陕西省自然科学基金(2007C260)
- 作品数:4 被引量:32H指数:2
- 相关作者:张秀敏李侠郝建峰隋延仿胡沛臻更多>>
- 相关机构:第四军医大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- PHA-CD3AK细胞的体外诱导及其生物学特性初步研究被引量:2
- 2010年
- 目的:研究PHA-CD3AK细胞的体外诱导方法及其生物学特性,并与LAK细胞进行比较。方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),采用植物血凝素(PHA)、单克隆抗体(anti-CD3McAb)和基因重组人白细胞介素2(rhIL-2)、共同诱导制备PHA-CD3AK细胞;应用流式法分析PHA-CD3AK细胞的免疫表型、乳酸脱氢酶法(LDH)检测PHA-CD3AK细胞的杀伤活性,并观察其形态;吉姆萨染色法观察其核型。结果:微量anti-CD3McAb(0.05μg/ml)辅以少量rhIL-2(300U/ml)和PHA(100μg/ml)共同培养,即能诱导和大量扩增PHA-CD3AK细胞,其扩增倍数显著高于LAK细胞,维持高扩增的时间也远较LAK细胞持久;当效靶细胞比为80:1时,PHA-CD3AK细胞对体外肿瘤细胞(K562)杀伤的百分率为56.5%;免疫表型检测PHA-CD3 AK细胞中CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞的比率分别为(86.5±5.89)%、(38.20±5.27)%、(42.63±3.50)%;核型为正常二倍体,染色体数目为46条。结论:PHA-CD3AK细胞是以CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞为主的异质细胞群,并具有淋巴母细胞样特征,PHA-CD3AK细胞为正常二倍体细胞。PHA-CD3AK细胞是易于体外诱导、扩增能力强,体外存活时间长、杀瘤活性高的一种具有广阔应用前景的肿瘤过继免疫效应细胞。
- 郝建峰夏禾爱田敏张秀敏
- 关键词:体外诱导生物学特性
- PHA-CD3AK细胞的制备及其对恶性肿瘤的疗效被引量:2
- 2010年
- 目的:探讨植物血凝素(PHA)、抗CD3单克隆抗体(anti-CD3McAb)和rhIL-2共同诱导的PHA-CD3AK(PHA-CD3McAb actinated killer cell)细胞的临床应用质量控制,及其对恶性肿瘤的疗效。方法:选取陕西省友谊医院肿瘤生物诊疗科53例中晚期肿瘤患者(宫颈癌9例,肺癌6例,肾癌6例,非霍奇金淋巴瘤5例,肝癌5例,胃癌7例,食道癌5例,恶性黑素瘤5例,直肠癌5例),分离患者外周血单个核细胞,加入PHA、anti-CD3McAb、rhIL-2体外诱导制备自体PHA-CD3AK细胞。质量控制检测细胞数量和活细胞比例、细胞毒活性、内毒素和感染源,流式细胞术检测免疫表型。将检测合格的自体PHA-CD3AK细胞静脉回输至患者体内,每2d回输1次,每疗程6次,共2个疗程,观察治疗效果和不良反应。结果:制备的PHA-CD3AK细胞符合预期免疫活性细胞质控的各项要求。治疗后患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞和CD16+56+细胞(NK细胞)比例分别为(49.36±9.21)%、(34.85±4.35)%、(29.20±5.12)%和(21.15±6.50)%,较治疗前均显著升高(均P<0.05)。大部分患者治疗后全身症状明显改善(43/53),其中完全缓解6例、部分缓解14例、微效10例、稳定14例、进展9例,总有效率达56.6%,临床受益率达83.0%。所有患者治疗后相关化验指标均未出现异常变化,也未出现明显的全身毒性反应。结论:PHA-CD3AK细胞制剂质量控制指标切实可行,其对恶性肿瘤的疗效确切,并能有效提高患者的免疫功能。
- 郝建峰夏禾爱田敏全红艳张秀敏
- 关键词:恶性肿瘤过继免疫治疗
- DC-CIK细胞的制备及其对恶性肿瘤的疗效观察被引量:29
- 2013年
- 目的:探索DC-CIK细胞应用于临床的质量控制及对恶性肿瘤的疗效。方法:选取陕西省友谊医院肿瘤生物诊疗科中晚期恶性肿瘤患者33例(恶性黑色素瘤3例,肠癌4例,肺癌5例,胃癌3例,食管癌4例,宫颈癌7例,肾癌7例)。采集患者外周血分离PBMC,诱导DC-CIK细胞,并扩增培养。质控检测细胞数量和活细胞比例、细胞毒活性、感染源、流式细胞术检测免疫表型。将检测合格后的DC-CIK细胞分5次静脉回输入患者体内,每2天回输一次,每疗程5次,共2个疗程,观察治疗效果和不良反应。结果:经诱导后的DC-CIK细胞符合预期免疫活性细胞质控的各项要求。33例患者经治疗后,完全缓解3例,部分缓解17例,稳定9例,进展4例。总有效率60.6%,临床受益率87.8%。治疗后患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD3+CD56+T细胞比例分别为(60.25±7.75)%、(29.76±3.85)%、(30.25±4.35)%和(18.20±4.30)%,较治疗前均明显增高(P均<0.05)。生活质量KPS评分较治疗前明显上升(P<0.01)[(75.3±7.6)分vs(58.5±6.2)分]。无严重不良反应和化验指标异常。结论:DC-CIK细胞制剂质量控制指标切实可行,对恶性肿瘤有较好的临床疗效,并能有效增强患者的免疫功能。
- 夏禾爱郝建峰陈玲田敏刘丹全红艳雷锐利
- 关键词:DC-CIK细胞恶性肿瘤
- 自体CD3AK细胞过继免疫治疗晚期恶性肿瘤的临床观察被引量:1
- 2009年
- 目的观察抗CD3单克隆抗体(anti-CD3 mAb)激活的杀伤细胞(CD3AK)过继免疫治疗晚期恶性肿瘤的疗效。方法从51例恶性肿瘤患者自体外周血分离单个核细胞,加入anti-CD3mAb、重组人IL-2(rhIL-2)体外诱导后扩增培养,制备自体CD3AK细胞。待细胞培养至第10~12天时取样用于质控检测。收集质控检测合格的CD3AK细胞,调整至终浓度为(4.0~6.0)×109/L,静脉回输至患者体内,每例患者治疗3个疗程,每疗程回输5次(每2d回输1次),每次回输细胞数不低于1×109,每疗程回输细胞总数大于5×109。应用人T细胞亚群检测试剂盒和流式细胞仪测定治疗前后患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞以及CD16+56+细胞(NK细胞)比例;观察治疗前后患者的相关化验指标、生活质量以及不良反应;评定疗效,计算有效率和临床受益率。结果分离制备的CD3AK细胞符合理想活性细胞质量要求,可用于进一步实验治疗。CD3AK细胞过继免疫治疗后,患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞以及CD16+56+细胞(NK细胞)比例分别为(48.88±9.42)%、(35.09±4.11)%、(28.17±4.97)%、(20.31±6.98)%]均显著升高(均P<0.05)。51例患者中,45例患者治疗后全身症状改善明显;所有患者治疗后相关化验指标均未出现异常变化,也未出现其他全身毒副反应;其中完全缓解6例、部分缓解14例、微效11例、稳定12例、进展8例,总有效率达60.8%,临床受益率达84.3%。结论CD3AK细胞过继免疫治疗恶性肿瘤疗效确切、安全且无副作用,能有效改善和提高患者的机体免疫功能。
- 郝建峰张秀敏胡沛臻李侠隋延仿
- 关键词:肿瘤杀伤细胞