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国家自然科学基金(30870932)

作品数:9 被引量:17H指数:3
相关作者:白波陈京刘海青李雅林刘有旺更多>>
相关机构:泰山医学院济宁医学院山东农业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 2篇会议论文

领域

  • 10篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇APELIN
  • 3篇细胞
  • 3篇HEK293...
  • 3篇RECEPT...
  • 2篇心血管
  • 2篇血管
  • 2篇血管生成
  • 2篇真核
  • 2篇真核表达
  • 2篇真核表达载体
  • 2篇神经系
  • 2篇神经系统
  • 2篇核表达
  • 2篇阿片
  • 2篇阿片受体
  • 2篇SIGNAL...
  • 2篇P
  • 1篇心血管功能
  • 1篇心血管系统
  • 1篇血管功能

机构

  • 8篇泰山医学院
  • 7篇济宁医学院
  • 4篇山东农业大学
  • 1篇华威大学

作者

  • 8篇白波
  • 6篇陈京
  • 4篇刘有旺
  • 4篇李雅林
  • 4篇刘海青
  • 3篇路海
  • 3篇于鹏丽
  • 1篇张秋玲
  • 1篇蔡欣
  • 1篇陈鹏
  • 1篇宋文刚
  • 1篇张敬美
  • 1篇杜辉
  • 1篇李金国

传媒

  • 2篇第四军医大学...
  • 1篇医学综述
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇Journa...
  • 1篇Chines...
  • 1篇医学研究杂志
  • 1篇中华临床免疫...
  • 1篇中华行为医学...

年份

  • 2篇2011
  • 2篇2010
  • 7篇2009
9 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
pRluc-hKOR-pcDNA3.1真核重组质粒的构建及在HEK293细胞中的表达被引量:5
2009年
目的:构建与海肾荧光素酶(renilla luciferase,Rluc)融合的人κ型阿片受体(kappa opioid receptor,KOR)的真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法检测人KOR与其它受体间的相互作用。方法:以质粒pcD-NA3.1-hKOR为模板,PCR方法扩增人KOR。扩增的人KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这2种酶双酶切质粒pRluc-pcDNA3.1。然后将这2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10。挑取菌落培养,提取质粒,然后进行酶切鉴定,最后进行测序。将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(human embryonic kidney293,HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察。结果:扩增出了1条约1.2kb的片段,与预期的人KOR大小相符,质粒酶切结果显示重组质粒pRluc-hKOR-pcDNA3.1被切成2条片段,其中1条为pRluc-pcDNA3.1载体大小,另1条为目的片段大小。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源。共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上。结论:构建成功了pRluc-hKOR-pcDNA3.1重组真核表达载体,此表达载体可用于检测人KOR与其它受体之间的相互作用。
李雅林白波陈京刘有旺刘海青路海
关键词:HEK293细胞
Apelin/APJ系统研究进展被引量:5
2009年
Apelin肽家族是由单个基因编码并能够激活7次跨膜G蛋白偶联受体APJ的一组内源性活性肽.Apelin/APJ系统在心血管调节中具有降低血压、强的心脏收缩作用;在中枢神经系统中具有调节垂体激素释放、调节摄食、摄水、体液平衡等作用;作为脂肪细胞分泌的一个新的脂肪因子(adipo-kine),可调节胰岛素的分泌;而且,最新的研究表明,apelin能够促进血管的生成.Apelin/APJ系统有望成为心衰、高血压等心血管疾病以及肥胖相关疾病的治疗靶点.这篇综述的目的是总结apelin/APJ系统的特点及功能,为进一步研究该系统提供理论依据和线索,为开发新的治疗性的药物提供有吸引力的靶点.
李雅林白波陈京刘有旺
关键词:APELIN脂肪因子血管生成心血管系统中枢神经系统
阿片及其受体对免疫系统影响的研究进展被引量:3
2009年
阿片既有强大的镇痛作用,又能产生明显的欣快感觉及成瘾作用。长期使用阿片样物质或阿片依赖成瘾患者免疫功能普遍低下,人类免疫缺陷病毒的感染率、肿瘤的发生和转移率均有所增加。在免疫细胞中也存在相应的阿片受体,同时免疫细胞也能分泌某些阿片肽。现就阿片及其受体对免疫系统的影响予以综述。
路海白波宋文刚
关键词:阿片阿片受体免疫系统
Construction of the C terminus potent phosphorylation sites mutants of human apelin receptor
<正>Objective To study the relationship between structure and function of human APJ,we build C-terminal deletio...
Hui DU~(1,3),Bo BAI~(1,2,*),Jing CHEN~2,Ya-Lin LI~(1,3),Hai-Qing LIU~3,Peng-Li YU~3 1 Life Sciences college,Shandong Agricultural University,Taian 271000 2 Jining Medical medical university,Jining 272013 3 Institute of neurobiology of Tai shan Medical university,Taian 271000
关键词:APELINAPJ
文献传递
pRluc-KOR真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
2009年
目的:构建与海肾萤光素酶(Rluc)融合的κ型阿片受体(KOR)真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法(BRET)检测apelin受体和KOR之间的相互作用.方法:以质粒pcDNA3.1-KOR为模板,PCR方法扩增KOR.扩增的KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pRluc.将这两种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10.挑取菌落培养,提取质粒,行酶切鉴定及测序.将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察.结果:扩增出了1条1143 bp的片段,与预期的KOR大小相符,质粒酶切结果显示pRluc-KOR被切成2条片段,其中一条为pRluc载体大小,另一条为目的片段大小.经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源.共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上.结论:构建成功了pRluc-KOR重组表达载体,此表达载体可用于检测KOR与apelin受体或与其他受体之间的相互作用.
李雅林白波陈京刘有旺刘海青于鹏丽
关键词:真核表达载体
Construction of the Subtracted cDNA Library of Striatal Neurons Treated with Long-term Morphine被引量:1
2011年
Objective To construct a morphine tolerance model in primarily cultured striatal neurons, and screen the differentially expressed genes in this model using suppression subtractive hybridization (SSH). Methods Sbtracted cDNA libraries were constructed using SSH from normal primarily cultured striatal neurons and long-term morphine treated striatal neurons (10^-5 mol/L for 72 hours). To check reliability of the cell culture model, RT-PCR was performed to detect the cAMP-responsive element-binding protein (CREB) mRNA expression. The subtracted clones were prescreened by PCR. The clones containing inserted fragments from forward libraries were sequenced and submitted to GenBank for homology analysis. And the expression levels of genes of interest were confirmed by RT-PCR. Results CREB mRNA expression showed a significant increase in morphine treated striatal neurons (62.85± 1.98) compared with normal striatal neurons (28.43 ± 1.46, P〈0.01). Thirty-six clones containing inserted fragments were randomly chosen for sequence analysis. And the 36 clones showed homology with 19 known genes and 2 novel genes. The expression of 2 novel genes, mitochondrial carrier homolog 1 (Mtchl ; 96.81±2.04 vs. 44.20±1.31, P〈0.01) and thyrnoma viral proto-oncogene 1 (Akt1 ; 122.10±2.17 vs 50.11±2.01, P〈0.01), showed a significant increase in morphine-treated striatal neurons compared with normal striatal neurons. Conclusions A reliable differential cDNA library of striatal neurons treated with long-term morphine is constructed. Mtchl and Aktl might be the candidate genes for the development of morphine tolerance.
Bo BaiHai-qing LiuJing ChenYa-lin LiHui DuHai LuPeng-li Yu
关键词:NEURON
pEGFP-hApelin-R重组真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
2009年
目的构建与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGEP)融合的人apelin受体(Apelin receptor,apelin-R)真核表达载体。方法以质粒pcDNA3.1-hApelin-R为模板,PCR方法扩增人apelin受体。扩增的人apelin受体用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒peGFP-C1。然后将两种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10。挑取菌落培养,提取质粒,然后进行酶切鉴定,最后进行测序。将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(human embryonic kidney293,HEK293)细胞,共聚焦显微镜观察。提取转染细胞的总蛋白,进行Westernblot检测。结果扩增出一条约1200bp的片段,与预期的apelin受体大小相符。酶切结果显示,重组质粒pEGFP-hApelin-R被切成两条片段,其中一条为peGFP-C1载体大小,另一条为目的片段大小。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_005161)中的序列高度同源。共聚焦显微镜观察显示,人apelin受体主要在细胞膜上表达。Westernblot结果显示在相对分子质量69000处有一蛋白条带,与预期大小相符。结论构建成功pEGFP-hApelin-R重组表达载体,此表达载体可用于检测apelin受体和κ型阿片受体(kappa opioid receptor,KOR)或与其他受体间的相互作用。
李雅林白波陈京刘有旺杜辉刘海青于鹏丽
关键词:真核表达载体HEK293细胞
大鼠尾核内Apelin的痛觉调制作用及其机制的实验研究被引量:5
2010年
目的探究Apelin在尾核内对大鼠的痛觉调制作用及其可能的作用机制。方法采用辐射热作为伤害性刺激,以安静状态下大鼠的甩尾潜伏期(TFL)为测痛指标,尾核内注射Apelin、吗啡、纳洛酮等,观察给药90min内Apelin的痛觉调制作用及其对吗啡中枢镇痛作用的影响。检测给药40min后大鼠尾核组织和血浆中cAMP与cGMP水平,探究Apelin在痛觉调制过程中可能的作用机制。结果Apelin有显著的痛敏作用,在10^-4mol/L时作用最显著,给药10min后大鼠痛阈下降[(-9.22±1.26)%],40min后痛阈下降至最低[(-16.95±1.46)%],分别与生理盐水组[(-0.32±1.2)%、(0.17±0.80)%]比较有统计学意义(P〈0.01);大鼠尾核内微量注射吗啡后再注射Apelin,结果表明Apelin能抑制吗啡的中枢镇痛作用(P〈0.01);大鼠尾核内注射Apelin后,尾核cAMP含量为(14.08±2.25)nmol/g,血浆cAMP含量为(19.94±4.43)nmol/L,分别与生理盐水组[(133.05±20.41)nmol/g、(38.66±6.73)nmol/L]比较,有非常显著的统计学意义(P〈0.01)。结论Apelin有中枢痛敏作用,这种痛敏作用可能与阿片系统有某种内在联系并通过细胞内第二信使cAMP发挥效应。
张敬美白波张秋玲李金国刘海青陈鹏路海
关键词:APELIN尾核痛觉过敏环磷酸腺苷
Heterodimerization and function analysis of human apelin receptor and kappa opioid receptor
<正>Objective Increasing evidence suggests that G protein-coupled receptors(GPCRs) form functional dimers or la...
Ya-Lin LI~1
关键词:HETERODIMERIZATION
apelin在血管生成中的作用
2010年
于鹏丽白波陈京
关键词:APELIN血管生成神经系统疾病生物学效应心血管功能水盐平衡
共2页<12>
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