河南省科技攻关计划(0624410079)
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
- 相关作者：吴逸明张巧吴卫东程书钧时松和更多>>
- 相关机构：郑州大学中国医学科学院北京协和医学院武汉科技大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省卫生厅医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- Rap2b基因表达对NIH3T3细胞集落形成及细胞伤口愈合能力的影响被引量：1
- 2010年
- 目的了解Rap2b基因对NIH3T3细胞集落形成及细胞伤口愈合能力的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据。方法以人肺CDNA为模板克隆出Rap2b基因片段,构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,稳定转染NIH3T3细胞,利用集落形成试验和细胞伤口愈合试验,观察细胞集落形成及细胞伤口愈合能力的改变。结果与转染空质粒的细胞对比,转染pcDNA3.1-Rap2b质粒的细胞集落形成数目明显增加(P<0.01),损伤修复愈合增快。结论 Rap2b基因表达可显著增加NIH3T3细胞集落形成,并增快该细胞的损伤愈合速度。提示Rap2b基因表达可能具有促进NIH3T3细胞增殖和恶性转化功能。
- 张巧段丽菊徐红辉袁劲松吴卫东吴逸明高燕宁程书钧
- 关键词：NIH3T3细胞真核表达载体
- Zn^(2+)对人Ⅱ型肺泡上皮A549细胞IL-8和TNF-α mRNA和蛋白表达水平的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究Zn2+对人Ⅱ型肺泡上皮细胞炎性细胞因子IL-8和TNF-α mRNA和蛋白表达水平的影响。方法用含0、50、100和250μmol/L Zn2+的F-12培养基培养人Ⅱ型肺泡上皮A549细胞,分别于3h和24h用RT-PCR半定量IL-8和TNF-α mRNA表达量,用RIA测定培养上清液中IL-8和TNF-α蛋白浓度。结果A549细胞染Zn2+3h时A549细胞以浓度依赖方式高表达IL-8和TNF-α mRNA和蛋白;24h时IL-8和TNF-α蛋白表达量进一步增高,IL-8 mRNA表达下降,TNF-α mRNA继续保持高表达。结论Zn2+显著提高A549细胞IL-8和TNF-α表达量,Ⅱ型肺泡上皮细胞可能是Zn2+导致的呼吸系统损伤中炎性细胞因子的重要来源。
- 张巧杨海军吴卫东时松和徐玉宝姚武吴逸明
- 关键词：ZN^2+A549细胞白细胞介素-8
- 氧化锌对人Ⅱ型肺泡上皮细胞IL-6、IL-8和TNF-α表达的影响被引量：3
- 2008年
- 目的初步探讨前炎性细胞因子在氧化锌引起的呼吸系统炎性损伤和金属烟尘热综合征中的作用。方法通过体外培养的人肺泡Ⅱ型上皮A549细胞,使用不同浓度氧化锌颗粒(0、50、100、250和500μmol/L)不同时间(0、3和24 h)处理,从mRNA和蛋白质水平上分析受试物能否诱导A549细胞表达IL-6、IL-8和TNF-α促炎性细胞因子。结果氧化锌可以诱导人肺泡Ⅱ型上皮细胞IL-6,IL-8,TNF-α高表达。结论在氧化锌引起的呼吸系统疾患和金属烟尘热综合征中,人Ⅱ型肺泡上皮细胞可能是促炎性细胞因子的重要来源。
- 张巧高丽霞杨海军朱敦彦时松和范清堂吴卫东吴逸明
- 关键词：A549细胞白细胞介素-6白细胞介素-8肿瘤坏死因子-Α
- Rap2b基因真核表达载体构建及其对NIH3T3细胞P38通路的影响被引量：1
- 2010年
- 目的构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,以外源基因Rap2b转染NIH3T3细胞,以了解该基因对NIH3T3细胞AKT、ERK、JNK和P38信号转导通路的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据。方法构建人Rap2b真核表达载体pcDNA3.1-Rap2b并稳定转染NIH3T3细胞,利用Western blot方法对转染的细胞进行AKT、ERK、JNK和P38磷酸化蛋白及总蛋白表达水平检测。结果转染pcDNA3.1-Rap2b质粒的细胞与转染空质粒pcDNA3.1的细胞相比,其AKT、ERK、JNK磷酸化蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),而P38磷酸化蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。结论 Rap2b基因外源性高表达可能对P38通路有活化作用,对JNK、ERK、AKT通路无活化作用。
- 张巧邢瑞婷徐红辉袁劲松李春阳吴卫东吴逸明程书钧
- 关键词：NIH3T3细胞真核表达载体信号转导通路
- 肺癌组织中RAP2B的表达被引量：5
- 2007年
- 背景与目的:探讨肺癌组织及其癌旁组织中RAP2B的表达及其意义。材料与方法:以β-actin为内参,运用半定量RT-PCR技术检测30例肺癌组织及其癌旁组织RAP2B mRNA的表达水平。用Western-blot方法检测RAP2B蛋白的表达。结果:①肺癌组织中RAP2B mRNA的阳性表达率为73.3%(22/30),在癌旁组织中的阳性表达率为30.0%(9/30),两者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。RAP2B mRNA在癌组织的相对表达量为0.155(0.000～0.530),在癌旁组织的相对表达量为0.000(0.000～0.160),两者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。②RAP2B蛋白在肺癌组织中的检出率为80.0%(24/30),在癌旁组织的检出率为60.0%(18/30),两者间的差异无统计学意义(P>0.05)。RAP2B蛋白在癌组织的相对表达量为0.195(0.050～0.580),在癌旁组织的相对表达量为0.030(0.000～0.180),两者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:RAP2B的过表达可能是肿瘤发生的一个重要标志,在肿瘤的发生发展过程中可能有重要作用。
- 张巧陈景涛吴卫东袁劲松程书钧吴逸明
- 关键词：肺癌RT-PCRWESTERNBLOT
- Rap2b基因真核表达载体构建及其对NIH3T3细胞P38通路的影响
- 目的构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,以外源基因Rap2b转染NIH3T3细胞,以了解该基因对NIH3T3细胞AKT、ERK、JNK和P38信号传导通路的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据。方...
- 张巧邢瑞婷徐红辉袁劲松李春阳吴卫东吴逸明程书钧
- 关键词：NIH3T3细胞真核表达载体信号传导通路
- 文献传递
- 表皮生长因子受体及PI3K在硫酸锌诱导人呼吸道上皮细胞间粘附分子-1表达过程中的作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨硫酸锌对上皮细胞内细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响及其分子生物学机制。方法应用PCR与蛋白质免疫印迹试验检测硫酸锌诱导人呼吸道上皮细胞ICAM-1mRNA与蛋白的表达,以及表皮生长因子受体(EGFR)及PI3K的活化。结果硫酸锌可诱导ICAM-1mRNA与蛋白的过量表达。在同一试验条件下,硫酸锌可诱发EGFR及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)下游激酶Akt的磷酸化或活化。用EGFR抑制剂(PD153035)及PI3K抑制剂(LY294002)预处理上皮细胞,可明显抑制硫酸锌对ICAM-1表达的诱导作用。结论硫酸锌可激活EGFR与PI3K/Akt信号传导通路,进而上调ICAM-1的表达。
- 张巧吴卫东张同存时松和徐玉宝姚武吴逸明
- 关键词：细胞间粘附分子-1锌离子呼吸道上皮细胞
