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雪旺细胞表达ICAM-1在炎症过程中的作用及相关机制: 目的:雪旺细胞(Schwann cell,SC)是周围神经系统特有的胶质细胞,它能够被诱导产生细胞因子和化学趋化因子,表达MHC-Ⅱ(Major histocompability complex)类分子及黏附分子,并发挥...; 杨君伶沈爱国程纯; 关键词：雪旺细胞细胞间黏附分子-1 丝裂原激活蛋白激酶脂多糖

p27^kipl及相关分子Skp2在U937细胞增殖过程中的表达变化及相互关系被引量：1: 2007年; p27^kipl为CIP／KIP家族的主要成员，对细胞周期起负调节作用。由于p27^kipl的蛋白水平主要受到S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase—associated protein 2，Skp2）介导的细胞周期依赖性、底物特异性的泛素-蛋白酶体途径调节，因此p27^kipl降解水平的调节对其正常生物学功能的发挥至关重要。Skp2为人类F-box蛋白家族成员，介导p27^kipl的多聚泛素化及随后的蛋白水解。研究发现Skp2在人类多种肿瘤中都有表达，并且与肿瘤组织的分化程度及预后相关。我们旨在对Skp2参与介导的p27^kipl的泛素-蛋白酶体途径降解与p27^kipl的稳定性之间的关系进行探讨，运用目前比较公认的血清饥饿合并释放方法同步化处理U937细胞，结合Western blot、免疫荧光双标记及激光共聚焦技术检测在不同生长状态下p27^kipl、Skp2及其他细胞周期相关分子在U937细胞内的表达和定位情况。; 王熵婵陆建新沈爱国张冬梅邵晓轶何松程纯; 关键词：P27^KIPL SKP2 相关分子增殖过程泛素-蛋白酶体途径

Skp2及Thr187磷酸化p27^kipl蛋白在非霍奇金淋巴瘤中的表达及相关性分析被引量：1: 2008年; 研究发现，p27^kipl为细胞周期重要调控蛋白，其水平及功能异常参与了非霍奇金淋巴瘤（NHL）的发生发展。S期激酶相关蛋白2（S－phase kinase－associated protein2，Skp2）能够特异性识别第187位苏氨酸（Thr187）磷酸化的p27^kipl，并介导其多聚泛素化及降解，这一过程的异常直接影响细胞内p27^kipl蛋白的绝对含量，并可能与NHL的发病机制有关^[1-2]。我们检测了与p27^kipl降解相关的Skp2及Thr187磷酸化p27^kipl蛋白在NHL中的表达，以探讨二者的表达异常与NHL发生发展的关系。; 张冬梅王燏婵沈爱国陆建新赵明铭何松程纯; 关键词：P27^KIPL蛋白非霍奇金淋巴瘤 SKP2 S期激酶相关蛋白 NHL 调控蛋白

p27^(kip1)及相关分子Jab1 CRM1在淋巴瘤细胞U937增殖过程中的表达变化及相互关系被引量：4: 2007年; 目的探讨p27kip1及相关分子Jab1、CRM1在淋巴瘤细胞U937增殖过程中的表达及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放处理淋巴瘤细胞株U937,通过细胞计数法检测该处理对U937细胞生长情况的影响;采用Western blot、免疫荧光双标法和激光共聚焦技术检测不同生长状态的U937细胞中p27kip1、Jab1的表达及亚细胞定位情况。结果血清饥饿造成U937细胞生长阻滞, p27kip1相关分子Jab1和CRM1表达下降,p27kip1蛋白总量增加,第10位丝氨酸磷酸化的p27kip1表达下降。与此同时,p27kip1也由胞浆高分布转变为胞核高分布。血清释放后上述分子呈现相反的变化,并且p27kip1的分布又主要集中在胞浆中。结论在刺激淋巴瘤细胞U937增殖过程中,Jab1和CRM1可能通过影响p27kip1的亚细胞定位与表达水平,参与调控淋巴瘤细胞的生长状态。; 王燏婵张冬梅沈爱国陆建新邵晓轶何松程纯; 关键词：JAB1 淋巴瘤 U937细胞

细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶11在大鼠脊髓横断性损伤后的表达变化被引量：2: 2008年; 目的探讨细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶11(CDK11)在横断性脊髓损伤(tSCI)后的表达变化以及定位情况。方法将36只成年SD大鼠随机分为假手术组,T9横断伤1d、3d、5d、7d和14d组,每组6只。采用Western blotting测法损伤后各时间段CDK11蛋白水平在脊髓中的表达变化。采用免疫组织化学方法检测CDK11在假手术组以及损伤组脊髓中的分布和定位。结果Western blotting显示,CDK11蛋白水平在SCI后呈现先升高后下降的趋势,CDK11p58的表达于损伤后3d开始显著升高,一直持续到第7d,之后逐渐下降。而CDK11p110也在3d、5d时高于假手术组,伤后7d则明显降低,至14d时有所回升。免疫组织化学表明,CDK11在假手术组脊髓中均匀分布,损伤后3d,CDK11在脊髓灰质和白质中表达明显增加;免疫荧光双标记表明,CDK11与神经元的标记物神经元核抗原(NeuN)、少突胶质细胞标记物环核苷酸-3′磷酸水解酶(CNPase)有明显共定位,与星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)也存在部分共定位。结论脊髓损伤后CDK11蛋白水平呈现明显的时相变化,并且与神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞存在共定位,提示CDK11参与了脊髓损伤后的病理生理过程。; 肖锋季玉红孙琳琳秦婧杨君伶刘永华赵剑沈爱国; 关键词：免疫组织化学免疫印迹法

p27^(kip1)及其出核相关分子激活蛋白1辅因子在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系: 2007年; 目的探讨 p27^(kip1)及其出核相关分子激活蛋白1(AP-1)的辅助因子 Jab1在淋巴瘤细胞中的表达变化及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放方法同步化处理淋巴瘤细胞系 Jurkat 和Raji 细胞,分别采用 Western blot 及 RT-PCR 技术检测 p27^(kip1)、Jab1在淋巴瘤细胞中的蛋白表达水平和mRNA 表达水平变化;采用来普霉素 B(LMB)刺激增殖过程中的淋巴瘤细胞,检测 p27^(kip1)、Jab1的表达变化;构建人 Jab1基因的 pcDNA3.1-myc-Jab1的真核表达质粒,脂质体转染 Jurkat 细胞,配合免疫荧光技术检测 p27^(kip1)的亚细胞定位情况;免疫沉淀检测 Jurkat 和 Raji 细胞中 p27^(kip1)与 Jab1的结合情况。结果血清饥饿导致 Jurkat 和 Raji 细胞生长周期停滞,p27^(kip1)蛋白总量增加,Jab1蛋白总量减少。血清释放后两者的蛋白水平呈现相反的表达变化,而 p27^(kip1)mRNA 水平无明显改变。LMB 可以抑制由血清释放引起的细胞增殖,在此过程中 p27^(kip1)表达上调,Jab1表达下调。转染 Jab1真核表达质粒的 Jar-kat 细胞 p27^(kip1)定位有明显的改变。免疫沉淀结果显示在 Jurkat 和 Raji 细胞中 p27^(kip1)与 Jab1相互结合。结论 Jab1可能通过与 p27^(kip1)结合来介导 p27^(kip1)的核内外分布并影响其表达,进而影响 p27^(kip1)的功能状态,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。; 王燏婵赵玥铭沈爱国陆建新张冬梅何松程纯

P27与Skp2在大鼠脑损伤过程中的关系:参与了损伤后的胶质增生: 目的:p27,作为细胞周期抑制因子家族的一员,在中枢神经系统发育过程中发挥着至关重要的作用。同时,Skp2作为F-box家族的一员,它在肿瘤细胞以及多种机体细胞中参与介导了p27的泛素化蛋白酶体降解,使得细胞周期能够顺利...; 刘永华沈爱国程纯; 关键词：脑损伤 P27 SKP2 胶质细胞增生

Thr187磷酸化p27^kip1、Skp2在肝细胞癌中的表达及其意义被引量：2: 2007年; 本研究检测了Thr187磷酸化p27（P—p27Thr187）、Skp2及p27在HCC中的表达情况并结合临床资料进行分析，从p27分子磷酸化失活的新角度进一步研究HCC发病的分子机制，探讨其中的临床病理意义。; 王酉陈莉陆牡丹李鹏崔小鹏秦军沈爱国; 关键词：肝细胞癌增殖细胞核抗原临床病理意义

CAPON等nNOS相关分子在大鼠脑发育与损伤过程中的生物学作用研究: 目的:观察大鼠脑发育与缺血-再灌注损伤以及兴奋性毒性损伤后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ结合配体(carboxy-terminal PDZ ligand of nNOS,CAPON)表达变化与细胞定位,探讨其在中枢神经...; 郭志琴吕青山沈爱国; 关键词：神经型一氧化氮合酶 NMDA受体

三氧化二砷对人肝癌SMMC-7721细胞中P27^(kip1)、JAB1表达的影响及其作用机制被引量：5: 2007年; 背景与目的:三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)作为治疗实体瘤的新药已应用于临床,但其作用机理尚不清楚。本研究拟探讨As2O3对肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,及其对细胞周期素依赖性激酶抑制剂(cyclin-dependent kinase inhibitors,CDKIs)P27kip1和P27kip1相关蛋白c-Jun结合蛋白-1(c-Jun activation domain-binding protein1,JAB1)表达的调控作用。方法:体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用0～8μmol/LAs2O3处理96h,用WST-8法检测细胞的存活率。用2!mol/LAs2O3作用72h,在指点时间点收集细胞,用Westernblot技术检测P27kip1、JAB1在SMMC-7721细胞中的表达,同时采用核浆分离方法及细胞免疫荧光技术检测P27kip1、JAB1表达和亚细胞定位的改变。结果:与对照组比较,As2O3可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,96h时IC50为(1.81±0.41)μmol/L。2μmol/LAs2O3处理12h后,SMMC-7721细胞中P27kip1蛋白表达增加,而JAB1蛋白表达减少。在As2O3处理后12h、24h,P27kip1与JAB1均发生从胞浆向胞核的易位。免疫荧光检测P27kip1和JAB1的亚细胞定位情况,结果也显示2μmol/LAs2O3可诱导两者在胞核的积聚。结论:As2O3可下调JAB1的表达,从而影响P27kip1的核内外分布及表达,并影响P27kip1的功能状态,进而参与调控肝癌细胞的增殖。; 崔小鹏王酉陆牡丹李鹏沈爱国; 关键词：三氧化二砷 SMMC-7721 P27^KIP1 JAB1

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江苏省卫生科研项目(H200632)

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