山东省自然科学基金(Q2006D08)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：王振明董俊红黄焕生王平付新华更多>>
- 相关机构：潍坊市人民医院潍坊医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 核糖核酸干扰沉默survivin基因对A549细胞增殖及顺铂敏感性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响。方法:将靶向survivin的基因片段插入带有绿色荧光蛋白基因的载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR分析转染前后survivin mRNA的表达情况,免疫荧光及Western blot分析转染前后survivin蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化。结果:成功构建pGenesil1。1-survivin重组质粒。与对照组相比,转染重组质粒后,survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为65%和71%;细胞凋亡率增加;转染前顺铂对A549细胞的IC50为转染后的7.68倍,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:靶向survivin的RNA干扰表达载体能下调survivin基因表达,增强A549细胞对顺铂药物敏感性。
- 董俊红王振明王平肖琳黄焕生
- 关键词：SURVIVIN顺铂肺腺癌细胞
- shRNA对A549细胞survivin基因表达及紫杉醇敏感性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察靶向survivin基因的短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)对人肺腺癌细胞A549生物学行为及紫杉醇敏感性的影响。方法将靶向survivin的基因片段插入载体后构建重组质粒,用转染试剂FuGENE(HD将其导入A549细胞,RT-PCR及Western blot分析转染前后survivin基因的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对紫杉醇的敏感性变化。结果成功构建重组质粒。与对照组相比,转染重组质粒后,survivin基因的表达明显降低,细胞凋亡率增加。转染前紫杉醇抑制A549细胞的IC50为转染后的11.9倍,两者比较,差异有显著性(P<0.05)。结论靶向survivin的shRNA能下调survivin基因表达,诱导细胞凋亡,增强A549细胞对紫杉醇的敏感性。
- 董俊红王振明付新华王守训黄焕生
- 关键词：SHRNASURVIVIN紫杉醇肺腺癌细胞
- RNAi技术对人肺腺癌细胞A549内源Survivin基因表达的影响
- 2009年
- 目的为Survivin介导的肿瘤基因沉寂疗法的临床应用提供依据。方法应用RNA干扰技术(RNAi)将靶向Survivin的基因片段插入载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,MIT法检测转染前后A549细胞增殖情况,RT-PCR及Western blot法分析转染前后Survivin mRNA和蛋白表达情况。结果成功构建重组质粒pGene-sil1.1-Survivin。转染重组质粒后Survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为65%和71%,细胞增殖受抑。结论RNAi技术构建的重组质粒可明显抑制A549细胞内源Survivin的表达和mRNA转录,其在肿瘤基因沉寂疗法中可能起重要作用。
- 董俊红王振明孙洪亮王平
- 关键词：SURVIVIN基因人肺腺癌细胞
- RNAi技术对A549细胞survivin基因表达及顺铂敏感性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的利用RNA干扰(RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响。方法将靶向survivin的基因片段插入到载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR及免疫荧光法分析转染前后A549细胞survivin mRNA及蛋白的表达情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化。结果成功构建pGenesil1.1-survivin重组质粒。转染重组质粒后,A549细胞survivin mRNA和蛋白的表达明显降低;转染前顺铂对A549细胞的IC50明显高于转染后(P<0.05)。结论靶向survivin的RNAi表达载体能下调survivin基因表达,增强顺铂对A549细胞的药物敏感性。
- 董俊红王振明肖琳王平
- 关键词：RNA干扰SURVIVINA549细胞顺铂
- RNAi沉默survivin表达对A549细胞凋亡及紫杉醇敏感性的影响被引量：7
- 2010年
- 目的利用RNAi(RNA interference,RNAi)沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549凋亡以及紫杉醇药物敏感性的影响。方法构建重组质粒,将其导入A549细胞,检测转染前后survivin的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对紫杉醇的敏感性变化。结果成功构建重组质粒。转染重组质粒后,survivin表达明显降低;细胞凋亡率增加。转染前紫杉醇对A549细胞的IC50为转染后的11.9倍,P<0.05。结论构建的重组质粒能有效抑制survivin基因表达,诱导细胞凋亡,增强A549细胞对紫杉醇的敏感性。
- 董俊红王振明付新华王守训黄焕生
- 关键词：SURVIVIN紫杉醇肺腺癌细胞
