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抑制葡糖脑苷脂酶对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白寡聚体形成及细胞自噬功能的影响被引量：1: 2013年; 目的研究抑制葡糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase,GBA)活性对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成及自噬功能的影响。方法在培养MES23.5细胞外添加不同浓度的GBA活性抑制剂(conduritol-β-epoxide,CβE),观察GBA活性的变化,同时在细胞外添加α-Syn单体使其进入细胞内并孵育48 h。使用双抗体夹心ELISA方法测定细胞内α-Syn寡聚体含量,观察细胞自噬活性、氧化应激和凋亡。结果随着CβE质量浓度的增加,GBA活性呈质量浓度依赖性的下降,而细胞内α-Syn寡聚体的含量则呈质量浓度依赖性的增加;在CβE处理细胞,随着细胞外添加的α-Syn单体的质量浓度加大,自噬活性和氧化应激液增强,同时细胞凋亡数量增加。结论抑制GBA活性导致细胞内α-Syn寡聚体增多以及依赖于α-Syn浓度的自噬活性和氧化应激增强和细胞凋亡增加。; 刘光伟尹娜弥娜李昕李尧华于顺; 关键词：MES 自噬

脑卒中患者血浆中α-突触核蛋白及其寡聚体形成量变化的研究被引量：4: 2013年; 目的探讨脑卒中患者血浆中α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)含量的变化,以及血浆对α-Syn寡聚体形成的影响。方法收集2012年3月至5月首都医科大学宣武医院神经科诊断为脑卒中的住院患者50例,另收集年龄和性别与之相匹配的30例健康人群为对照组。用ELISA法检测各组人群血浆中的α-Syn总量及寡聚体形成量。结果脑卒中患者血浆α-Syn总含量及寡聚体形成量较对照组均有显著增加。结论脑卒中患者血浆中α-Syn含量增高增强其寡聚体的形成。; 陈予东尹娜李昕杨巍巍李旭冉于顺; 关键词：Α-突触核蛋白脑卒中血浆

一种检测帕金森患者血浆促进α-突触核蛋白寡聚体形成能力的方法被引量：6: 2013年; 目的建立一种检测帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆促进外源性α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的方法。方法利用本室自制的鼠抗人α-Syn单克隆抗体建立检测α-Syn寡聚体的酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent,ELISA)方法。将不同质量浓度(200、100、50、25、12.5μmol/L)重组人α-Syn在正常人和PD患者血浆中分别振荡孵育(37℃、280 r/min)24、48、72、96 h。用所建立的ELISA法检测振荡后血浆中的α-Syn寡聚体含量。结果所建立ELISA方法可以特异性检测α-Syn寡聚体,不识别α-Syn单体。重组人α-Syn在质量浓度为100μmol/L、血浆稀释3倍以下、振荡孵育48h条件下可以在PD患者血浆中形成较多的寡聚体,并与对照血浆中形成的α-Syn寡聚体含量对比差异最大。结论成功建立了一种检测PD患者血浆促进α-Syn寡聚体形成能力的方法,该方法可以用于诊断PD患者血浆的潜在病理变化。; 李昕杨巍巍李雁于顺; 关键词：帕金森病 Α-突触核蛋白血浆寡聚体

α-突触核蛋白对大脑海马神经元NMDA受体影响的研究被引量：1: 2014年; 目的研究α-突触核蛋白（α-Synuclein,α-Syn）对海马神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptors,NMDARs）功能的影响。方法采用全细胞膜片钳记录模式记录正常培养10~12 d左右的海马神经元和经α-Syn处理1 h的海马神经元NMDA诱发电流。结果与正常培养10~12 d左右的海马神经元相比,经α-Syn处理的海马神经元NMDA诱发电流明显减小。结论α-Syn可减少海马神经元膜上NMDARs数量,并抑制NMDARs活性。; 陈予东杨巍巍李昕于顺; 关键词：Α-突触核蛋白 NMDA受体全细胞膜片钳

帕金森病患者血浆增强α-突触核蛋白寡聚体形成被引量：11: 2013年; 目的研究帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的影响。方法将重组人α-Syn加入PD和对照血浆中,37℃振荡孵育144 h,免疫印迹方法鉴定α-Syn寡聚体形成情况,ELISA方法分析α-Syn寡聚体形成的相对质量浓度。结果α-Syn在PD患者血浆中形成寡聚体含量明显高于对照组。结论 PD患者血浆可促进α-Syn寡聚体形成。; 尹娜陈予东李昕杨巍巍李旭冉于顺; 关键词：帕金森病血浆 Α-突触核蛋白寡聚体

α-突触核蛋白通过Rab5B下调海马神经元膜表面NMDA受体含量及其介导的Ca^(2＋)内流和内向电流被引量：2: 2017年; 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对原代海马神经元膜表面N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体含量和功能的影响及其机制。方法细胞外添加基因重组α-Syn,使其进入原代培养神经元细胞内,观察敲减Rab5B基因前后神经元膜表面NMDA受体(NMDAR)和Rab5B表达的变化;NMDA激活NMDAR,活细胞工作站测定神经元Ca^(2+)内流变化,全细胞膜片钳记录内向跨膜电流变化。结果α-Syn增加神经元Rab5B的表达,减少膜表面NMDAR含量,并因而抑制NMDA引起的Ca^(2+)内流及内向跨膜电流;敲减Rab5B可逆转α-Syn对NMDAR的下膜作用及功能的影响。结论α-Syn通过上调Rab5B而下调海马神经元膜表面NMDAR含量及其介导的Ca^(2+)内流及内向电流。; 于文娇杨巍巍李昕李昕陈敏李旭冉; 关键词：Α-突触核蛋白 NMDA受体

糖尿病患者血浆减少α-突触核蛋白的磷酸化和寡聚化被引量：1: 2017年; 目的研究2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)磷酸化和寡聚化聚集的影响。方法收集首都医科大学宣武医院内分泌科T2D住院患者70例,另收集年龄和性别与之匹配的健康志愿者70例作为对照组。采集抗凝血,并分离血浆。将基因重组人α-Syn在患者和对照志愿者血浆中振荡孵育,ELISA法检测各组人群血浆中寡聚化和磷酸化α-Syn形成量。结果 T2D患者血浆中寡聚化和磷酸化α-Syn形成量较对照组均有显著降低(P<0.05),且其与年龄有相关性。结论 T2D患者血浆以年龄依赖的方式减少寡聚化和磷酸化α-Syn的形成。; 郑凇杨李昕杨巍巍杨巍巍李旭颖李旭冉李旭冉; 关键词：Α-突触核蛋白 2型糖尿病血浆磷酸化

α-突触核蛋白在人脑膜瘤组织中的表达: 2011年; 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)在人脑膜瘤组织和对照脑组织中的表达及其与微管蛋白之间的关系。方法用抗人α-syn抗体对人脑膜瘤组织和对照脑组织进行免疫组织化学染色,观察、比较α-syn在脑膜瘤和对照脑组织中的表达和分布。用免疫荧光组织化学方法检测α-syn和β-微管蛋白以及突触素是否共存。结果对照脑组织中,α-syn主要存在于神经元的末梢和胞质部分,分别与突触素和β-微管蛋白共存。人脑膜瘤组织中,α-syn主要存在于肿瘤细胞的胞质,并且与β-微管蛋白在胞质共存,少部分存在于细胞核中。结论α-syn存在于脑膜瘤细胞的胞质和核中,并与β-微管蛋白在胞质中共存。; 吴杨苏玉金李昕刘光伟李尧华于顺; 关键词：Α-突触核蛋白 Β-微管蛋白脑膜瘤

基因重组型人SORL1蛋白质片段的原核表达和纯化: 2011年; 目的制备基因重组型人SORL1蛋白质片段,为探讨阿尔茨海默病的发病机制提供实验基础。方法采用PCR方法扩增人sorl1 cDNA编码区5 923～6 260 bp片段,克隆入原核表达载体pET-28a(+)中。用大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达重组质粒,用液相色谱法纯化基因重组蛋白。结果 PCR扩增产物为358 bp,其ATG和TGA之间的结构与人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp区完全一致。基因重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中高效表达,其表达产物存在于包涵体组分中。纯化的基因重组蛋白在SDS-PAGE中表现为单一条带,表观分子量约为13 000。结论人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp片段在原核细胞中大量表达,纯化后的基因重组蛋白可尝试用于抗体的制备。; 李爽李尧华叶懿文李昕于顺杨慧陈彪; 关键词：基因重组蛋白阿尔茨海默病

α-突触核蛋白和葡糖脑苷脂酶在食蟹猴不同脑区的表达被引量：2: 2013年; 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)及葡糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase,GCase,GBA)在食蟹猴不同脑区的表达。方法 Western blotting方法及免疫组织化学法检测α-Syn和GBA在食蟹猴纹状体和小脑皮质的表达。酶活性分析法检测GBA活性。免疫荧光双重标记法观察α-Syn和GBA的共定位。结果α-Syn和GBA在胞质和神经末梢中存在共定位。α-Syn、GBA在纹状体和小脑部位均有表达,但α-Syn在纹状体表达量高于小脑,而GBA在纹状体表达量低于小脑。此外,纹状体的GBA酶活性低于小脑。结论不同脑区α-Syn、GBA表达量不同,α-Syn表达量与GBA表达量呈反向关系。; 弥娜刘光伟李昕李尧华于顺; 关键词：Α-突触核蛋白食蟹猴

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