广西壮族自治区科技攻关计划(0719004-3A)
- 作品数：4 被引量：48H指数：2
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- 鸡传染性喉气管炎病毒LAMP检测方法的建立被引量：2
- 2012年
- 为建立一种快速简单检测鸡传染性喉气管炎病毒的方法,根据已发表的鸡传染性喉气管炎病毒的TK基因序列,设计并合成了6对特异扩增鸡传染性喉气管炎病毒TK基因片段的引物,通过条件优化,成功建立了针对鸡传染性喉气管炎病毒的环介导等温扩增(LAMP)检测法,并测定其特异性和敏感性,并对采集的鸡临床样品的DNA分别进行了检测。结果表明,该法只检出鸡传染性喉气管炎病毒。敏感性扩增结果表明,LAMP检测鸡传染性喉气管炎病毒的最低浓度为100 fg的DNA模板。该LAMP方法有简便、快速和特异性高的优点,可用于临床上对鸡传染性喉气管炎病毒的快速检测。
- 谢志勤谢芝勋邓显文谢丽基庞耀珊刘加波范晴
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒
- 禽流感和新城疫病毒二重荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：38
- 2008年
- 目的:建立二重荧光定量RT-PCR方法,用于禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)的检测。方法:根据AIV和NDV的基因保守序列,设计了AIV和NDV的2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针;对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了能够同时检测AIV和NDV的二重荧光定量RT-PCR方法。结果:所建方法特异性好,对AIV和NDV的检测敏感性均达到2000个模板拷贝数,比常规RT-PCR敏感性高100倍;抗干扰能力强,对AIV和NDV不同模板浓度进行组合,仍可有效地同时检测2种病毒。对保存的AIV或NDV鸡胚尿囊液及临床病料进行二重荧光定量RT-PCR检测,结果尿囊液检测的拷贝数均达到1010/μL以上,临床病料的拷贝数为2.13×108～6.52×104/μL。结论:建立了用于检测AIV和NDV的二重荧光定量RT-PCR法,该方法特异、敏感、快速、可定量,对AIV和NDV的防制有重要意义。
- 谢芝勋谢丽基刘加波庞耀珊邓显文
- 关键词：禽流感病毒新城疫病毒
- 广西PRRSV、PCV、CSF的混合感染及PRRSV分子病原学研究被引量：7
- 2008年
- 为了弄清2007年发生于广西一些县市猪场的高致病性猪繁殖与呼吸综合征和其他疾病的混合感染情况，从广西7个县市发生高致病性猪繁殖与呼吸综合征的猪场采集病料，进行猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒（PCV）及猪瘟病毒（CSF）检测，并对检测的PRRSV进行分子病原学分析。结果显示，经PCR检测，86份样品中有60份为PRRSV阳性，36份为PCV阳性，2份为CSF阳性，说明发生于广西猪群的PRRSV与PCV共感染情况比较严重。通过PRRSV ORF5基因序列比较分析发现，来自广西7个县市不同猪场的PRRSV高度同源，核苷酸序列同源性为98．5％-99．8％，推导编码的氨基酸序列同源性为98．0％～100．0％；与VR2332和LV株的核苷酸序列同源性分别为88．7％-89．7％和62．2％-63．1％，氨基酸序列同源性分别为88．6％～89．6％和60．5％～61．3％，表明7个县市不同毒株的ORF5基因区域变异不大，均属美洲型。
- 谢丽基谢芝勋庞耀珊刘加波邓显文谢志勤董建宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 环介导等温扩增(LAMP)检测禽脑脊髓炎病毒方法的建立被引量：1
- 2013年
- 根据已发表的禽脑脊髓炎病毒的VP2基因序列,设计并合成了6对特异扩增禽脑脊髓炎病毒VP2基因片段的引物,通过条件优化,成功建立了针对禽脑脊髓炎病毒的环介导等温扩增(LAMP)检测法,并测定其特异性和敏感性,对采集的禽临床样品的核酸分别进行了检测。结果表明,该法只检出禽脑脊髓炎病毒。敏感性扩增结果表明,Lamp检测禽脑脊髓炎病毒为100fg的RNA模板。该LAMP方法有简便、快速和特异性高的优点,可用于临床上对禽脑脊髓炎病毒的快速检测。
- 谢志勤谢芝勋邓显文谢丽基庞耀珊刘加波范晴
- 关键词：禽脑脊髓炎病毒
- 禽流感和新城疫二重荧光定量RT-PCR检测方法的建立
- 禽流感(Avian influenza,AI)和新城疫(Newcastle disease,ND)是严重危害禽类的病毒性疾病,常以单独或混合感染的方式感染家禽,临床上进行鉴别诊断存在很大的困难。荧光定量PCR将PCR与荧...
- 谢芝勋谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤
- 文献传递
