris的16S rDNA序列相似性为98.9%,光合反应中心M亚基基因序列的相似性为94.9%,但是二者在生物学性质上有较大差异,如菌株wps在pH5.5生长,不能光自养生长,不利用柠檬酸盐、甲酸盐进行光异养生长,需盐酸硫胺素和泛酸钙做生长因子等。【结论】菌株wps可能为Rhodopseudomonas属的一个新种,且在养殖水体水质调控中具有重要应用前景。 陈慧 张德民 王龙刚 潘志崇关键词:光合细菌 红假单胞菌 亚硝酸盐 反硝化 富营养水体中2种水生植物的根际微生物群落特征 被引量:30 2010年 选取宁波市城区内河2个营养类型水体日湖(中-富营养类型)和卧彩江(重富营养类型),于2008年8~11月,利用MIDI Sherlock MIS系统和其他传统方法,跟踪监测了2个水体内2种常见水生净化植物粉绿狐尾藻(Myriophyllum aquaticum)、喜旱莲子草(Alternanthera philoxeroides)根际微生物的种类、数量及其季节变化,分析了水体主要水质参数、水体微生物与植物根际微生物之间的相关性.结果表明,水生植物根际效应显著,不同月份植物根际微生物数量均要显著高于水体环境;植物种类对植物根际微生物影响显著,在日湖水体,狐尾藻根际微生物数量要显著高于喜旱莲子草;在卧彩江,2种植物根际细菌数量无显著差异,放线菌、真菌数量差异显著,植物根际微生物数量与水体环境因子之间具有一定的相关性,调查期间,日湖水温、TN、TP、Chla与植物根际微生物数量间均无显著相关,仅COD与喜旱莲子草根际细菌数量显著负相关;在卧彩江,TP与粉绿狐尾藻、喜旱莲子草根际放线菌数量显著负相关,其余水质参数与根际微生物数量均无显著相关.植物根际优势菌种以假单胞菌属(Pseudomonas)、微球菌属(Micrococcus)、黄杆菌属(Chryseobacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)等有机物降解微生物为主,环境因素的变化和植物种类的不同也导致了葡萄球菌属(Staphylococcus),食酸菌属(Acidovorax)、节杆菌属(Arthrobacter)等特有菌种的出现.对植物根际微生物群落结构进行聚类分析表明,除日湖喜旱莲子草根际微生物群落结构在夏、秋两个季节相似性较高外,其余几个处理的根际微生物群落结构相似性在21.60%~51.57%.日湖植物根际微生物多样性夏季高于秋季,而卧彩江中夏季低于秋季;日湖中2种植物之间无论夏秋均无显著差异,而在卧彩江,夏季喜旱莲子草要显著高于粉绿狐尾藻,秋季则完全相反,据此说明植物根际微生物多样性受水� 陆开宏 胡智勇 梁晶晶 朱津永关键词:富营养水体 喜旱莲子草 根际微生物 群落结构 多花黑麦草对不同形态氮的吸收动力学特征研究 被引量:4 2010年 采用改进常规耗竭法,比较研究了多花黑麦草(Lolium multiflorum Lam. )对NH4^+和NO3^-吸收动力学特征。结果表明多花黑麦草对NH4^+和NO3^-吸收符合Miehaelis-Menten方程,它对NH4^+的亲和力显著大于对NO3^-的亲和力,但对NH4^+和NO3^-的最大吸收速率差异不显著,说明多花黑麦草偏爱吸收NH4^+,在实际污水净化过程中,多花黑麦草具有优先吸收NH4^+的趋势,若有足够的停留时间,其对NH4^+净化程度会更高些;当吸收系统微生物受抑制时,多花黑麦草对NO3^-的吸收速率明显降低,亲和力明显提高,可见微生物对吸收体系中氮素的去除有一定促进作用。 谢丽凤 陆开宏 胡智勇 张克鑫 刘夏松关键词:多花黑麦草 铵态氮 硝态氮 吸收动力学 封闭循环养殖系统中β变形菌亚纲氨氧化细菌的引物特异性 被引量:1 2011年 【目的】为探讨4对不同的引物对封闭循环养殖系统生物膜中β变形菌亚纲氨氧化细菌(β-AOB)的特异性差异。【方法】采用16S rDNA文库克隆技术对β-AOB的多样性进行了分析。【结果】以引物CTO189f/CTO654r扩增构建的文库中所含β-AOB比例最高,可达67.3%。不同封闭循环养殖系统的生物膜对引物的扩增效率有明显的影响,其中以养殖尼罗罗非鱼的封闭循环养殖系统生物膜为DNA来源的,引物均有较高的扩增效率。【结论】针对封闭循环养殖系统生物膜中的β-AOB,特异性最高的是CTO189f/CTO654r引物。 裴芳芳 朱鹏 闵航 陆开宏 叶央芳关键词:RDNA 克隆文库 根际微生物在污染水体植物修复中的作用 被引量:50 2010年 综述了近年来国内外有关水生植物根际微生物在污染水体和湿地修复中的作用研究成果,深入探讨了植物修复的机理。指出水生植物对污染环境的修复主要依赖环境、水生植物和微生物以及三者之间的联合作用,植物和微生物的耦合作用是水生植物应用于水体修复的重要机制。人工湿地对氮的去除主要通过微生物的硝化-反硝化作用途径;根际微生物和植物的联合作用可以改变磷的存在形态,从而加速磷的去除;在有机物和重金属污染环境中,根际微生物通过增强植物对环境的适应性促进污染物的去除。 胡智勇 陆开宏 梁晶晶关键词:水污染 植物修复 根际微生物 粉绿狐尾藻和凤眼莲对不同形态氮吸收动力学研究 被引量:23 2011年 采用改进常规耗竭法,研究了粉绿狐尾藻(Myriophyllum aquaticum)、凤眼莲(Eichhornia crassipes)在抑菌和非抑菌两种处理中对NO3-、NH+4吸收的动力学特征。结果表明:两种植物对NO3-和NH+4的最大吸收速率(Imax)和亲和力(1/Km)有显著差异,凤眼莲对NO3-、N H+4的吸收速率显著高于狐尾藻,说明凤眼莲更适宜用于污染水体养分的去除;不同植物对NO3-、NH+4表现出吸收偏好性,凤眼莲对NO3-有较高的Imax值和亲和力,而狐尾藻对NH+4有较高的Imax值和亲和力;抑菌处理能显著增加凤眼莲对NH4+的吸收速率,NO3-浓度高于1.00 mmol/L时,抑菌处理能显著减小凤眼莲对NO3-的吸收速率,狐尾藻对NO3-、N H4+的吸收未受到抑菌处理的显著影响。 金春华 陆开宏 胡智勇 谢丽凤 梁晶晶 张春景关键词:凤眼莲 氮 吸收动力学