湖北省卫生厅科研基金(JX2A23)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
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- 相关机构：广州军区武汉总医院华中科技大学更多>>
- 发文基金：湖北省卫生厅科研基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胚神经干细胞的体外培养和超微结构观察被引量：12
- 2006年
- 目的观察体外分离培养的人胚脑神经干细胞的生物学行为和超微结构特征。方法利用无血清培养和单细胞克隆技术从人胚脑组织中分离培养神经干细胞并用血清诱导其分化,应用免疫荧光细胞化学技术对培养细胞及其分化细胞进行鉴定,并分别用扫描电镜和透射电镜观察其超微结构。结果从人胚脑组织分离的细胞群呈悬浮球状生长,具有连续增殖的能力,并可分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。扫描电镜发现神经干细胞球中的细胞之间连接较为松散,无紧密连接结构;透射电镜发现神经干细胞的胞核巨大,胞浆少,核浆比例较大,胞浆内细胞器简单,以核糖体和内质网居多。结论神经干细胞具有自我更新能力和多向分化潜能,其超微结构显示早期原始幼稚细胞的发育特征。本研究为进一步的神经干细胞基础研究和临床应用奠定了基础。
- 陈刚秦尚振马廉亭雷霆潘力薛德麟
- 关键词：神经干细胞人类胚胎超微结构
- 人胚神经干细胞向神经元样细胞诱导分化的研究
- 2006年
- 目的探讨通过一定的培养条件,使神经干细胞在体外向神经元方向分化。方法在贴壁培养的情况下以含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肝素的培养基诱导神经干细胞分化,观察分化的细胞形态并用免疫细胞化学技术检测分化细胞的神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。结果诱导7d后免疫细胞化学检测显示NSE阳性细胞占细胞总数的(47.3±1.7)%,明显高于对照组(P<0.01)。分化后细胞的胞体直径、表面积和突起长度也明显高于对照组(P<0.01)。结论在体外应用bFGF和肝素诱导神经干细胞向神经元分化是可行的,bFGF和肝素既能促进神经干细胞分化成更多的神经元,也可促进分化后神经元的成熟。
- 陈刚秦尚振马廉亭雷霆潘力薛德麟
- 关键词：神经元
- 神经干细胞与骨髓间充质干细胞混合培养的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨神经干细胞与骨髓间充质干细胞混合培养对神经干细胞分化为神经元的影响。方法将纯化的神经干细胞和骨髓间充质干细胞混合培养，观察神经干细胞的分化状态，应用免疫细胞化学技术对培养细胞及其分化细胞进行鉴定。结果共培养组中36.35%±4.63%的细胞表达神经元特异性蛋白NSE，明显高于对照组中12.78%±6.91%的表达率。结论骨髓间充质干细胞能提高神经干细胞分化为神经元的比例，还能延长神经元的存活时间。
- 陈刚秦尚振徐国政潘力李俊龚杰胡军民马廉亭
- 关键词：神经元共同培养技术
- 人胚脑与脊髓神经干细胞体外生物学特性的差异被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨人胚脑源性神经干细胞和脊髓源性神经干细胞的体外培养和分化的差异。方法:从人胚脑组织和脊髓组织中分离培养神经干细胞,分为EGF组、bFGF组、EGF±bFGF组,在连续传代过程中观察并比较神经干细胞体外培养特性的差异:用血清诱导神经干细胞分化,观察其分化状况的不同。结果:从人胚脑组织分离的细胞在bFGF 单独存在时无法形成神经球,在EGF或EGF±bFGF存在时形成大量具有连续增殖能力的神经球;从人胚脊髓组织分离的细胞在EGF单独存在时无法形成神经球,在bFGF单独存在时只形成少量神经球,在EGF±bFGF存在时形成大量具有连续增殖能力的神经球。同样在EGF±bFGF存在的情况下,脑源性于细胞的增殖速度较快。经血清诱导后,脑组织来源的干细胞分化为NSE阳性细胞数明显多于脊髓组织来源的干细胞,二者之间的差异具有显著性(P<0．05)。结论:脑源性和脊髓源性神经干细胞在生长和分化方面有明显差别:脑源性神经干细胞可在bFGF或EGF士bFGF存在的情况下长期传代,而脊髓源性神经干细胞只能在EGF±bFGF存在的情况下长期传代,脑源性干细胞的增殖能力明显高于脊髓源性干细胞;脑源性干细胞较脊髓源性干细胞更易分化为神经元。
- 陈刚秦尚振马廉亭雷霆潘力薛德麟
- 关键词：神经干细胞人类胚胎脑脊髓生物学特性
- 一种帕金森病大鼠模型的建立及评价被引量：4
- 2009年
- 目的探讨应用6-羟基多巴胺(6-OHDA)毁损大鼠黑质致密部制作偏侧帕金森病(PD)模型的方法和应用价值。方法采用立体定向微量注射6-OHDA于大鼠黑质致密部,观察经阿朴吗啡诱导后大鼠的行为及黑质多巴胺能神经元形态学变化。结果部分大鼠注射后即出现行动迟缓、少动、竖毛、躬身、尾部强直、肢体震颤、嗅探和易激惹等异常行为。术后4周时,共33只大鼠经阿朴吗啡诱导后在30min(P<0.01)的平均旋转圈数>7 r/min,达到成功模型的标准,模型成功率为82.5%(33/40)。免疫组化观察发现模型组大鼠注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧和对照组注射侧区明显减少(P<0.01)。结论利用6-OHDA毁损大鼠黑质致密部可以较快建立稳定的PD大鼠模型,方法简便实用,动物死亡率低,模型成功率高。
- 陈刚徐国政段秋红胡军民秦尚振潘力李俊龚杰马廉亭
- 关键词：帕金森病大鼠模型6-羟基多巴
