国家教育部博士点基金(200801260002) 作品数:6 被引量:15 H指数:3 相关作者: 郝金凤 哈斯阿古拉 高峰 牛一丁 怡荣 更多>> 相关机构: 内蒙古大学 内蒙古民族大学 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
抑制性差减杂交法分离鉴定甜瓜果实呼吸跃变过程中特异表达基因 果实成熟是高等植物生命周期中的一个重要环节,而呼吸跃变是果实成熟过程中特有的重要生理现象,是果实从成熟到衰老的转折期。为阐明甜瓜果实呼吸跃变的分子机理,本研究以典型的呼吸跃变型甜瓜品种河套蜜瓜为研究对象,采用抑制性差减杂... 高峰 郝金凤 巴德仁贵 姚远 张立全 牛一丁 哈斯阿古拉关键词:甜瓜 呼吸跃变 抑制性差减杂交 特异表达基因 文献传递 Identification of Differentially Expressed Genes During Ethylene Climacteric of Melon Fruit by Suppression Subtractive Hybridization 2013年 Melon (Cucumis melo L.) is an important horticultural crop worldwide. Ethylene regulates the ripening process and affects the ripening rate. To screen genes that are differentially expressed at the burst of ethylene climacteric in melon fruit, we performed suppression subtractive hybridization (SSH) to generate forward and reverse libraries, for which we sequenced 439 and 445 clones, respectively. Our BLAST analysis showed that the genes from the 2 libraries were involved in metabolism, signal transduction, cell structure, transcription, translation, and defense. Six genes were analyzed by qRT-PCR during the differential developmental stage of melon fruit. Our results provide new insight into the understanding of climacteric ripening of melon fruit. GAO Feng NIU Yi-ding HAO Jin-feng BADE Rengui ZHANG Li-quan HASIAgula甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1 cDNA的克隆及表达特性分析 被引量:3 2013年 乙烯感知和信号转导的初始成分是乙烯受体,为探明甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1在甜瓜果实成熟过程中的作用,以甜瓜品种河套蜜瓜为材料,根据GenBank中登录的甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1的cDNA序列(登录号为AF054806),设计合成特异性引物,采用RT-PCR技术克隆得到Cm-ETR1基因全长cDNA序列,提交到GenBank中(登录号为EF495185)。序列分析表明,序列长度为2 256 bp,编码区为2 223 bp,编码740个氨基酸,与已报道的cantalupenis甜瓜ETR1基因的cDNA序列完全一致。Cm-ETR1蛋白的系统进化树分析结果表明,该乙烯受体蛋白在各物种间高度保守,与黄瓜乙烯受体蛋白相似性最高,一致性为99%,与龙眼乙烯受体蛋白相似性最低,一致性为86%。定量PCR分析结果显示,随着甜瓜果实内源乙烯合成量和成熟程度的增加,Cm-ETR1基因的表达量同步增加,在果实乙烯跃变期,Cm-ETR1的表达量也达到最高值,内源乙烯合成量与Cm-ETR1基因表达量间呈显著正相关,表明Cm-ETR1基因在甜瓜果实成熟过程中可能具有重要的作用。 陈宇杰 陈明 乌兰巴特尔 郝金凤 高峰 哈斯阿古拉关键词:甜瓜 乙烯受体 果实成熟 甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR2的克隆及其在果实发育成熟过程中表达特性的分析 被引量:4 2012年 为研究Cm-ETR2基因在甜瓜果实发育成熟过程中的作用机理,根据已报道的甜瓜(Cucumis melo)品种Cantalupensis的Cm-ETR2基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR技术从甜瓜品种河套蜜瓜(Cucumis melo L.cvHetao)成熟果实中克隆得到了乙烯受体基因Cm-ETR2 cDNA,序列分析显示,序列长度为2 304 bp,编码767个氨基酸。利用实时荧光定量RT-PCR方法,对其在河套蜜瓜果实发育成熟过程中的表达特性进行了分析,Cm-ETR2基因在15DAP至30DAP表达基本没有变化,35DAP表达量开始上升,上升趋势一直持续至45DAP,且45DAP表达量为15DAP的9倍。 郝金凤 王雪飞 怡荣 哈斯阿古拉 牛一丁关键词:甜瓜 乙烯受体 果实成熟 甜瓜Cm-EILs基因cDNA的克隆及表达特性分析 2013年 目的:克隆甜瓜Cm—E瓜基因cDNA,并分析甜瓜果实发育过程中的表达特性,为研究其功能奠定基础。方法:根据已报道的甜瓜(Cucumis melo Lcv.Andes)Cm—EIL1和Cm—EIL2基因eDNA序列设计合成特异性引物,应用RT—PCR技术从甜瓜品种河套蜜瓜(Cucumis melo Lcv.Hetao)成熟果实中克隆得到Cm—EIL1和Cm—EIL2 CDNA全长编码区序列,并通过定量PCR法检测果实不同发育时期该基因的表达特性。结果:Cm—FIL1和Cm—EIL2eDNA编码区长度分别为2082bp和1848bp。核苷酸序列比对分析表明,得到的cDNA序列与已报道的Andes甜瓜相应基因的cDNA序列高度同源。不同发育时期果实样品定量PCR检测结果表明,Cm—EIL1、Cm—EIL2基因在授粉后15—30d,表达水平较低,变化幅度较小,Cm-EIL1基因在35d表达量最高,Cm—EIL2基因在授粉后40d表达量最高,2个基因的表达量分别为15d的2倍和2.5倍。结论:Cm—EIL1和Cm—EIL2表达模式基本相同,并且与甜瓜果实成熟过程及乙烯生成量显著正相关,表明该基因在果实成熟过程中可能起着重要作用。 高峰 陈明 张凤英 郝金凤 哈斯阿古拉关键词:甜瓜 乙烯 甜瓜乙烯信号转导途径关键因子基因CTR1的克隆及表达特性分析 被引量:2 2011年 在拟南芥中,CTR1在乙烯信号转导途径中发挥重要的负调控作用。目前的研究表明,在拟南芥中只存在一个CTR1基因。利用RT-PCR技术从甜瓜果实中克隆得到CTR1基因cDNA(Cm-CTR1)。Cm-CTR1 cDNA全长2 613 bp,编码870个氨基酸。氨基酸序列比对和同源性分析表明,所克隆的甜瓜CTR1基因与拟南芥CTR1基因相似度为53.69%。Cm-CTR1的C-末端具有明显的类似于哺乳动物和果蝇中的Raf(retro-viral protein,V-raf)蛋白激酶家族的丝/苏氨酸蛋白激酶(Serine/threonine protein kinase)的特征。该结构具有所有已知蛋白激酶所共有的11个亚结构域,其中包括ATP结合位点和丝/苏氨酸蛋白激酶位点结构域,说明CmCTR1与其他植物CTR1相似。实时荧光定量PCR分析结果表明,从授粉后第15天到第20天,甜瓜果实Cm-CTR1基因表达量显著增加,第20天的表达量是第15天的2.5倍,之后表达水平趋于稳定,第40天到第45天表达量有所下降。 姚远 高峰 郝金凤 哈斯阿古拉关键词:甜瓜 基因表达 果实成熟 实时荧光定量PCR 甜瓜乙烯应答因子基因在果实发育成熟过程中的表达特性 被引量:7 2012年 根据已报道的甜瓜CMe-ERF1和CMe-ERF2基因cDNA序列设计合成特异性引物,应用RT-PCR技术从甜瓜品种‘河套蜜瓜’成熟果实中克隆得到CMe-ERF1和CMe-ERF2基因cDNA全长编码区序列,分别为498bp和822bp.序列比对分析表明,得到的cDNA序列与已报道的Andes甜瓜相应基因的cDNA序列完全一致.果实不同发育时期实时定量PCR检测结果表明,CMe-ERF1、CMe-ERF2基因表达与甜瓜果实成熟及乙烯生成量显著相关,表明该基因可能对果实成熟起重要作用. 高峰 怡荣 郝金凤 哈斯阿古拉 牛一丁关键词:甜瓜 乙烯