陕西省自然科学基金(2007C209)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- 生存素基因诱导人黏液表皮样癌细胞凋亡的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的 研究生存素（survivin）反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide,ASODN）对人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞的生长抑制效应及可能的作用机制,探讨生存素基因作为黏液表皮样癌基因治疗靶点的可行性.方法 设计合成靶向生存素特异性ASODN,转染Mc3细胞.将转染的Mc3细胞分为4组：空白对照组、脂质体转染组、生存素正义寡核苷酸（sense oligodeoxynucleotide,SODN）转染组、生存素ASODN转染组.转染后24、48及72 h倒置显微镜观察Mc3细胞形态学变化,甲基噻唑基四唑（MTT）法观察转染前后对细胞增殖的影响,流式细胞仪技术检测细胞凋亡率,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法分析细胞凋亡指数,半定量反转录聚合酶链反应分别检测生存素mRNA的表达.结果 生存素ASODN转染组的Mc3细胞数量明显少于其他组,脱壁悬浮细胞明显增多,可见典型凋亡改变,并呈时间依赖性.生存素ASODN转染组Mc3细胞G1～G0期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,Mc3细胞的凋亡率在转染后24、48及72 h分别为12.96%、14.43%及22.69%,明显高于其他组（P＜0.01）,并呈时间依赖性（P＜0.05）.生存素ASODN对Mc3细胞增殖抑制率分别为22.35%、39.04%、43.46%,明显高于其他组（P＜0.01）,并呈时间依赖性（P＜0.05）.生存素ASODN转染组在细胞转染后24、48及72 h Mc3的凋亡指数分别为11.038%、12.172%及18.900%,明显高于其他组（P＜0.01）,并呈时间依赖性（P＜0.05）.生存素ASODN转染组Mc3细胞生存素mRNA在24、48及72 h的相对表达量分别为0.739±0.008、0.668±0.007、0.500±0.006,相对抑制率分别为18.21%、26.06%、44.82%,明显低于其他组（P＜0.01）,并呈时间依赖性（P＜0.01）.结论 生存素ASODN可抑制人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3的生长增殖,诱导其凋亡,同时亦可抑制Mc3细胞生存素mRNA的表达,并呈时间依赖性.生存素可作为黏液表皮样癌基因�
- 齐红郭建张引成李淑薇杨荔琳
- 关键词：黏液表皮样反义细胞凋亡生存素
