国家自然科学基金(30200374)
- 作品数：6 被引量：61H指数：3
- 相关作者：张寄南陈相健杨笛孟丹冯琳更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院中国药科大学中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科委自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠心肌组织中高能磷酸化物的含量测定被引量：2
- 2004年
- 目的 建立了同步测定大鼠心肌组织中 5种高能磷酸化物含量的反相离子对高效液相色谱法 ,并观察异丙肾上腺素致害大鼠心肌损伤模型中能量代谢的变化。方法 色谱柱 :SupelcoODS C18(2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm) ;柱温 :2 3℃～ 2 5℃ ;UV检测波长 2 10nm ;流动相 :2 2 0mmol·L 1磷酸盐缓冲液 (含 3mmol·L 1四丁基氢氧化铵和 7%甲醇 ) ,pH6 5 ;流速 1 2ml·min 1和1 3ml·min 1。结果 5种能量代谢物质ATP、ADP、AMP、CrP和Cr达到良好分离 ,ATP、ADP、CrP在 10～ 10 0 μmol·L 1,AMP在 10 0～ 5 0 0 μmol·L 1,Cr在 10 0～ 10 0 0 μmol·L 1浓度范围 ,峰面积与浓度呈良好线性关系。日内和日间精密度的RSD均 <10 % ,ATP、ADP、AMP、CrP及Cr的提取回收率 (% )平均为 :97 86、10 4 38、10 0 0 0、97 6 4和 98 8。与生理盐水组相比 ,ISO致害大鼠心室组织中ATP含量及能荷 (EC)显著下降 (P <0 0 5 )、ADP呈下降而AMP呈上升趋势 ,CrP含量显著上升 (P <0 0 1)。结论 本法操作简便、结果准确 。
- 冯琳孟丹陈相健卞智萍杨笛张寄南
- 关键词：高效液相色谱法大鼠心肌
- T型钙通道在心肌肥厚大鼠心肌细胞钙内流中的作用被引量：4
- 2005年
- 目的研究T型钙通道在心肌细胞钙离子内流中的作用及其对心脏兴奋收缩耦联的可能影响。方法测定选择性T型钙通道阻滞剂米贝拉地尔对培养的SD乳大鼠心室肌细胞和二肾一夹心肌肥厚大鼠心室肌细胞[Ca2+]i的影响。结果血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激使乳大鼠心室肌舒张期细胞[Ca2+]i增高,收缩期细胞[Ca2+]i降低,[Ca2+]i上升和下降的时间延长。米贝拉地尔1.25～5μmol·L-1浓度依赖性降低AngⅡ引起的细胞[Ca2+]i变化。在心肌肥厚模型大鼠,咖啡因刺激后,[Ca2+]i增幅和最高[Ca2+]i明显降低。而米贝拉地尔25mg·kg-1·d-1(灌胃给药7～9周)组加入咖啡因刺激后细胞内[Ca2+]i增幅和最高[Ca2+]i明显增高。结论T型钙通道异常开放可以引起心肌细胞内钙超载。阻断T型钙通道,可能通过改善肌浆网摄取及释放钙的功能而抑制心肌细胞钙超载。
- 徐东杰陈相健盛红专徐晋丹卞智萍杨笛曹克将张寄南
- 关键词：钙通道钙通道阻滞药肥厚心室
- 单细胞逆转录聚合酶链反应与膜片钳同步技术被引量：1
- 2005年
- 目的 建立与膜片钳技术相结合的单细胞逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction,RT -PCR)技术。方法 采用传统酶解法分离出SD大鼠单个心室肌细胞,应用全细胞方式膜片钳技术记录通道电流后对同一细胞吸取内容物,采用RT-PCR技术,分别对单细胞内GAPDH及L型钙通道的mRNA表达进行逆转录聚合酶链反应。结果 电泳结果显示GAPDH及L型钙通道条带,对后者的测序分析结果与cDNA基因文库符合率为 100%。结论 此实验方法可以用于同时进行膜片钳操作及单细胞RT-PCR检测。
- 徐东杰张寄南曹克将陈相健
- 关键词：心室肌细胞分子生物学
- T型钙通道阻断剂对肥厚心肌L型钙通道电流及单细胞mRNA表达的影响
- 2004年
- 钙通道阻断剂咪拉地尔对T型钙通道有较高的选择性,在整体模型中对L型钙通道的作用尚不明确.本研究联合运用膜片钳技术及单细胞RT-PCR方法,研究二肾一夹肥厚心肌L型钙通道电流及mRNA表达以及药物的影响.
- 徐东杰张寄南曹克将陈相健杨笛徐晋丹卞智萍
- 关键词：单细胞MRNA表达
- 黄芪总皂甙对培养大鼠心肌细胞钙超载的影响被引量：36
- 2004年
- 目的:研究黄芪总皂甙是否对培养大鼠心肌细胞钙超载产生影响,为研究和开发中药的新成分提供理论依据。方法:异丙肾上腺素干预培养大鼠(1～3d的SD乳大鼠80只)心肌细胞造成心肌细胞钙超载的模型,同时用黄芪总皂甙、维拉帕米和美托洛尔分别作用于细胞72h。分为异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)组,黄芪总皂甙1(astragaosides1,AS1)组,AS2组,ISO+AS1组,ISO+AS2组,ISO+美托洛尔(metoprolol,M)组,ISO+维拉帕米(verapamil,V)组及正常对照组(control,C)组。检测肌细胞内游离钙离子浓度和肌质网的钙负荷,测定心肌细胞内脂质过氧化物丙二醛(maleicdialdehyde,MDA)的含量和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的活性。结果:异丙肾上腺素引起心肌细胞游离钙离子浓度和肌质网钙负荷明显增加(分别增加89%和116%)。黄芪总皂甙可浓度依赖性的抑制异丙肾上腺素的作用,从低浓度(10mg/L)到高浓度(100mg/L)。与ISO组比较,ISO+AS1组与ISO+AS2组可使细胞内的钙离子浓度分别降低37%和50%(169.2±24.2),(132.6±29.2),(267.6±82.0)nmol/L,t=2.57,P<0.05;t=3.81,P<0.01,使肌质网钙负荷分别降低23%和35%(P>0.05;t=2.48,P<0.05),但是黄芪总皂甙的这种作用不如维拉帕米,美托洛尔可基本阻断异丙肾上腺素的作用。
- 孟丹陈相健杨笛卞云云李萍张寄南
- 关键词：黄芪总皂甙心肌细胞钙超载病毒性心肌炎心力衰竭
- 黄芪总皂苷对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用被引量：18
- 2006年
- 目的研究黄芪总皂苷(astragalosides,AS)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)致大鼠心肌损伤的影响及机制。方法用AS(5mg·kg-1·d-1×7d,ip)或曲美他嗪(10mg·kg-1·d-1×7d,ip)等治疗ISO(5mg·kg-1·d-1×2d,sc)心肌损伤大鼠,观察心肌组织病理改变并测定心肌组织乳酸、丙二醛及高能磷酸化物ATP,ADP和AMP含量。结果AS组心肌组织病理分级接近曲美他嗪对照治疗组,心肌乳酸和丙二醛含量较模型组显著降低(分别为P<0·05,P<0·01),ATP含量增加(P<0·05),ADP含量降低(P<0·05),AMP含量有增加趋势,以上治疗指标与曲美他嗪组比较无显著差异(P>0·05)。结论AS可拮抗ISO引起的大鼠心肌损伤,其机制与改善心肌能量代谢、抑制脂质过氧化有关。
- 冯琳孟丹陈相健杨笛张寄南
- 关键词：黄芪总皂苷异丙肾上腺素能量代谢脂质过氧化
