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反义CD151基因转染对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响被引量：2: 2006年; 目的观察pcDNA3.1真核表达载体介导的反义CD151基因转染对培养的大鼠动脉平滑肌细胞(VSMCs)迁移的影响。方法构建携带全长正义和反义CD151的真核表达载体pcDNA3.1-CD151和pcDNA3.1-anti-CD151重组质粒,转染体外培养的VSMCs,以RT-PCR和Western blot方法检测CD151的表达,用Boyden趋化小室方法观察细胞迁移。结果与载体对照组、脂质体对照组和空白对照组3组均值比较,转染48h后,反义CD151组mRNA表达降低58%,蛋白表达降低51%,正义CD151组的VSMCs CD151mRNA表达增加171%,蛋白表达增加133%;趋化迁移的细胞数,反义CD151组为37.9±6.3,正义CD151组为86.5±12.4;载体对照组、脂质体对照组和空白对照组分别为60.3±7.1、61.8±7.6和67.3±9.6。反义CD151组显著低于其余各组(P<0.01),正义CD151组显著高于其余各组(P<0.01)。结论pcDNA3.1真核表达载体介导的反义CD151转染,通过抑制CD151的表达,能够显著抑制大鼠VSMCs的迁移。; 杨军刘正湘蓝荣芳汪道文; 关键词：反义核苷酸平滑肌细胞

CD151基因转移对大鼠心肌梗死缺血心肌eNOS表达影响的实验研究: 2008年; 目的通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌,观察CD151对缺血心肌eNOS表达的影响。方法制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAV-CD151注入缺血心肌。4周后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151mRNA的表达,Western blot检测CD151的表达,检测eNOS的表达情况,了解高表达CD151对eNOS表达的影响。结果术后4周,CD151组心肌组织检测到外源性CD151mRNA的表达,假手术组、对照组、GFP组未检测到外源性CD151mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、对照组、GFP组(P<0·05);CD151组eNOS与磷酸化eNOS比值明显增加,与对照组、GFP组比较明显增加(P<0·05)。结论rAAV-CD151可以有效地转染大鼠心肌组织,激活eNOS,促进缺血心肌的血管生成,改善左室功能。; 郑振中刘正湘王梦洪郑泽琪彭景添魏云锋; 关键词：CD151 心肌梗死一氧化氮合酶

CD151基因转移对大鼠缺血心肌VEGF表达影响的实验研究: 2008年; 目的通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌,观察CD151对缺血心肌VEGF表达的影响。方法制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAV-CD151注入缺血心肌。4w后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151 mRNA的表达、Western印迹法检测CD151及VEGF的表达情况,了解高表达CD151对VEGF表达的影响。结果术后4w,CD151组心肌组织检测到外源性CD151 mRNA的表达,假手术组、对照组、GFP组未检测到外源性CD151 mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、对照组、GFP组(均P<0.05);CD151组VEGF表达无明显增加,与对照组、GFP组比较无明显增加(均P>0.05)。结论rAAV-CD151可以有效转染大鼠心肌组织,促进缺血心肌的血管生成,改善左室功能,但对VEGF表达没有影响。; 郑振中梁静王梦洪郑泽琪彭景添魏云锋刘正湘; 关键词：CD151 心肌梗死血管内皮细胞生长因子

CD151基因导入脐静脉内皮细胞对细胞增殖的影响被引量：1: 2007年; 目的:研究CD151基因导入脐静脉内皮细胞(HUVEC)对细胞增殖的影响,以进一步研究其生物学作用及其在血管生成中的作用机制。方法:通过构建p-AAV-CD151质粒并瞬时转染HUVEC,Western Blot检测CD151表达,采用MTT法测定HUVEC增殖的变化。结果:p-AAV-CD151组CD151表达明显增加,与正常对照组、p-AAV-GFP组比较表达差异有统计学意义(均P<0.05)。MTT法检测正常对照组、p-AAV-GFP组、p-AAV-CD151组的吸收度值分别为0.1663±0.0095、0.169±0.0085、0.2457±0.0044,p-AAV-CD151组较p-AAV-GFP组和正常对照组细胞增殖能力增强(P<0.05)。结论:CD151具有促进内皮细胞增殖的作用,CD151可能通过促进内皮细胞增殖达到促进血管新生的作用。; 郑振中刘正湘; 关键词：转染脐静脉内皮细胞细胞增殖

CD151对心肌梗死血流动力学的影响及其信号机制: 2008年; 目的探讨CD151对大鼠心肌梗死模型血流动力学的影响及其分子学机制。方法制作大鼠心肌梗死模型，将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒（rAAV）载体注入缺血心肌。4周后，心导管测定心脏功能，用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测外源性CD151mRNA的表达，Western blot检测CD151、P13K、Akt的表达。结果心肌梗死后左室功能明显下降，CD151高表达能够明显改善左室功能，并可上调磷脂酰肌醇3-激酶和磷酸化的蛋白激酶B的表达。结论CD151基因的导入能够改善心室功能，其分子机制与P13K／Akt信号通路的激活有关。; 郑振中刘正湘王梦洪郑泽琪彭景添魏云锋; 关键词：CD151 血流动力学磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B

重组腺相关病毒介导的CD151基因转移对大鼠缺血心肌血管密度的影响被引量：4: 2007年; 目的通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌,观察CD151基因对缺血心肌血管密度的影响。方法结扎冠状动脉前降支制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAV-CD151注入缺血心肌处。4周后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151 mRNA的表达、Western blot检测CD151的表达、Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色并计数注射部位心肌毛细血管数目,评价外源CD151对毛细血管密度的影响。结果术后4周,CD151组心肌组织检测到外源性CD151 mRNA的表达,假手术组、缺血对照组、GFP组未检测到外源性CD151 mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、缺血对照组、GFP组(P<0.01);CD151组血管密度与缺血对照组、GFP组比较显著增加(P<0.01)。结论rAAV-CD151可以有效地转染大鼠心肌组织,促进缺血心肌的血管生成。; 郑振中刘正湘; 关键词：CD151 心肌梗塞毛细血管密度

CD151对脐静脉内皮细胞Akt-Ser^(473)位点磷酸化和细胞增殖的影响被引量：2: 2007年; 目的:研究CD151对脐静脉内皮细胞(HUVEC)丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化Akt-Ser473(p-Akt-Ser473)表达和细胞增殖的影响。方法:通过构建pAAV-CD151质粒并转染HUVEC,HUVEC分为正常对照组、绿色荧光蛋白(GFP)组和CD151组。Western Blot检测CD151及Akt、p-Akt-Ser473表达,MTT法测定脐静脉内皮细胞的增殖能力。结果:①CD151组CD151及p-Akt-Ser473表达明显增加,CD151组与正常对照组和GFP组比较有显著性差异(P<0.05),而总Akt三组间无明显差异(P>0.05)。②MTT法检测正常对照组、pAAV-GFP转染组、pAAV-CD151转染组的A值分别为0.1663±0.0095、0.169±0.0085和0.2457±0.0044,pAAV-CD151转染组较pAAV-GFP转染组和正常对照组细胞增殖能力增强,且有显著性差异(P<0.05)。结论:CD151具有促进内皮细胞增殖的作用。CD151可能是通过激活p-Akt-Ser473,增加Akt活力,达到促进细胞增殖的作用。; 郑振中刘正湘; 关键词：CD151 磷酸化脐静脉内皮细胞细胞增殖

CD_(151)对脐静脉内皮细胞PI3K表达及细胞增殖的影响被引量：2: 2006年; 目的研究CD151对脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及PI3K表达的影响,以进一步研究其生物学作用及其在血管生成中的作用机制。方法通过构建p-AAV-CD151质粒并转染HUVEC,采用MTT法测定HUVEC增殖的变化,W estern B lot检测CD151及PI3K表达。结果p-AAV-CD151转染组CD151表达明显增加,p-AAV-CD151转染组与正常对照组、p-AAV-GFP转染组比较表达差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法检测正常对照组、p-AAV-GFP转染组、p-AAV-CD151转染组的OD值分别为0.1663±0.0095、0.169±0.0085、0.2457±0.0044,p-AAV-CD151转染组较p-AAV-GFP转染组和正常对照组细胞增殖能力增强,差异有统计学意义(P<0.05)。p-AAV-CD151转染组PI3K表达明显增加,p-AAV-CD151转染组与正常对照组、p-AAV-GFP转染组比较表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD151具有促进内皮细胞增殖的作用,CD151可能通过上调PI3K表达,促进内皮细胞增殖达到促进血管新生的作用。; 郑振中刘正湘; 关键词：脐静脉内皮细胞 1-磷脂酰肌醇3-激酶细胞增殖

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湖北省卫生厅科研基金(JX2A04)

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